DETECCION DE LA

RESISTENCIA BACTERINA

MODULO 1
Mecanismo Generales de
Resistencia Bacteriana
Edgar Gonzales Escalante
 Resistencia bacteriana

Capacidad de una
cepa bacteriana de
resistir la acción de
cierto antibiótico
 Factores que influyen en la
resistencia bacteriana
Dosis – Vía – Duración
Espectro de acción

Tipo de MO Edad – Procedencia

Multiresistencia Infección - colonización
¿Como ocurre la resistencia bacteriana?

PRESIÓN SELECTIVA
¿Cómo se propaga la resistencia?
 Resistencia bacteriana
Resistencia intrínseca o natural
La bacteria no tiene la molécula/reacción enzimática que es el
blanco del antibiótico.
El antibiótico no puede ingresar al interior de la bacteria.
...es específica del género y/o especie...
Resistencia adquirida
Se debe a la adquisición de genes que codifican para resistencia.
O a la mutación de algunos genes (generalmente genes de las
proteínas blanco).
...es una propiedad específica de cada cepa (no todas las bacterias
son transformables)...
 Resistencia adquirida
“Un antibiótico es un metabolito producido por una bacteria o un hongo que a
baja concentración puede inhibir el crecimiento de bacterias...”

“La mayoría de los antibióticos utilizados derivan de compuestos producidos por

bacterias y hongos del suelo...”

“La microbiota del suelo desarrolló mecanismos para defenderse de la actividad de

los antibióticos, es decir son mecanismos naturales, anteriores al uso clínico de los
antibióticos...”

“Las bacterias pueden transmitir “Los genes normales (“house-

estos genes de defensa en forma keeping”)de una bacteria pueden
horizontal desde una cepa resistente mutar, haciendo que los antibióticos
a un cepa sensible” no puedan actuar”
 Resistencia adquirida
Depende de...
el agente antimicrobiano
la bacteria
el mecanismo de resistencia
Se puede cuantificar como un valor de concentración inhibitoria mínima (CIM)
El valor de CIM puede aumentar entre 3 y 100 veces

Cromosómica Extracromosómica

“Cuando la resistencia se adquiere por

“Cuando la resistencia se adquiere por transferencia horizontal de genes la
mutación la CIM aumenta de 3 a 5 CIM aumenta por lo general entre 50 y
veces.” 100 veces”
Expresión de la resistencia
 Mecanismos de Resistencia
1. Modificación del sitio blanco

2. Disminución de la disponibilidad intracelular del antibiótico

(impermeabilidad)
a. Se impide la entrada (perdida de porinas)
b. Aumenta la salida (bomba de eflujo)

3. Inactivación enzimática

4. Establecimiento de una ruta metabólica alternativa

 1. Modificación del sitio blanco
a) Un huésped susceptible en el que un
antibiótico es capaz de unirse a su objetivo
específico y ejercer un efecto inhibidor.
b) La mutación del sitio de destino (ej.
fluoroquinolonas) o recombinación para
proporcionar un alelo mosaico (PBP en
neumococos) resulta en un objetivo funcional
con afinidad reducida para el antibiótico.
c) La modificación de la diana mediante la adición
de un grupo químico también puede evitar la
unión antibiótico sin alterar la secuencia de la
proteína primaria de la diana, que conserva su
actividad.
 1. Modificación del sitio blanco
-lactámicos (pared):
Cambios (mutaciones) en las PBP (Penicillin Binding Proteins)… disminuye la afinidad.
Más común en Gram +.
NO -lactámicos (pared):
Involucra varios genes. Cambia la cadena lateral D-ala-D-ala por D-ala-D-hidroxibutirato en la síntesis
de PG….
Este cambio es reconocido por las enzimas de síntesis de PG...pero no por la Vancomicina…

Ampicilina
Vancomicina
 1. Modificación del sitio blanco
Macrólidos (30S):
Eritromicina: una rRNAmetilasa introduce 2 grupos metilo en 2 adeninas del rRNA de 23S de la
subunidad mayor del ribosoma...no hay unión.
Rifampicina (síntesis de RNA):
Mutación puntual en la subunidad  de la RNA polimerasa…
Quinolonas (síntesis de DNA, quimioterápicos):
Mutación puntual en la subunidad A de la DNA girasa…

Ac. Nalidíxico
Eritromicina
 1. Modificación del sitio blanco

Mutaciones en las subunidades GyrA, ParC, GyrB y

ParC en aislamientos resistentes a quinolonas
2. Disminución de la disponibilidad intracelular del
antibiótico (impermeabilidad)

• Disminución de la captación por cambios en la

permeabilidad: ej. perdida de porinas

• Mediante un mecanismo de transporte activo, expulsión

del antibiótico
 Perdida de porinas
• Porinas: canales proteicos de la
membrana externa BGN, que
participan en el transporte de
moléculas hidrofílicas.
• Este transporte presenta algún
grado de selectividad y
especificidad, no son solo
agujeros de la membrana externa
 Perdida de porinas
Tipos de porinas
• Porinas generales:
– permiten el paso de moléculas hidrofílicas
sin especificidad de sustrato
– Discriminan de acuerdo a tamaño o carga
• Porinas especificas de sustrato
– Permiten el paso solo de ciertos sustratos
– La especificidad la logran mediante la
presencia de sitios de unión específicos
para el sustrato dentro del canal
Porinas relacionadas con la resistencia a los antibióticos
en diferentes especies
Adquisición de resistencia mutacional

