Facultad De Ciencias Agrarias y Ambientales

Medicina Veterinaria.

INFORMES DE LABORATORIO
BIOQUÍMICA

ESTUDIANTES GRUPO No 1
Luisa Fernanda Mora Cubillos
Kenneth Leonardo Rodríguez Cruz
Laura Yohana Gaviria Pineda
Leidy Alejandra Izaquita Bravo

FUNDACION UNVERSITARIA JUAN DE CASTELLANOS

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y AMBIENTALES
TUNJA- BOYACA
2020.
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Medicina Veterinaria.

Extracción y determinación cualitativa de proteínas

Luisa Fernanda Mora Cubillos

Kenneth Leonardo Rodríguez Cruz
Laura Yohana Gaviria Pineda
Leidy Alejandra Izaquita Bravo

Martha Isabel Martínez Martínez

 profesional en Química de Alimentos

Magíster en Gerencia de Programas Sanitarios en Inocuidad de Alimentos

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y AMBIENTALES

TUNJA- BOYACA
2020
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Medicina Veterinaria.

OBJETIVOS
Objetivo general:

Identificar cualitativamente las proteínas, su estructura forma y presencia en los

diferentes alimentos en relación con su valor nutricional.

Objetivos específicos:

● · Observar el comportamiento de las proteínas en los diferentes

alimentos.
● · Distinguir las estructuras y comportamientos de las proteínas al añadir
otro compuesto.
● · Analizar y comparar los resultados de las diferentes pruebas
relacionadas.
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JUSTIFICACIÓN
Las proteínas son biomoléculas formadas por carbono, hidrógeno, oxígeno, y
nitrógeno pueden además contener azufre, fósforo, hierro, magnesio y cobre. Son
polímeros de aminoácidos que están unidos entre sí mediante enlaces peptídicos.
El orden y la disposición de los aminoácidos dependen del código genético de
cada animal. Todas las proteínas están compuestas por: carbono, hidrógeno,
oxígeno, nitrógeno y la mayoría contiene además azufre y fósforo.

Las proteínas suponen aproximadamente la mitad del peso de los tejidos del
organismo, y están presentes en todas las células del cuerpo, además de
participar en prácticamente todos los procesos biológicos que se producen.

Las funciones de las proteínas entre todas las biomoléculas, las proteínas
desempeñan un papel fundamental en el organismo. Son esenciales para el
crecimiento, gracias al contenido de nitrógeno, que no está presente en otras
moléculas como grasas o hidratos de carbono. También lo son para las síntesis y
mantenimiento de diversos tejidos o componentes del cuerpo, como los jugos
gástricos, la hemoglobina, las vitaminas, las hormonas y las enzimas estás actúan
como catalizadores biológicos haciendo que aumente la velocidad a la que se
producen las reacciones químicas del metabolismo. Asimismo, ayudan a
transportar determinados gases a través de la sangre, como el oxígeno y el
dióxido de carbono y funcionan a modo de amortiguadores para mantener el
equilibrio ácido- base y la presión oncótica del plasma.

Las dos propiedades principales de las proteínas, son que permiten su existencia
y el correcto desempeño de sus funciones son la estabilidad y la solubilidad. La
primera hace referencia a que las proteínas deben ser estables en el medio en el
estén almacenadas o en el que desarrollan su función, de manera que su vida
media sea lo más larga posible y no genere contratiempos en el organismo. En
cuanto a la solubilidad, se refiere a que cada proteína tiene una temperatura y un
PH que se deben mantener para que los enlaces sean estables.

La importancia de las proteínas es que constituyen la fracción más importante de

la ración. Son componentes fundamentales en los tejidos animales y requeridas
para el mantenimiento de las funciones vitales como renovación de tejidos,
reproducción, crecimiento y lactación.
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MARCO TEÓRICO

Las proteínas son macromoléculas complejas física y funcionalmente con múltiples

funciones clave. La función de una proteína depende de su estructura o conformación
tridimensional. Están formados por cadenas lineales de aminoácidos, conectados por
enlaces peptídicos, sin un orden obvio. Los aminoácidos son compuestos orgánicos que
contienen grupos amino y carboxilo, por lo que son ácidos y básicos.

Todos los organismos utilizan los mismos 20 aminoácidos como componentes básicos de
las moléculas de proteínas. Estos 20 aminoácidos se denominan aminoácidos ordinarios,
estándar u ordinarios. Aunque el número de aminoácidos es pequeño, se puede obtener una
variedad de polipéptidos diferentes conectando 20 aminoácidos comunes para formar
diferentes combinaciones. Entre los 20 aminoácidos comunes, los grupos amino y carboxilo
están conectados al mismo átomo de carbono: a es un átomo de carbono. Por lo tanto, todos
los aminoácidos estándar contenidos en las proteínas son α-aminoácidos.

