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Laboratorio de análisis instrumental I - Marzo de 2020.

Universidad Tecnológica de Pereira

Polarimetría (primera y segunda sesión)


Polarimetry (first and second sesion)

Autor 1: Rodas Villada Maria Paula; Autor 2: Carvajal Navia María Paula
Escuela de química, Universidad Tecnológica de Pereira, Pereira, Colombia
Correo-e: paula.rodas@utp.edu.co ; maria.carvajal@utp.edu.co

Resumen—Se empleó el polarímetro Carlzeiss Jena para la atravesadas por una luz polarizada plana giran el plano de
medición del ángulo de giro de sustancias ópticamente activas, polarización hacia la izquierda (según un observador que
con el fin de conocer sus concentraciones, también se realizó la reciba la luz frontalmente). [3] Las sustancias quirales poseen
inversión de la sacarosa para obtener su constante de moléculas que pueden adquirir diferentes estados espaciales.
velocidad.
La actividad óptica es una propiedad única de las sustancias
Se realizó la calibración del equipo, los cálculos matemáticos
quirales, como por ejemplo el 2-butanol, que existe como
necesarios para la preparación de los patrones que se
utilizaron en el tanto en la sesión 1 como en la sesión 2. dos isómeros espaciales, imágenes espejadas uno del otro.
Con los datos obtenidos se realizaron curvas de Se conocen como enantiómeros. La explicación más
calibración, con el objetivo de hallar la ecuación para conocida de los enantiómeros es la comparación entre
posteriormente usarla en la determinación de las nuestra mano derecha e izquierda, que no pueden
concentraciones. superponerse en el espacio, y sólo son idénticas al espejo (el
reflejo de una coincide con la otra) [4]
El método polarimétrico es una forma simple y precisa para
Palabras clave— Ángulo de giro, calibración, curva de la determinación e investigación de estructuras en macro-
calibración, sustancia ópticamente activa, polarimetría. semimicro y microanálisis de compuestos cuyo coste
económico o cuya dificultad para duplicarlos es alta. La
Abstract— The Carlzeiss Jena polarimeter was used for the Polarimetría se usa en control de calidad, control de
measurement of the angle of rotation of optically active procesos e investigación en la industria farmacéutica,
substances, in order to know its concentrations, it also made química, aceites esenciales, alimentación y aromas. [5]
the inversion of sucrose to obtain its speed constant.
Calibration of the equipment was performed, the mathematical
calculations necessary for the preparation of patterns that were RESULTADOS Y DISCUSIÓN
used in both session 1 and session 2.
With the data obtained, calibration curves were carried out, to Sesión 1
find the equation for later use in the determination of
concentrations. En la primera sesión se realizó la calibración del
instrumento con agua, la cual al ser una sustancia que no es
Key Word —Angel of rotation, calibration, calibration curve, ópticamente activa se conoce que el ángulo de giro es igual
optically active substance, polarimetry. a cero, lo cual se comprobó experimentalmente; esto se hizo
con el fin de realizar la medición del ángulo de giro de una
INTRODUCCIÓN sustancia problema (P1), con el objetivo de conocer a que
sustancia corresponde y observar como es el
La polarimetría es un método de análisis químico que nos comportamiento de una sustancia frente al cambio de
permite medir el cambio que sufre el plano de luz polarizada temperatura. También se realizaron diferentes patrones de
cuando atraviesa un medio transparente formado por otras dos soluciones de nombre y concentración conocida,
sustancias ópticamente activas; [1] una sustancia es determinando para cada uno su ángulo de giro, para
considerada ópticamente activa si la luz linealmente posteriormente con los cálculos matemáticos requeridos
polarizada sufre una rotación cuando pasa a través de una obtener una curva de calibración, con el fin de determinar la
muestra de dicha sustancia. [2] Existen sustancias que al ser concentración de las soluciones problemas P2 y P3.
atravesadas por la luz polarizada plana producen un giro del
plano de vibración de la luz. Se dice que estas sustancias  Ángulo de giro y rotación específica de la sustancia
presentan actividad óptica; se le llaman sustancias problema P1.
dextrógiras las que al ser atravesadas por una luz polarizada
plana giran el plano de polarización hacia la derecha (según β=9,15 a 25 °C
un observador que reciba la luz frontalmente), por el otro
lado, son llamadas sustancias levógiras las que al ser β=αLC
Fecha de Recepción: Jueves 28 de marzo de 2019
Fecha de Aceptación: Dejar en blanco
2

