Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
UNIVERSIDAD NACIONAL
AGRARIA LA MOLINA
INFORME N°3
OBSERVACIÓN DE BACTERIAS
Práctica 2
Tinción diferencial ácido resistente
LIMA-PERÚ
2018-II
INTRODUCCION:
OBJETIVOS:
MATERIALES Y METODOS
Técnica de Dörner
Para hacer el procedimiento, en un tubo pequeño con unas cuantas gotas de
agua destilada se hechó una muestra concentrada del organismo (Bacillus sp.)
con la ayuda de un asa de kolle esterilizada, seguidamente se añadió
carbolfucsina y luego se llevó a baño María por 10 minutos, luego del baño se
transfirió una gota de la muestra a una placa porta objetos seguidamente
agregando nigrosina, luego extendió con la ayuda de otra lamina hasta obtener
una delgada película y secándolo suavemente con la ayuda del mechero,
finalmenete se llevó la lámina para la observación en el microscopio con la ayuda
del aceite de inmersión.
Técnica de Schaeffer y Fulton
Para continuar con la segunda técnica se preparó una muestra fija del
microorganismo proporcionado con la ayuda del aza de kolle esterilizado, luego
se agregó carbolfucsina hasta cubrirla totalmente, continuando con la técnica
con ayuda de una pinza se calentó la lámina con el colorante haciéndolo pasar
ligeramente por la llama del mechero hasta que solo se pudo observar
desprendimiento de vapores evitando el secado del colorante, luego lavando la
lámina con alcohol ácido hasta que volverla incoloro y seguidamente se enjuagó
con agua, y seguidamente se cubrió con unas gotas de verde malaquita por un
par de minutos y luego se enjuagó con agua, secando la lámina al aire libre, y
finalmente llevando la lámina para la observación al microscopio.
RESULTADOS
OBSERVACION:
espora.
OBSERVACION:
Se distinguió las endosporas bacterianas del cuerpo vegetativo del bacillus sp.
Mediante dos técnicas, la primera la técnica de DORNER, en la cual se observó las
endosporas de un color brillante debido a que la nigrosina no pudo teñirla y la
técnica de SHAEFFER Y FULTON, en donde la endospora se encontraba teñida de
color verde debido a la adhesión térmica del verde malaquita y el cuerpo vegetativo
de color rosa, gracias a la safranina.
CUESTIONARIO
Tinción de Wirtz-Conklin
Algunos géneros bacterianos, entre los que destacan Clostridium y Bacillus, producen
en su interior formas de resistencia denominadas endosporas. Se producen cuando las
condiciones ambientales son desfavorables (agotamiento de los nutrientes,
temperaturas extremas, radiaciones, compuestos tóxicos, etc.) formándose una espora
por cada forma vegetativa. Al finalizar el proceso de esporogénesis, la célula vegetativa
se lisa y libera la espora al exterior. Cuando el ambiente es favorable, la espora germina
generando una nueva forma vegetativa. La capacidad de germinar perdura durante
años.
Las endosporas poseen unas cubiertas exclusivas que las hacen resistentes a los
factores ambientales adversos. Además, estas cubiertas hacen que las esporas
aparezcan en el microscopio óptico como estructuras refringentes y de difícil tinción. La
tinción específica de esporas requiere dos colorantes:
2.- Safranina: colorante de contraste que tiñe las formas vegetativas. Las endosporas,
tras la primera tinción, no perderán el colorante en el lavado con agua, y sí lo harán las
formas vegetativas, que quedarán teñidas con el segundo colorante.
Tinción de Möeller
El calor después de la tinción con carbol-fuscina con permite que rompa la estructura
que protege la espora para que así pueda penetrar el colorante.
Con el lavado de agua se retira todo tinte que se adhirió a la bacteria, para después
teñirse con azul de metileno.
Bibliografía
Martín., C. V. (2010). Técnicas básicas de Microbiología. Reduca (Biología)., 24.