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PROFESIONAL DE LICENCIADO EN
TECNOLOGIA MÉDICA EN LA
ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLINICO
TÍTULO:
ALUMNO (S):
PEDRO MIGUEL GALINDO SOTELO
ANA CLAUDIA BUITRON SANDOVAL
DANIEL ROBERTO VERGARA BELLEZA
ASESOR(ES):
JÓSE LUIS ROJAS VILCA
JUAN AGAPITO PANTA
2019
JURADOS.
1. Introducción 1
2. Materiales y métodos 4
2.1 Recuento de Aerobios Mesófilos 6
2.2 Recuento de Levaduras 7
2.3 Recuento de Staphylococcus aureus 7
2.4 Identificación de Salmonella sp. 9
3. Resultados 10
4. Discusión 13
5. Conclusiones 16
6. Referencias bibliográficas 17
RESUMEN:
transmitidas por alimentos (ETA), como todos los síntomas originados por el
los años 2010 al 2012 se han reportado un promedio de 35 brotes de ETA por año,
Martin de Porres durante los meses de enero a marzo del 2017. Materiales y
Métodos: El diseño del estudio fue descriptivo transversal, los puestos de venta
fueron obtenidos registrando todos los cruces de avenidas del distrito de San
SUMMARY:
sufficient quantities that affect the health of the person or the community in an
system is included in the Peruvian health system. Between 2010 and 2012 an
average of 35 ETA outbreaks per year have been reported, of which 47% were
clinically related to cases of Salmonellosis, the foods most implicated were those
of mayonnaise sauce in food stalls in public roads in the district of San Martín de
Porres during the months of January to March 2017. Materials and methods:
The design of the study was cross-sectional descriptive. after the names of the
intersections of the avenues of the district of SMP the posts of each crossing are
selected, microbiological methods are used in the plate for the amount of CFU per
gram of total mesophilic aerobes, yeasts, Staphylococcus aureus and the presence
of Salmonella sp. Results: The final size was 120 samples, only 17.5% of the
mayonnaise samples of the traveling food were suitable for human consumption
Low microbiological quality of mayonnaise was found in food stalls in the district
of San Martin de Porres, with the category of total mesophilic aerobes being the
microbiology, quality.
1. INTRODUCCIÓN.
Actualmente en los países en vías de desarrollo más del 50% de los trabajadores
ambulatoria de alimentos tiene gran demanda en las zonas urbanas y rurales, por
ser más accesible a las personas de bajos recursos, siendo una actividad común en
riesgos para la salud, que podrían producir las enfermedades transmitidas por
años de edad y se conoce que el 70 % de las diarreas se originan por las ETAs. (6)
Latina y el Caribe, desde 1993 hasta el 2002, se estimó un total de 5956 brotes de
1
ETA, con 216 782 personas afectadas. Según el Sistema Regional de Información
2003 y 2012 ocurrieron 6332 brotes de ETA en los países de América Latina y el
Caribe que afectaron 230,141 personas. (8) (9) Según los estudios realizados por
(10) (11)
años 2010 al 2012 se han reportado un promedio de 35 brotes de ETA por año,
cumplir para poder ser aptos para el consumo humano y define como calidad
2
humano, basado en la ausencia o en la cantidad de microorganismos presentes,
3
2. MATERIALES Y MÉTODOS.
de DIGESA.
Población.
Constituida por los puestos de venta de comida ambulatoria del distrito de San
Martín de Porres, durante los meses de enero a marzo del año 2017, estación en la
Criterio de inclusión.
Criterio de exclusión.
seleccionados por ser lugares con mucha afluencia de personas, generalmente con
4
seleccionó de manera aleatoria simple dos puestos de venta de comida
ambulatoria que cumplieran con los criterios de selección (se eligieron dos
puestos como máximo por cruce para evitar que una cantidad considerable de
existieron cruces en los que solo un puesto de venta cumplió con los criterios
Muestra.
muestras obtenidas se colectaron por separado en bolsas ziploc estériles con cierre
mantuvo 1° a 4° °C, con los cual se aseguró la vida útil de la muestra hasta su
Análisis Microbiológico.