Cepa salvaje
Adquisición de resistencia
mutacional

Mutante: perdió porinas Mutante: canal estrecho Mutante: disminución de expresión

 Bomba de Eflujo

• Son complejos proteicos de

membrana capaces de
expulsar de la bacteria
sustancias toxicas.
• Las primeras proteínas
transportadoras identificadas
fueron las bombas de eflujo
de tetraciclinas
 Clasificación de las Bombas de Eflujo
• Sistemas de transporte activo primario:
– Directamente emplean la energía liberada por la hidrolisis de
ATPs para impulsar el movimiento de sustancias
transportadoras (ej. ABC)
• Sistemas de transporte activo secundario:
– Emplean la energía de gradiente de protones a través de la
membrena celular para impulsar el movimiento de las
sustancias que transportan (ej. MATE, RND)
 Bomba de Eflujo

 la familia de resistencia-nodulación-
división (RND)
 la familia cassette de unión-ATP (ABC),
 la familia de expulsión de componentes
tóxicos y multidrogas (MATE).
 la superfamilia mayor facilitador (MFS),
 la familia pequeña multidroga
resistentes (SMR)
 Bomba de Eflujo
Sistemas de expulsión activa de multi-resistencias
 3. Inactivación enzimática
Inactivación por hidrolisis
a) Un huésped susceptible con un
objetivo que se inhibe de
manera eficiente
b) Adquisición y producción de Huésped susceptible

una enzima que destruye el

antibiótico (ej. betalactamasas) Inactivación por impedimento estérico

c) Adquisición y la producción de
una enzima que modifica la
estructura del antibiótico (ej.
enzimas modificadores de
aminoglucósido)
 3. Inactivación enzimática
a) Un huésped susceptible con un
objetivo que se inhibe de
manera eficiente
b) Adquisición y producción de
una enzima que destruye el
antibiótico (ej. betalactamasas)
c) Adquisición y la producción de
una enzima que modifica la
estructura del antibiótico (ej.
enzimas modificadores de
aminoglucósido)
 3. Inactivación enzimática
Inactivación por hidrolisis
a) Un huésped susceptible con un
objetivo que se inhibe de
manera eficiente
b) Adquisición y producción de Huésped susceptible

una enzima que destruye el

antibiótico (ej. betalactamasas) Inactivación por impedimento estérico

c) Adquisición y la producción de
una enzima que modifica la
estructura del antibiótico (ej.
enzimas modificadores de
aminoglucósido)
 3. Inactivación enzimática
a) Un huésped susceptible con un
objetivo que se inhibe de
manera eficiente
b) Adquisición y producción de
una enzima que destruye el
antibiótico (ej. betalactamasas)
c) Adquisición y la producción de
una enzima que modifica la
estructura del antibiótico (ej.
enzimas modificadores de
aminoglucósido)
 3. Inactivación enzimática
Inactivación de los -lactámicos

-lactamasas...
a) Existe un gran número de enzimas diferentes…
b) Se agrupan por familias de acuerdo al gen que las codifica…
c) Pueden estar codificadas en plásmidos o en el cromosoma…

Gram (–) Gram (+)

Periplasmáticas Extracelulares
Constitutivas Inducibles
Penicilinas = Cefalosporinas Penicilinas > Cefalosporinas
3. Inactivación enzimática
Inactivación de los -lactámicos por -lactamasas
 3. Inactivación enzimática
Inactivación de Aminoglucósidos (30S):
La modificación química
generalmente limita el ingreso del
antibiótico.
La presencia de los grupos OH o NH2
hacen que un determinado
aminoglucósido sea susceptible o no
a modificación por estas enzimas…
Las enzimas modificadoras están
codificadas en plásmidos,
transposones o integrones…
 3. Inactivación enzimática
Inactivación de Aminoglucósidos:
Hay 3 tipos de enzimas modificadoras:

N-acetil transferasas (ACC)

Acetilan un grupo amino
O-adeniltransferasas (ANT)
Adenilan un grupo hidroxilo
O-fosfotransferasa (APH)
Fosforilan un grupo hidroxilo
Enzimas modificadoras de aminoglucosidos

AD Adenilasa AC Acetilasa P Fosforilasa X Protegido de la enzima

Fenotipos de resistencia a los
aminoglucosidos
 3. Inactivación enzimática
Inactivación de Cloramfenicol (50S)

NH CO CHCl2
Cloranfenicol Acetil O2N CH CH CH2
Transferasa (CAT) OH OH
AcCoA

Cloranfenicol Acetilado no se une

NH CO CHCl2
al ribosoma... O2N CH CH CH2
Existen muchas CAT distintas, OH O CO CH3

probablemente de origen AcCoA

independiente… NH CO CHCl2
O2N CH CH CH2
O O CO CH3
CO CH3
 4. Establecimiento de una ruta
metabólica alternativa
Es un tipo de resistencia mediada por cambios en la molécula blanco.
En este caso cambian varias enzimas de la ruta metabólica haciendo que
el antibiótico no pueda actuar.

Ej.: Sulfas y Trimetoprim

Trimetoprim