Escuela Superior Politécnica de Chimborazo

Facultad de Salud Pública

Carrera de Medicina

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Ayala Rubio Karla Damarys 1555 Santos Nono Ruth Nicole 1585
Bermúdez Carreño María José 1557 Sigcho Saltos Jackeline Sthefany 1669
Chela Chillo Lérida Fernanda 1599 Torres Dueñas John Marcos 1625
Guano Ponluisa Alexander Rene 1565 Villalva Freire Isabela Eloísa 1590
Salvatierra Zambrano Madelin Nicole 1622

TINCIONES O COLORACIONES
 Objetivos
01 02 03
Dar a conocer de Explicar cada uno Abarcar de manera
manera detallada de los tipos de oportuna todos los
el tema tinciones y a su textos e
correspondiente a ves ejemplificar informaciones
tinciones o para una mayor verídicas y
coloraciones. comprensión confiables.
 Sumario
1. Tinciones o coloraciones:
1.1. Definiciones de tinciones o coloraciones
1.2.Coloraciones simples.
1.3.Coloraciones compuestas o diferenciales
1.4.Coloraciones negativas
1.5.Coloraciones específicas para la observación de estructuras bacterianas.
1.6.Otras coloraciones empleadas en bacteriología, virología, micología y
parasitología
 BIBLIOGRAFÍA
López, L., Durán, M., & Castro, C. (2013). Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología.
Obtenido de Medigraphic: https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf

Mayo, N. (2009). Polímeros capsulares bacterianos en E. coli K92: ácido colánico y ácido polisiálico.
Obtenido de UNIVERSIDAD DE LEÓN:
https://buleria.unileon.es/bitstream/handle/10612/821/2009ON-
NAVASA%20MAYO,%20NICOL%C1S.pdf;jsessionid=0EAFDC662D51E5ED55EF8C12E51A9CD
3?sequence=1

Rodriguez, F. (2017). Tinción negativa de cápsulas . Obtenido de Laboratorio de Diagnóstico Clínico y

Biomédico : https://www.franrzmn.com/tincion-negativa-de-capsulas/

Macpherson, I., & Roqué-Sánchez, M. (2018). Análisis de la ética de principios, 40 años después. Revista
Bioética, 26(2), 189–197. https://doi.org/10.1590/1983-80422018262239

Martínez, J. (2017). PRINCIPIO DE AUTONOMÍA. https://www.redalyc.org/pdf/875/87553352004.pdf

Descubrimiento siglo XVII
 Tinción o coloración

Es una técnica que utiliza

compuestos químicos para
aumentar su contraste y ser
visible ante un microscopio.
 Tipos de colorantes

Sales colorantes
Básicos Ácidos Liposolubles
No tiñen la Se utiliza en
Tiñen la célula
célula combinación de
bacteriana
bacteriana, es componentes
uniformemente.
usada como lipídicos de la
contraste célula.
negativo.
 Tipos de
colorantes
Vitales
Son aquellas que se
realizan sobre
células que están
vivas. Supravitales
No vitales
Se realizan sobre
células vivas pero Sobre células
aisladas del muertas.
organismo que
proceden.
 Coloraciones Simples
o Se habla de coloraciones simples, cuando una muestra extendida se tiñe con un solo colorante.

Si se tiñe con safranina, las bacterias

adquieren un color rojo.

Si se usa azul de metileno, las bacterias se

teñirán de azul.

Si se tiñe con cristal violeta, las bacterias

aparecerán teñidas de color violeta.

ADQUIEREN EL COLOR DEL ÚNICO COLORANTE UTILIZADO

 Coloraciones Simples

COLORACIÓN Denota la morfología COLORACIÓN

POSITIVA: celular NEGATIVA:
Penetra y tiñe la No penetra la
muestra. muestra y no tiñe.
Ejemplos de Coloraciones Simples
Azul de Lactofenol o Azul
Algodón
• Es usado para colorear estructuras fúngicas
como, hifas, tubos germinativos, y esporas.
• Ayuda en el diagnóstico presuntivo de ciertos
hongos.
• Este colorante se compone de ácido láctico,
azul de anilina, glicerina, fenol y agua
desionizada.
• El azul de lactofenol aparte de teñir, actúa
como clarificante de la muestra .
Ejemplos de Coloraciones Simples
Nigrosina
(Tinción Negativa)

• Se trata de un colorante aniónico (no

penetra en el interior celular).
• Proporciona una visión de la forma y el
tamaño celulares.
• Se observa los microorganismos brillantes
sobre un fondo oscuro.
 Coloración Diferencial o
Compuesta
Manifiesta las características de afinidad por ciertos colorantes de microorganismos

Clasifica a los microorganismo en diferentes

Se emplea mas de un colorante.
grupos.
 Tinción Diferencial de Gram
Se basa en las características de la pared celular de
las bacterias