Ecuación 1. Ley de Biot de ellas es la fructuosa(α=-93), y la otra el ácido


L=2 dm tartárico(α=+13,4) trata del ácido tartárico, con una
C=5g/100ml gran variación en su rotación. También se observo
que para que al aumentar la temperatura el ángulo
Tabla 1. Comportamiento de P1 frente al cambio de giro aumentaba.
de temperatura.
 Determinación de la concentración de la sustancia
Temperatura Ángulo de giro (β) Rotación problema (P2). Se trata de una sustancia dextrógira.
(°C) específica (α)
Tabla 2. Curva de calibración para la sustancia
P2 conocida.
25 9,15 91,5
40 17,65 176,5 Patrón Concentración Ángulo de giro
(g/100ml) (β)
1 0 0
(α )t1 =α t1 +n( t 1−t 2)
1 2
2 1 4
Ecuación 2. Corrección de la rotación específica 3 2 10,15
4 2,75 11,2
t1= 20 °C 5 4 15.05
t2= Temperatura a la cual se midió la rotación 6 5 17,15
específica.
Se trazo una curva de calibración, para poder
Se trazó una curva de calibración para hallar el determinar la concentración de la sustancia
valor n, con el fin de realizar la corrección de la problema P2.
rotación específica, ya que esta es afectada por la
temperatura, teniendo en cuanta que solo hay 20
valores tabulados de esta a 20 °C 18
Ángulo de giro (β) 16 f(x) = 3.44 x + 1.13
R² = 0.96
200 14
12
Rotación específica (α)

f(x) = 5.67 x − 50.17 10


150
8
6
100 4
2
50 0
0 1 2 3 4 5 6
0 Concentración (g/100ml)
24 26 28 30 32 34 36 38 40 42
Temperatura (°C)

Gráfica 2. Ángulo de giro con respecto a la


concentración de la sustancia dextrógira
Gráfica 1. Variación de la rotación con respecto a conocida.
la temperatura.

Donde la pendiente de la recta es igual a n, ahora se


y=3,4431 x +1,1274
procede a calcular la rotación específica de la
Donde ‘x’ representa a la concentración de la
sustancia con la temperatura corregida, haciendo
sustancia, y ‘y’ al ángulo de giro correspondiente a
uso de la ecuación 2:
la sustancia, reemplazando el valor de β=14,5 en la
ecuación anterior, se tiene que la concentración de
(α )20
1 =9,15+5,6667(20−25) la sustancia problema P2 es:

(α )20
1 =−19,1835 x=
14,5−1,1274
=3,8838
3,4431
Según el valor la rotación especifica de la sustancia Por tanto, la concentración de P2 es 3,8 g/100ml.
problema (P1), y comparando con las posibles
sustancias tabuladas en el anexo 1, se llegó a la
conclusión que existen dos posibles sustancias; una

____________________________
3

 Determinación de la concentración de la sustancia Se prepararon dos soluciones de sacarosa con HCl a


problema (P3). Se trata de una sustancia levógira. diferentes concentraciones (ambas con 25 ml de sacarosa al
20% enrasadas a 50 ml con el HCl respectivo), la primera
Se debe tener en cuenta que por tratarse de una con HCl 6N, y la segunda con HCl 4N, las cuales se dejaron
sustancia levógira el verdadero valor del ángulo de durante dos horas en un sistema termostático a 50 °C para
giro es el medido por el instrumento menos 180°. [] determinar el punto final de la inversión del azúcar.

 Aplicación.

Tabla 3. Curva de calibración para la sustancia Determinación de la sacarosa en una bebida


P3 conocida. azucarada (jugo hit de naranja piña).

