INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

BIOQUIMICA GENERAL
Bitácora 6: Practica. Efecto de la concentración de sustrato e inhibidores

Morales Ramos Priscila, Grupo: 4QV1 Sección: 1

INTRODUCCIÓN
En cualquier reacción catalizada, el sustrato debe unirse primero con la enzima para
formar el complejo enzima-sustrato. Para una concentración de sustrato particular,
un aumento en la concentración enzimática aumenta la velocidad de la reacción
catalizada. A concentraciones enzimáticas más altas, más moléculas están
disponibles para unirse al sustrato y catalizar la reacción. Mientras la concentración
de sustrato sea mayor que la concentración de la enzima, hay una relación directa
entre la concentración de la enzima y la actividad enzimática. En muchas reacciones
catalizadas por enzimas, la concentración del sustrato es mucho mayor que la
concentración de la enzima. Cuando la concentración de enzima se mantiene
constante, la adición de más sustrato aumentará la velocidad de la reacción. Si la
concentración del sustrato es alta, puede saturar todas las moléculas de la enzima.
Entonces la velocidad de la reacción alcanza su máximo y la adición de más sustrato
no aumenta más la velocidad de la reacción.
La ecuación de Michaelis-Menten es capaz de describir el cambio sufrido por la
velocidad de una reacción catalizada por una enzima al variar la concentración del
sustrato. La reacción que se establece entre la enzima y su sustrato va precedida
de la formación de un complejo. Michaelis determinó la
denominada constante de Michaelis (Km) que
establece la afinidad entre una enzima y su sustrato.
Predijo y explicó la velocidad de reacción, es decir la
cantidad de sustrato que reacciona con la enzima por
unidad de tiempo, así como los factores que estimulan
o inhiben dicha velocidad de reacción. Demostró que
las sucesivas adiciones de sustrato al medio de la
reacción provocan un abrupto incremento de la velocidad de reacción hasta un
cierto punto en el que la enzima se satura y la adición posterior de sustrato ya no
afecta a la velocidad; es el momento en el que se alcanza la velocidad máxima de
reacción (Vmax).
Existe otra representación de la cinética enzimática aparte de la ecuación de
Michaelis-Menten, conocida como diagrama de Lineweaver-Burk, que es más
práctico para calcular los parámetros cinéticos de una enzima. En esta
representación se grafica el inverso de los valores de la cinética de Michaelis-
Menten, lo que da como resultado una línea recta.

Los inhibidores son, por el contrario, sustancias que disminuyen la velocidad de la

reacción. Los inhibidores suelen actuar en las primeras etapas del mecanismo de la
reacción bloqueando algunos intermedios de la reacción lo que hace que el proceso
no pueda avanzar con la velocidad habitual.
 Inhibidor competitivo: son moléculas que tienen una similitud estructural y
química con el sustrato de la enzima, por lo que se pueden unir al sitio activo.
Sin embargo, debido a que el inhibidor no es idéntico al sustrato, la enzima
no es capaz de convertirlo en producto y el inhibidor simplemente bloquea el
sitio activo, porque no es posible que tanto el inhibidor como el sustrato se
encuentren al mismo tiempo dentro de éste. Si se adiciona más (y el inhibidor
no se une de manera irreversible a la enzima) se reduce la inhibición
 Inhibidor incompetitivo o acompetitivo: Es un inhibidor que no es capaz
de unirse a la enzima libre sino que sólo se une al complejo enzima-sustrato.
Lo anterior puede deberse a que la unión del sustrato expone o crea sitios de
acceso o unión para el inhibidor, en el sitio activo o fuera de éste. Una vez
que el inhibidor se une la enzima se previene la formación de producto .
 Inhibidor no competitivo: El inhibidor se une tanto a la enzima libre como
al complejo enzima-sustrato. Un inhibidor no competitivo puro es aquel que
modifica tanto la Km de la enzima como la pendiente de la curva de dobles
recíprocos, así las curvas en ausencia y presencia del inhibidor presentan
diferencias en ambos interceptos, 1/Vmax y 1/Km. La mayor parte de los
inhibidores no competitivos en realidad son inhibidores mixtos es decir no
sólo se afecta la unión del sustrato sino también la conversión del sustrato a
producto.
OBJETIVOS EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO

 Analizar el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de la

reacción enzimática.
 Determinar la constante de Michaelis-Menten (Km) de forma gráfica por los
métodos de Michaelis- Menten y Lineweaver- Burk.
OBJETIVOS EFECTO DE LOS INHIBIDORES
 Determinar el tipo de inhibición producido por una sustancia (anilina) sobre
la actividad de la invertasa.
DIAGRAMA DE FLUJO CONCENTRACIÓN DE SUSTRATOS
DIAGRAMA DE FLUJO EFECTO DE INHIBIDORES

BIBLIOGRAFÍA
Timberlake, K. (2013). Química general, orgánica y biológica: estructuras de la vida.
México: Pearson Educación.
McKee, T., McKee J.R., “Bioquímica” 3a Edición, Ed. McGraw Hill-Interamericana.
López Nicolás, J. M. Los cuatro mosqueteros de la cinética enzimática.
Revista eubacteria. Recuperado 13 de marzo de 2022, de
https://www.um.es/eubacteria/Los_cuatro_mosqueteros_de_la_cinetica_enz
imatica_Eubacteria34.pdf