cantidad de UFC por gramo de aerobios mesófilos totales (16), levaduras (17),
5
DIGESA indica que para el caso de la vigilancia sanitaria de alimentos de manera
expendio, se toma por lo menos una muestra y deberá ser calificada con los
límites más exigentes. Para ser considerado apto según los parámetros de
exceder las 104 UFC por gramo de muestra tomada, levaduras no debe exceder las
por gramo y para el caso de Salmonella sp. no debe existir la presencia de este
Preparación de la muestra
Todas las placas fueron incubadas por 48 horas a una temperatura de 35°C. Se
6
consideraron a los cultivos positivos cuando se observó un crecimiento bacteriano
en el agar, las seleccionadas para realizar el conteo fueron las que presentaron de
y 10-4, utilizando una pipeta estéril, a cada placa con inóculo, se vertió de 15 a 20
con seis movimientos de derecha a izquierda, seis de atrás hacia adelante, sobre
una superficie lisa, permitiendo que la mezcla en las cajas Petri solidifique, se les
dejó reposar sobre una superficie horizontal fría. Las placas fueron incubadas a
Consideramos las cuentas de placas con 10 a 150 colonias como las adecuadas,
(FIGURA 3)
De la muestra preparada se sembró 0.1 mL de las diluciones 10-1, 10-2, 10-3 y 10-4
en placas petri con agar Baird Parker y se extendió el volumen inoculado con un
7
incubadas a 35º ± 1º C de 45 horas a 48 horas. De las placas que contenían
salina estéril). Las muestras fueron incubadas entre 35ºC a 37ºC y fueron
adicionó HCl 1.0N como indicador, la prueba resultó positiva cuando se observó
una zona clara alrededor del orificio con la suspensión bacteriana sospechosa.
8
2.4 Identificación de Salmonella sp.
24h. Luego de las 18h a 24h, se agregó 1mL de muestra pre enriquecida a un tubo
siembra. Las placas fueron incubadas de manera invertida, por 24 horas a 37°C.
estudio fue anónimo, no se tomó ningún dato para identificar a los manipuladores
9
3. RESULTADOS.
Muestras.
que cumpliera con los criterios de selección y en 5 cruces solo había un puesto en
cada uno, con lo cual el número de puestos de comida de los cuales se recolectó
(Anexo 3)
Aerobios Mesófilos.
10
Levaduras.
Staphylococcus aureus.
total de 23.3% (28/120) de muestras, que son no aptas para el consumo humano.
(Anexo 5)
en una misma muestra que excedían el rango permitido por DIGESA, resultando
en un total de 7.5% (9/120) muestras, que son no aptas para el consumo humano.
(Anexo5)
11
total de 7.5% (9/120), que son muestras no aptas para el consumo humano.
(Anexo 5)
aureus presentes en una misma muestra que excedían el rango permitido por
12
4. DISCUSIÓN.
condiciones similares.
de venta de comida en la vía pública del distrito de San Martin de Porres, entre
con más frecuencia los parámetros establecidos por DIGESA, fue del 60.8%, muy
superan el límite permitido por lo cual son no aptas para el consumo, este
13
Universidad Nacional de Colombia, este microorganismo contaminante al igual
resultados fueron del 34.2%, valor cercano al 45.5% reportados por el estudio de
Simoni en el que evaluó rocoto molido de la feria del mercado “Héroes del
comida. (22)
mayonesa encontrada en nuestro estudio, concuerda con otros reportes sobre venta
que analizó muestras de rocoto molido y encontró solo el 25% de muestras aptas
riesgo potencial para la salud pública, por la gran cantidad de muestras no aptas
14
En este estudio no se encontró la presencia de Salmonella sp, microorganismo de
alta patogenicidad, resultados que difieren del estudio realizado por Bayona, en el
15
5. CONCLUSIONES.
nivel permitido, por aerobios mesófilos totales, con un 60%. Esto fue seguido de
16
6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
edición; 2002.
1996.
mercados y basurales de lima y callao. Rev. Perú Med Exp Salud Pública.
17
6. Mead PS, Slutsker L, Dietz V, et al. Food-related illness and death in the
Perú; 2002.
