INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

BIOQUIMICA GENERAL
Bitácora de la práctica: Efecto de la concentración del sustrato y de inhibidores sobre la velocidad de ala
reacción.
Nombre: Mancera Molina Brenda Grupo: 4QM1 Sección: 1 Equipo:4
Objetivos

• Determinar la concentración de sustrato en la cual la enzima alcanza su velocidad máxima.

• Calcular los parámetros cinéticos de la reacción catalizada por la invertasa utilizando diferentes gráficos de la
ecuación linealizada de Michaelis-Menten
• Determinar el efecto de un inhibidor en la actividad de la invertasa
• Analizar el efecto de un inhibidor sobre los parámetros cinéticos de la enzima.

Introducción

En las reacciones no catalizadas por enzimas la formación de producto depende directamente de la concentración de
sustrato añadido, pero en las reacciones catalizadas por enzimas, generalmente se obtiene una dependencia
hiperbólica de la velocidad respecto a la concentración de sustrato. A pesar de que la curva del efecto de la
concentración de sustrato en la velocidad de la enzima es compleja, existe una ecuación matemática que expresa la
relación que existe entre las variables: la hipérbola cuadrática o también denominada ecuación de Michaelis-Menten,
llamada así debido al trabajo pionero de Michaelis y Menten y de Bringgs y Haldane. L

ara

Para obtener los valores de Km y Vmax es la de utilizar alguna de las expresiones matemáticas que producen una
línea recta como son la de Lineaweaver-Burk, también llamada de dobles recíprocos

Una de las formas de regulación de la actividad de una enzima es a través de moléculas que disminuyen su velocidad
de reacción, llamadas inhibidores. Los inhibidores pueden encontrarse de manera natural en las células para controlar
la velocidad de una reacción metabólica, o bien pueden ser compuestos sintéticos que se utilizan como herramientas
experimentales para el estudio de las reacciones enzimáticas. La interacción de un inhibidor y una enzima varía
dependiendo de la naturaleza química del inhibidor y de la reacción química que cataliza la enzima.

• Los inhibidores competitivos afectan el progreso de la reacción al unirse a una enzima, por lo general en el sitio
activo, y evitan que el sustrato real se una. En un momento dado, solo el inhibidor competitivo o el sustrato pueden
unirse a la enzima (no ambos). Es decir, el inhibidor y el sustrato compiten por la enzima. La inhibición competitiva
actúa disminuyendo el número de moléculas de enzima disponibles para unirse el substrato.
• Inhibidor incompetitivo o acompetitivo no es capaz de unirse a la enzima libre, sino que sólo se une al complejo
enzima-sustrato. Lo anterior puede deberse a que la unión del sustrato expone o crea sitios de acceso o unión
para el inhibidor, en el sitio activo o fuera de éste. Una vez que el inhibidor se une la enzima se previene la
formación de producto.
• Los inhibidores no competitivos no impiden que el sustrato se una a la enzima. De hecho, el inhibidor y el
substrato no afectan la unión del otro con la enzima en lo absoluto. Sin embargo, cuando el inhibidor se une, la
enzima no puede catalizar su reacción para producir un producto. De esta forma, la inhibición no competitiva actúa
reduciendo el número de moléculas funcionales de enzima que pueden realizar la reacción
Tabla1. Resultados obtenidos del experimento efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de la
reacción.
Testigo 1 2 3 4 5 6

Absorbencia 0.0 0.734 0.957 1.234 0.883 0.863 0.963

Azúcar
reductor
(𝝁moles/2ml)

Velocidad
(unidades de
invertasa)

Concentración
del sustrato
(mol/l=M)

Tabla2. Resultados obtenidos del experimento efecto de inhibidores sobre la velocidad de la reacción.

Testigo 1 2 3 4 5 6

Absorbencia 0.0 0.043 0.339 0.597 0.932 1.037 1.042

sin inhibidor

Absorbencia 0.0 0.027 0.053 0.082 0.100 0.142 0.192

con inhibidor

Azúcar
reductor
(𝝁moles/2ml)

Velocidad
(unidades de
invertasa)

Concentración
del sustrato
(mol/l=M)

Bibliografía

Rivera G. E, Cinética Enzimática, UNAM, Obtenido el de abril del 2021 en:

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/CineticaEnzimaticaEnriqueRivera_32548.pdf

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Lehninger, A. L. "Principios de Bioquímica", 3a. ed., Ediciones Omega S.A., España, pp. 243-

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Voet D., Voet J.G., “Biochemestry” Editorial John Wiley & Sons, Inc., 3a Ed. Pp 465- 494, (2004)