Patrón Concentración Ángulo de β-180° Se realizaron patrones de sacarosa con agua


(g/100ml) giro (β) destilada en matraces de 25 ml, y se midió el
1 0 0 -180 ángulo de giro para cada patrón, esto con el fin de
2 1 177,10 -2,9 realizar una curva de calibración, y poder así
3 2 176,35 -3,7 determinar la concentración de azúcar en la bebida.
4 2,75 175,9 -4,1
5 4 172 -8 Para ello se tomaron 20 ml de jugo y se diluyeron a
6 5 170,8 -9,2 25 ml con el fin de aclararlo, ya que en polarimetría
se requieren muestras incoloras o incluso
0 translucidas.
-10.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5
Ángulo de giro (β)

-2
-3 f(x) = − 1.72 x − 0.49
-4 R² = 0.93
-5
-6
-7
-8
-9 Tabla 4. Curva de calibración de la sacarosa para
-10 la aplicación
Concentración (g/100ml)
Patrón Concentración Ángulo de giro
(M) (β)
1 0 0
Gráfica 3. Ángulo de giro con respecto a la
2 0,012 10,5
concentración de la sustancia dextrógira
3 0,047 11,7
conocida.
4 0,070 12,5
5 0,093 14,6
y=−1,7231 x−0,4868 6 0,11 16,75
7 0,12 18,85
Donde ‘x’ representa a la concentración de la 8 0,14 20,55
sustancia, y ‘y’ al ángulo de giro correspondiente a
la sustancia, reemplazando el valor de β=-4,8 en la
ecuación anterior, se tiene que la concentración de Se trazo una curva de calibración, para lograr
la sustancia problema P3 es: determinar la concentración de azúcar en la bebida.

−4,8+ 0,4868
x= =2,5031
−1,7231
Por tanto, la concentración de P3 es 2,5 g/100ml.

Sesión 2

Se procedió a calibrar el instrumento, para su posterior uso


en la aplicación para la determinación de la concentración
de azúcar en una bebida azucarada.

____________________________
4

25 Ahora se calcula la concentración de 0,1 M.

Ángulo de giro (β)


20
f(x) = 114.7 x + 4.69 mol 342,3 g 1L g
R² = 0.84 C s=0,1 × × =0,03423
15 L 1mol 1000 ml ml
10
El porcentaje de error entre el valor teórico de la
5 concentración de la sacarosa en la bebida y el
0 obtenido experimentalmente es:
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16
Concentración (M) 0,038−0,03423
%E= ×100=0,99 %
0,038

Gráfica 4. Ángulo de giro con respecto a la Se puede observar que el porcentaje de error
concentración de los patrones de sacarosa para la obtenido es aproximadamente el 1%, esto quiere
aplicación. decir que la determinación de la concentración de
la sacarosa en bebidas azucaras mediante la técnica
y=114,7 x−4,6933 polarimétrica es muy exacta, ya que el % de error
es aceptable hasta el 5%, esto demuestra una gran
Donde ‘x’ representa a la concentración de la confiabilidad en el método usado.
sustancia, y ‘y’ al ángulo de giro correspondiente a
la sustancia, reemplazando el valor de β=17,95 en  Inversión de la sacarosa.
la ecuación anterior, se tiene que la concentración
de la de sacarosa en la bebida azucarada es: En la siguiente tabla están contenidos los ángulos
de giro de cada solución de sacarosa al 20 % y
17,95+4,6933 HCl, al transcurrir un lapso de 4 minutos entre cada
x= =0,1155 medición.
114,7
Como se diluyo una cantidad de jugo en agua, se Tabla 5. Datos requeridos para la inversión de la
hace la corrección de la concentración con el sacarosa.
producto entre la concentración calculada y el
factor de dilución que es igual a 0.8. La
concentración corregida es: Tiempo (min) β con HCl 6N β con HCl 4N
4 12,6 6,55
8 14,9 13,85
20 ml 12 16,10 14,9
C=0,1155 M × =0,0924 M
25 ml 16 16,9 15,9
Este valor se puede aproximar a 0,1. Por tanto, la 20 14,10 16,9
concentración de la sacarosa en el jugo es de 0,1 24 12,75 10,85
M. 28 11,6 10,6
32 9,65 6,5
Cabe aclarar que según la tabla nutricionista de la 36 8,7 12,7
bebida, la cual reportaba una concentración de 40 7,6 19,9
sacarosa correspondiente a 19g/500 ml; para la 44 14,9 17,10
determinación de esta en el laboratorio se uso solo 48 16,10 15,6
20 ml del jugo, por lo que se requiere hacer el
siguiente calculo: Se tomo 𝛽∞ como el ángulo de rotación encontrado
con la última medición después de 2:30 horas de la
19 g ms solución de sacarosa al 20% con HCl 6N, donde
= 𝛽∞=-3.5.
500 ml 25 ml
Donde: Para hallar el valor 𝛽o, el cual se determinó por
medio de la extrapolación. Se procede a construir
ms: masa de la sacarosa en le dilución. un gráfico en coordenadas Log (𝛽t - 𝛽∞) contra el
tiempo en abscisas y extrapolando la línea obtenida
m s =0,95 g hasta t=0 se determina Log (𝛽o - 𝛽∞) y luego se
calcula. Por último, se calcula la constante de