La extracción de proteínas es un proceso con múltiples etapas, cuyo propósito es lograr

diferentes concentraciones de la proteína o péptida diana. Los factores a considerar en cada
etapa de fraccionamiento son solubilidad, pH, grado de oxidación, presencia de metales
pesados, polaridad y fuerza iónica de la solución, presencia de proteasas, temperatura y
actividad de moléculas. (Paxton (Paxton) 1991)

En cuanto a la precipitación de proteínas con sulfato de amonio, las proteínas son solubles
por su interacción con el agua, cuando se agrega sulfato de amonio se combinan con agua
para formar enlaces de hidrógeno, la proteína se deshidrata y las interacciones hidrofóbicas
entre moléculas biológicas forman un precipitado. La proteína menos soluble de la solución
se une a la sal (sulfato de amonio) presente. (Allen, 2004.)7
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El objetivo principal es eliminar muchos residuos, que pueden ser ácidos nucleicos, toxinas
y otros compuestos. Existen varias estrategias para la precipitación de proteínas, como
cambiar el pH, aumentar la temperatura, agregar solventes, moléculas cargadas, etc., pero el
método más común es la precipitación con sal con (NH4) 2SO4. (Allen, 2004).

La solubilidad de la proteína es sensible a la concentración de sal; la concentración de sal se

expresa en términos de fuerza iónica. La solubilidad de las proteínas a baja fuerza iónica
generalmente aumenta al aumentar la concentración de sal. La salazón es un fenómeno en
el que la concentración de sal aumenta la solubilidad de las proteínas. Bajo una alta fuerza
iónica, la solubilidad de la proteína disminuye, este fenómeno se llama salificación. Este
fenómeno se debe básicamente a la competencia por las moléculas de agua en la capa de
solvatación (Larrahondo 2001).

La mayoría de las proteínas tienen una capa de agua (capa de disolvente) adherida y cerca
de su superficie. Al aumentar la concentración de iones salinos, se reduce la capa de
solvatación. Las interacciones hidrofóbicas entre residuos no polares de proteínas ocurren
debido al plegamiento o asociación entre proteínas, lo que lleva a su precipitación. Debido
al uso generalizado de este método (que también es económico), se han diseñado tablas y
fórmulas en las que es posible determinar la cantidad de (NH4) 2SO4 a añadir a la mezcla
de proteínas para obtener una determinada concentración de sólido o solución. (Allen,
2004).

Después de la precipitación, la proteína se resuspende en el solvente y las trazas de

precipitante se eliminan por diferentes métodos como diálisis, ultrafiltración o mediante
una columna de exclusión molecular. (Allen, 2004.)

El contenido cuantitativo de proteína de proteína depende de la naturaleza de la molécula y

puede determinarse mediante el "método de Bradford", que se basa en la unión del
colorante azul acompañante G250 a los residuos de aminoácidos de arginina y lisina de la
proteína. (Walker 2002). Esto generalmente se hace para medir la absorbancia de la
solución en el espectrofotómetro.

En los laboratorios químicos, a menudo se utilizan mezclas complejas de diferentes

compuestos. Casi cada vez que se lleva a cabo una reacción para la preparación de un
compuesto dado, es necesario separar el producto de la mezcla de reacción, que puede
formar subproductos, sales u otras impurezas en la reacción. Por tanto, en el laboratorio
químico, la separación y purificación del producto deseado es tan importante como
optimizar su síntesis. Además de mejorar las condiciones de reacción para la formación del
producto deseado en alto rendimiento, también es necesario considerar la separación
efectiva del proceso para maximizar la separación de la mezcla de reacción. En la
recuperación del producto. La extracción es una de las técnicas más útiles.
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REFERENCIAS

ALLEN T, MARK W. 2004. Desalting, Concentration, and Buffer Exchange by dialysis

and ultrafiltration. Current protocols in protein science 4.4.1-4.4.15. John Wiley & Sons
Inc, New York,USA.

PAXTON J 1991. Assays for Antifungal Activity. In: Methods in Plant Biochemistry. Vol.
6. Assays for Bioactivity. Hostettmann, K. (Ed). Academic Press. London, England. pp. 33-
46.

LARRAHONDO A, JESUS. E. 2001. Evaluaciones químicas preliminares de productos

naturales. Catorse SCS
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PROCEDIMIENTO
Se realizará como inicio una entrada al laboratorio donde se deberá disponer de la bata antes de
hacer la entrada al mismo. luego a lado derecho de la puerta se encuentran los casilleros donde se
ubicaran los elementos personales como son las mochilas u/o otros objetos después el grupo se
Ubicará en una estación para la revisión de materiales el cual será entregado por un trabajador de
la Universidad al finalizar la revisión se comenzará a realizar cada actividad propuesta.

Citas

http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/extraccio_fona.html#:~:text=La%20extracci
%C3%B3n%20con%20disolventes%20es,utilizada%20en%20el%20laboratorio%20qu%C3%ADmico.

https://quimicafacil.net/manual-de-laboratorio/analisis-cualitativo-de-proteinas/#:~:text=El%20an
%C3%A1lisis%20cualitativo%20de%20prote%C3%ADnas,de%20uno%20o%20m%C3%A1s
%20amino%C3%A1cidos.