Desarrollada por Christian Gram -1884

Procedimiento de la Tinción Diferencial de Gram
Interpretación de los
resultados
 Tinción de Ziehl Neelsen
Descrita por dos médicos alemanes: Franz
Ziehl, un bacteriólogo y Friedrich Neelsen,
un patólogo
Esta técnica diferencia a las bacterias en dos
grupos:
• Resiste Decoloración con
alcohol – acido
• No resiste
Procedimiento
Procedimiento de
de la
la Tinción
Tinción De
De Ziehl
Ziehl Neelsen
Neelsen
Resultados de la Tinción de Ziehl Neelsen
Tinción Negativa
 Fundamentos
Actúa de forma
contraria al resto de
las técnicas de
coloración Queda sin teñir la
Permite destacar
la presencia de estructura que se
cápsula en desea ver: sólo
se tiñe el medio
algunos circundante.
microorganismos.
 Metodología de tinción:
2
Añadir al
portaobjetos una 3
1 gota de nigrosina
Mezclar con el asa
Tomar una pequeña o de tinta china.
muestra del de siembra estéril
microorganismo del y realizar una
medio de cultivo y extensión.
colocarlo en el centro
de un porta objetos
Procedimiento

5 4
Observar la Dejar secar la
preparación en extensión a
el microscopio temperatura
óptico ambiente.
Interpretac
ión de
Resultados
 Variante: Tinción con ácido
fosfotúngstico
1 Desarrollar un cultivo de E. coli K92 en un medio agar de triptona de soja a 37ºC durante 3 días.

2 Recoger las células del cultivo y suspenderlas lentamente en 500 μl de agua milliQ.

3 Añadir una gota de la suspensión bacteriana a la rejilla y dejar secar.

4 Añadir una gota de fosfotungstato potásico al 2% (p/v) ajustado a pH 6,8 y mantenerlo durante 1 minuto.

5 Eliminar cuidadosamente el exceso del colorante de la rejilla con ayuda de papel y dejar secar a temperatura ambiente.

6 Finalmente, observar las gradillas con las muestras en microscopio electrónico de transmisión.
Interpretación
Interpretación de
de
Resultados
Resultados
Coloraciones específicas para la
observación de estructuras bacterianas
Se utilizan para incrementar el contraste en las células microbianas y revelan estructuras
particulares, entre las que se incluyen en los flagelos y las cápsulas.
La
La tinción
tinción de
de esporas
esporas de
de Wirtz-Conklin
Wirtz-Conklin
Tiñe selectivamente las endosporas.
• Tinción con verde de malaquita.
• Calentamiento a emisión de vapores
durante 60 segundos, para que el
colorante penetre a través de las
paredes de la endospora.
• Se lava con agua durante 30 segundos
que elimina el colorante verde de todas
las partes de la célula, con excepción de
las esporas.
• Se tiñe con el colorante rosa safranina.
Las endosporas retienen el color verde;
el resto de la célula toma el color rosa.
 tinción de
La tinción de flagelos
flagelos de
de Leifsonc
Se emplea para ver los flagelos de las bacterias
u otros microorganismos.
• Se fija químicamente la suspensión
bacteriana, mediante formol, y se hace la
extensión en un portaobjetos.
• Se deja secar al aire, sin calentamiento
alguno.
• Se cubre la preparación con una mezcla de
ácido tánico y el colorante rosanilina, de
preparación extemporánea. El ácido tánico
(mordiente) engruesa los flagelos y la
rosanilina (colorante) los tiñe.
• Se retira el exceso de colorante con agua.
• Por último, se deja secar al aire, antes de su
observación al microscopio.
Otras Coloraciones Empleadas en Bacteriología, Virología, Micología y Parasitología

-Gram positivas Staphylococcus aureus

Tinción de Gram -Gram negativas
Escherichia coli

Tinción de Ziehl Bacterias alcohol-resistentes

Mycobacterium
Neelsen tuberculosis

Bacterias con gránulos de Corynebacterium

Tinción de Loeffler volutina xerosis

Bacteriología
Tinción flagelar de Bacilos Gram negativos no
fermentadores. Eikenella
Leifson

Tinción de Schaefer Bacterias poco

permeables Bacillus cereus
Fulton

Bacterias con cápsula Haemophilus

Tinción de tinta china influenzae tipo b
 Contrasta la muestra Fondo de la imagen color
evaporando un material oscuro y el virus con un
color claro
electrodenso

Tinción de
sombreado
Virología Tinción negativa de
ácido fosfotúngstico

Tinción negativa de
acetato de uracilo

Molde viral que

permite detallar la
estructura del virus
 Micología
Tinción de Azul de
Tinción con blanco
Tinción de Gram algodón de Tinción de Grocott Tinción de PAS
de calcoflúor
Lactofenol

El fenol destruye la Los hongos son

Candida spp. Se tiñe Se une a Pone de relieve las
flora acompañante. oxidados a
de azul como un polisacáridos como moléculas con alto
El ácido láctico aldehídos y reducen
microorganismo la cesbeta1-3 y porcentaje de
conserva las el complejo nitrato-
Gram positivo. beta1-4 carbohidratos
estructuras fúngicas plata metanamina

Cladosporium, Rhizopus sp, Neumocystis Carinii, Tiñe con mayor

Aspergillus Aspergillus sp Coccidioides intensidad el Mucor

Candida
Aspergillus Rhizopus Coccidioides Mucor
 Tinción Tricrómica
• Cystoisospora belli
• Blastocystis hominis

Tinción Tricrómica modificada

• Esporas de Microsporidia
• Entamoeba histolytica
• Cyclospora cayetanensis
Tinción con Hematoxilina férrica de
Parasitología Heidenhain
• Giardia lamblia
• Endolimax nana
Tinción de Kinyoun modificada
• Ooquistes de Cryptosporidium
• Cyclospora
• Isospora sp
Tinción de Ziehl-Neelsen modificada
• Género Cryptosporidium
• Ooquistes de C. cayetanensis
Gracias