____________________________
5

velocidad de reacción para cada momento, y se 16 16,9 -0,0068 15,9 -0,0207


hace el cálculo para media.
20 14,1 0,0019 16,9 -0,0191
1.4000 24 12,75 0,0049 10,85 -0,0012
1.2000
f(x) = − 0 x + 1.26 28 11,6 0,0069 10,6 -0,0004
1.0000 32 9,65 0,0103 6,5 0,0103
Log (𝛽t - 𝛽∞)
0.8000 36 8,7 0,0112 12,7 -0,0042
0.6000 40 7,6 0,0125 19,9 -0,0130
0.4000 44 14,9 -0,0001 17,1 -0,0089
0.2000
0.0000 48 16,1 -0,0014 15,6 -0,0066
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min) Promedio (k) 0,00541 Promedio -
(k) 0,00274

Gráfica 5. log(βt-β∞) vs. T para encontrar βo con


HCl 6N. Según el promedio de la constante de velocidad
para cada una de las soluciones de sacarosa al 20%
Se tiene que: Log(𝛽t - 𝛽∞)= -0,002T + 1,2624 con HCL de diferentes concentraciones, teniendo
en cuanta que hubo valores negativos de la
Mediante extrapolación para un tiempo t = 0 el constante de velocidad para algunos momentos; se
Log (𝛽o - 𝛽∞) =1,2624. Por lo tanto, 𝛽o=14,797 observa que la solución con HCl 6N tiene una
mayor constante de velocidad, indicando que entre
1.6000 mayor concentración se tenga mayor será la
1.4000 constante de velocidad.
1.2000 f(x) = 0 x + 1.14
Log (𝛽t - 𝛽∞)

1.0000 La linealidad de la gráfica 5 fue mucho mejor en


0.8000 comparación con la gráfica 6, esto se puede notar al
0.6000 ver que los puntos pertenecientes a los valores de
0.4000 Log (𝛽t - 𝛽∞) se encuentran muy cercanos a la
0.2000 línea de tendencia, mostrando así una menor
0.0000 dispersión en estos.
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

