UNIVERSIDAD NACIONAL

DEL SANTA
FACULTAD DE INGENIERA
E.A.P:
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

CURSO:
MICROBIOLOGA GENERAL

ESTUDIANTE:
CRISTHIAN CORTEZ CRUZ

DOCENTE:
ETERIO ALVA MUOZ

GRUPO:
B

NVO CHIMBOTE, Enero de 2014

PRACTICA 07

RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS

MESOFILAS VIABLES
OBJETIVOS GENERALES

Determinar la presencia y cantidad de bacterias

aerobias mesofilas en el material analizado.

Realizar un recuento de bacterias mesofilas viables

en los alimentos como un indicador microbiano de
la calidad del alimento.

INTRODUCCIN
Las bacterias aerobias mesofilas constituyen un grupo de
microorganismos capaces de crecer en un rango de
temperatura de 30 a 37C.
La cuantificacin de microorganismos por contaje de colonias,
ha sido ampliamente utilizada para determinar poblaciones
microbianas viables en los alimentos.
Este procedimiento est basado en la presuncin de que cada
celula microbiana en una muestra se formara a simple vista,
con colonias separadas cuando son mezcladas con el agar u
otro medio solido que permita su crecimiento.
APLICACIN
Este mtodo puede ser utilizado para cualquier tipo de
muestra, con excepcin de ciertos productos, donde
interviene el proceso de fermentacin, tales como ciertos
quesos y embutidos, yogurt o de maduracin natural, ya que
estos dan cifras muy elevadas de bacterias. Tambin se
puede utilizar para medio ambiente, utensilios, etc.
A continuacin presentare un informe acerca del
procedimiento que se llev a cabo en el laboratorio
para el recuento de bacterias mesofilas en una
muestra de jugo casero.

MARCO TERICO
PRINCIPIOS Y FUNDAMENTOS DEL METODO:
El mtodo de contaje de colonias provee una estimacin del
nmero de microorganismos viables en una muestra de
acuerdo al medio empleado y el tiempo y la temperatura de
incubacin.
Las clulas microbianas a menudo se encuentran como
conjuntos o grupos de clulas, por cuanto, la muestra y las
diluciones homogenizadas pueden uniformemente distribuir
los conjuntos de bacterias, ya que estos grupos no pueden ser
disgregados completamente por ellos mismos.
El mezclado y la dilucin inicial es un blender mecanico
pueden proveer mayor rotura a estos grupos. De todos
modos, esto no asegura que los microorganismos puedan
estar bien distribuidos como clulas libres.
Consecuentemente, cada colonia que aparece en el agar TSA
puede aparecer como grupo de clulas libres y deben ser
referidas como Unidades Formadoras de Colonias (UFC)

MATERIAL Y MTODOS
MATERIALES
A. Material biolgico:

Muestra de jugo

B. Medio de cultivo:
Agar TSA (soya tripticasa)
C. Material de vidrio:

Balon de fondo plano

Tubos de ensayo
Pipetas
Placas petri

D. Reactivos:

 Agua peptonada

PROCEDIMIENTO:
1.Medimos10 ml de la muestra de jugo en una bureta.
2.Transvasamos la muestra a un baln de fondo plano, que
contiene 90 ml de agua peptonada y homogenizamos.
3.Realizamos
las
diluciones
decimales
correspondientes
de acuerdo al grado de contaminacin bacteriana que se
presume tiene el alimento.
4. Pipeteamos 1 ml de cada dilucin.
5. Licuamos el medio de cultivo contenido en el baln.
6. Vaciamos en cada placa Petri.
7. Depositamos una muestra de cada dilucin en el centro
de cada placa y mezclamos.
8. Incubamos por 24h a 37C.

RESULTADOS
Luego de incubar las placas a 37/24h se obtuvieron los
sgtes resultados:

MUESTRA
N

COLONIAS
CONTADAS
(DILUCION)

JUGO

1:10

1:100

1:1000

50

25

10

COLONIAS EXPRESION
CONTADA
DE
S
RESULTADO
S
(UFC/g o
ml.)

10 000

CLCULOS Y EXPRESIN DE RESULTADOS

Reportar como se indica a continuacin, con dos cifras
significativas y
Potencias de 10:

Bacterias mesoflicas aerobias en placa en agar TSA

incubadas por __24h__ h. a ___37__ C: ___10 000____ UFC / g
( / mL) de muestra.

Si se analiz un alimento para el cual existe norma y existe

especificacin sobre el grupo estudiado, incluir en el reporte
si el alimento cumple o no con la norma.