12. Ministerio De Salud, Instituto Nacional de Salud, Bol - Inst Nac Salud
18
13. Gallegos M, López I. Implantación de un Sistema de APPCC en la
Mexicana. 1995.
19
19. Wallace H, Jacobson A, Hammack T. Bacteriological Analitycal, Manual
directo, en la feria del mercado Héroes del Cenepa del distrito Gregorio
UNJBG; 2014.
Bienestar; 2008.
20
25. Chiluisa V, Echevarria A. Identificación y cuantificación de salmonella
ciudad de Bogotá D.C. Rev. NOVA. Bogotá 2015; Vol 13, pag. 81 - 92.
27. Bereda, Tesfaye Wolde et al. Seguridad microbiana de los alimentos que
21
ANEXOS Y FIGURAS
Anexo 1: Variables
Bacterias capaces de
desarrollarse desde los 30º C
hasta los 45°C, se estima la
micro flora total sin
especificar tipos de
microorganismos. Refleja la
calidad sanitaria de un
Excede el rango:
alimento, las condiciones de
Siembra en 1
Aerobios manipulación, las condiciones Cualitativa
agar y pruebas
Mesófilos higiénicas de la materia nominal
bioquímicas No excede el
prima. Se calificará como
rango: 0
positiva la muestra y por lo
tanto no apto para el consumo
si es que excede el límite
permitido según el parámetro
otorgado por DIGESA de 5 x
104 UFC por gramo.
Se denomina levadura a
cualquiera de los diversos
hongos microscópicos
unicelulares que son capaces
de realizar descomposición
Excede el rango:
por fermentación. Se
Siembra en 1
calificará como positiva la Cualitativa
Levaduras agar y pruebas
muestra y por lo tanto no apto nominal
bioquímicas No excede el
para el consumo, si es que
rango: 0
excede el límite permitido
según el parámetro otorgado
por DIGESA de 100 UFC por
gramo.
Bacteria anaerobia
facultativa, Gram positiva,
productora de coagulasa,
catalasa, inmóvil y no
esporulada. Se calificará Excede el rango:
como positiva la muestra y Siembra en 1
Staphylococcus Cualitativa
por lo tanto no apto para el agar y pruebas
aureus nominal
consumo, si es que excede el bioquímicas No excede el
límite permitido según el rango: 0
parámetro otorgado por
DIGESA de 100 UFC por
gramo.
Clasificación N° de muestras %
Apto 21 17.5%
No Apto 99 82.5%
Levaduras 63 52.5%
Salmonella sp. 0 0%
* Límite máximo para muestreo aleatorio permitido por DIGESA: Aerobios Mesófilos
104 UFC/g, para Levaduras 10UFC/g y para Staphylococcus aureus 10UFC/g
Levaduras 10 7.5%
Staphylococcus aureus 7 5%
Aerobios Mesófilos y
28 23.3%
Levaduras
Aerobios Mesófilos y
9 7.5%
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus y
9 7.5
Levaduras
Aerobios Mesófilos,
Levaduras y Staphylococcus 16 13.3%
aureus
Figura B
Figura A
A
B
Figura C
FIGURA 3: Agar Papa Dextrosa con presencia
FIGURA 2: Agar CASO con crecimiento de
de levaduras luego de 5 días de incubación a
aerobios mesófilos totales luego de 48 horas
temperatura ambiente.
de incubación.
FIGURA 4: Agar Baird Parker con presencia de FIGURA 5: Control positivo en Agar Baird
colonias negras con halos transparentes, colonias Parker, colonias brillantes color gris oscuro a
presuntivas de Staphylococcus aureus. negro; halos transparentes alrededor de las
colonias presuntivas de Staphylococcus aureus.
FIGURA 5: Agar XLD con colonias amarillas FIGURA 6: Agar XLD con colonias rojas con
blanquecinas sin las características necesarias centros negros, presuntivas de Salmonella.
para ser presuntivo de Salmonella sp
FIGURA 7: Control positivo en Agar Sulfito de FIGURA 8: Control positivo en Agar Hektoen
Bismuto, colonias negras con oscurecimiento del Entérico, con colonias azul verdosas oscuras.
medio.