Tinciones

TINCIÓN DE ALBERT
Fundamento

Los gránulos metacromáticos son comunes en

corinebacterias, espirilos y bacilos lácticos y su
presencia se utiliza en la identificación de esas
bacterias.

Estos aparecen de un color diferente del color original

del colorante, fenómeno que se conoce como
metacromasia Cuando se tiñen con el colorante de
Albert, que contiene verde malaquita, se observan de un
color café verdoso oscuro
MATERIALES, PROCEDIMIEN
REACTIVOS Y TO
1. Colocar en el portaobjetos una microgota de agua

EQUIPOS
2. Realizar una extensión con el material a estudiar y
homogeneizar con ayuda del asa bacteriológica

3. Fijar el frotis con calor pasando el portaobjetos de 3

a 4 veces por encima de la llama del mechero Bunsen

4. Cubrir el extendido con colorante de Albert durante

3 min

5. Lavar la preparación con agua

6. Cubrir con Lugol durante 1 min

7. Lavar con agua y dejar secar al aire

CORYNEBACTERIUM XEROSIS, TINCIÓN DE ALBERT, 100X.
 ANARANJADO DE ACRIDINA
MATERIALES Y EQUIPOS
Fundamento
Se utiliza para la detección de bacterias y hongos
en muestras clínicas Puede utilizarse un
microscopio con accesorios fluorescentes como el
de Reichert Zetopan.
El microscopio ordinario puede equiparse con
filtros para filtración fluorescente (BG12, de 4 mm
de espesor). Se colocan filtros amarillos de modo
de barreras filtrantes.
El pigmento se intercala en el ácido
nucleico (nativo y desnaturalizado).
 PROCEDIMIENTO
Se fijan las preparaciones en alcohol absoluto durante 1 min, posteriormente se sumergen en
ácido acético al 1% y se lavan con agua destilada.

Se tiñen con anaranjado de acridina durante 2 min.

Se elimina el exceso de colorante con amortiguador (buffer) de fosfatos durante 1 min.

Se diferencia en cloruro de calcio 0.1 M durante 1 a 2 min.

TINCION DE ANARANJADO DE
ACRIDININA Se deshidrata, aclara y monta en resina sintética no fluorescente.
 TINCIÓN AZUL DE METILENO

Fundamento

Esta tinción también se emplea para la

observación de los gránulos
metacromáticos en las bacterias

los gránulos se observarán de color

azul oscuro
MATERIALES, REACTIVOS Y
PROCEDIMIENTO
EQUIPOS 1._Colocar en el portaobjetos una microgota de agua
2._Realizar una extensión con el material a estudiar y
homogeneizar con ayuda del asa bacteriológica
3._Fijar el frotis con calor pasando el portaobjetos de 3
a 4 veces por encima de la llama del mechero Bunsen
5._Cubrir el frotis con colorante azul de metileno
durante 3 min
6._Lavar con agua y dejar secando al aire
7._Observar al microscopio con objetivos de 40X y 100X
Tinción de azul de metileno
Corynebacterium xerosis, tinción de azul de metileno, 100 X