DISCUSIONES
Segn Consultora Analiza Calidad, la mayora de los
alimentos industrializados (excepto, por ejemplo, los
productos fermentados) deben ser considerados como
inadecuados para el consumo cuando contienen un gran
nmero
de
microorganismos,
aun
cuando
estos
microorganismos no sean conocidos como patgenos y no
hayan alterado de forma apreciable los caracteres
organolpticos del alimento. Pueden, darse varias razones
que justifican esta conducta.
1.Recuentos altos en alimentos estables a menudo indican
materias primas contaminadas o tratamientos no
satisfactorios desde el punto de vista sanitario, mientras
que en los productos perecederos pueden indicar tambin
condiciones inadecuadas de tiempo/temperatura durante
su almacenamiento.
2.Algunas cepas de bacterias mesfilas comunes, no
generalmente
consideradas
como
agentes
de
enfermedades transmitidas por los alimentos (por
ejemplo, Proteus sp., enterococos y pseudomonas
mesfilas) han sido sealadas como causa de enfermedad
cuando exista un nmero elevado de clulas viables en
los alimentos. Sin embargo, los datos con que se cuenta
acerca de la patogenicidad de estas cepas son
conflictivos. Cuando la alteracin de los alimentos es
debida al desarrollo en ellos de microorganismos, la causa
ms frecuente de alteracin, deben esperarse en los
mismos recuentos elevados. Los niveles de poblacin
precisos para producir modificaciones organolpticas

ostensibles varan ampliamente segn el tipo de alimento

y, de modo particular, la clase de microorganismo.
3.En el momento en que la descomposicin puede ser
detectada por el olor, el gusto o el aspecto, la mayora de
los alimentos contienen ms de 106 microorganismos por
gramo (revisado por Elliott y Michener, 1961).

4.Algunos alimentos pueden ya ser inaceptables cuando

contienen 107 bacterias por gramo, pero un nmero
reducido de ellos se consumen aun cuando la poblacin
bacteriana alcance los 108/gramo. Los productos
fermentados, tales como el queso, alcanzan normalmente
poblaciones microbianas del orden de 109/gramo,
mientras que este nivel de microorganismos se
correlaciona con una alteracin muy avanzada en otros
alimentos no fermentados

CONCLUSIONES

En esta prctica se pudo realizar un recuento de

bacterias mesofilas viables en una muestra de jugo

Se encontraron Bacterias mesoflicas aerobias en placa

en agar TSA incubadas por __24h__ h. a ___37__ C:
___10 000____ UFC / g ( / mL) de muestra.

Concluida la prctica se pudo determinar la presencia y

cantidad de bacterias aerobias mesofilas en el material
analizado.

ANEXOS
CUADRO 1.

Condiciones de incubacin para cuenta en placa de diferentes

grupos
Grupo Bacteriano
Termoflicos
Mesoflicos
Psicrotrficos
Psicroflicos

Temperatura
55 2C
35 2C
20 2C
5 2C

Tiempo de Incubacin
48 2 h
48 2 h
de 3 a 5 das
de 7 a 10 das

Despus de la incubacin, contar todas las colonias

desarrolladas en las placas seleccionadas (excepto las de
mohos y levaduras; si se sospecha que es una colonia de
este grupo de microorganismos, se recomienda confirmar
por microscopa), incluyendo las colonias puntiformes. Si
hay desarrollo extendido o un nmero de colonias superior
al del rango de sensibilidad del mtodo, aplicar las reglas
indicadas en RESULTADOS. Realizar microscopa para
resolver los casos en los que no se puedan distinguir las
colonias de las partculas pequeas de alimento. Utilizar el
registrador para contar las colonias.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Secretara de Salud. NOM-109-SSA1-1994. Bienes y
Servicios. Procedimiento para la Toma, Manejo y
Transporte de Muestras de Alimentos para su Anlisis
Microbiolgico. Norma Oficial Mexicana. Mxico.
Secretara de Salud. NOM-110-SSA1-1994. Bienes y
Servicios. Preparacin y Dilucin de Muestras de
Alimentos para su Anlisis Microbiolgico. Norma
Oficial Mexicana. Mxico.
Secretara de Salud. NOM-092-SSA1-1994. Bienes y
Servicios. Mtodo para la cuenta de Bacterias Aerobias
en Placa. Norma Oficial Mexicana. Mxico.

 Food and Drug Administration (2003) Bacteriological

Analytical Manual. 9thed. Arlington, VA: AOAC.
Swanson K.M., Petran R.L., Hanlin J.H. (2001) Culture

Methods for Enumeration of Microorganisms. In:

Compendium of Methods for the Microbiological
Examination of Foods. 4th ed. Downs F.P. & Ito K. (Eds.)
APHA. Washington. 53-67.

International Commission on Microbial Specifications of

Foods (2005) Microorganisms in Foods 6 Chapman &
Hall 2nd ed.