La polarimetría es una gran técnica para la determinación de


Gráfica 6. log(βt-β∞) vs. T para encontrar βo con azúcar en la industria alimenticia, ya que cuenta con una
HCl 4N. escala para la determinación exclusiva se esta sustancia.
Se tiene que: Log (𝛽t - 𝛽∞) = 0,0027T + 1,1439 La polarimetría no solo es útil para la determinación de
concentración de una sustancia, si no que también determina
Mediante extrapolación para un tiempo t = 0 el el punto final de una reacción, como se observo en la
Log (𝛽o - 𝛽∞) =1,1439. Por lo tanto, 𝛽o=10,428 inversión de la sacarosa.
Tabla 6. Constante de velocidad promedio para Esta técnica se ve afectada por la temperatura, y por la
cada instante en amabas soluciones. composición de la sustancia, esta debe ser obligatoriamente
ópticamente activa, incolora o translucida, de lo contrario el
Tiemp βt (°) k βt (°) con k ángulo de giro será igual a cero. Una de las limitaciones más
o (min) con HCl HCl 4N importantes de la polarimetría es que solo es utilizable para
6N sustancias con al menos un centro quiral en su estructura, y
4 12,6 0,0319 6,55 0,0815 que estén en estado líquido.
8 14,9 -0,0007 13,85 -0,0274
Se debe tener en cuenta que, los instrumentos son antiguos,
12 16,1 -0,0057 14,9 -0,0232 lo cual conlleva a que no se tenga una gran exactitud y poca
precisión en los datos obtenidos debido a que la imagen del
claro-oscuro no se observaba muy claro, y cuando el ángulo

____________________________
6

tendría que seguir aumentando a medida que la polarimetría para la determinación de concentraciones de las
concentración aumentase, según la ley de Biot, este soluciones problemas, las cuales eran ópticamente activas.
disminuía. Se requirió también algunos materiales volumétricos como:
matraces aforados, pipetas, vasos de precipitados, goteros;
No se debe dejar burbujas en el tubo con la muestra, ya que materiales gravimétricos, como: balanza analítica, entre
esta causa una gran interferencia en el campo de visión. otros. Estos se emplearon más que todo en la preparación de
las soluciones patrones.
Se debe realizar la limpieza muy bien de los cristales que
contienen los tubos, ya que, al no hacerlo, estos pueden PREGUNTAS
contener hogos e impurezas que se verán reflejados en los
datos obtenidos. 1. ¿Qué factores afectan las medidas del ángulo de
giro?
Mantener el polarímetro en un lugar seco y fresco con
circulación de aire para prevenir manchas de humedad y de R/ Los factores que afectan la medida del ángulo de
moho en las partes ópticas, discos polarizadores ya que giro, son:
repercutiría en la resolución del polarímetro. [6]  Temperatura.
 La lectura del ángulo por parte del
Después de su uso, el tubo debe ser vaciado y lavado con analista. [8]
agua destilada, y bien secado. [6]  La longitud del tubo que contiene a la
muestra, ya que entre mayor longitud es
Para la limpieza de las partes ópticas utilizar un pincel de mucho más muestra para analizar. [7]
pelo suave o algún paño suaves que no desprenda pelusa.[6] 2. ¿Qué factores afectan la medida de la rotación
específica?
No utilizar
disolventes orgánicos para la limpieza de las partes metálica R/ Los factores que afectan la medida de la
s del equipo, ya que podría dañar la pintura, utilice un trapo rotación óptica, son:
humedecido en una disolución jabonosa neutra. [6]
 La temperatura. [2]
Después de terminar de usar el polarímetro se debe cubrir  La longitud de onda de la luz. [2]
bien con la funda protectora para evitar la acumulación de
polvo. [6] 3. ¿Cómo puede determinar la confianza en los
resultados analíticos obtenidos?
APLICACIÓN INDUSTRIAL
R/ La confianza en los resultados analíticos se
Aplicación de la polarimetría láser en el proceso de puede determinar por la precisión del instrumento
control de la producción de la industria tequilera. [10] utilizado, por la comparación de los valores
teóricos de las muestras estudiadas con los
El método polarimétrico se emplea para la medición de obtenidos experimentalmente, y también por la
jugos de agave crudos y cocidos. repetibilidad de los datos obtenidos.
Esto se hace con el fin de determinar: El control de la En muchos casos un método analítico es
calidad del agave que entra como materia prima a la desarrollado y validado por un grupo de trabajo y
industria tequilera, la determinación del contenido de aplicado por otro grupo y para asegurar que este
azúcares del jugo de agave horneado previo a la último sea a su vez capaz de entregar resultados
fermentación y el control del proceso de fermentación del confiables, es conveniente realizar una
jugo de agave y por tanto el control de la producción en la transferencia de validación. Si se trata, por
mencionada industria. Para estos fines se toma como ejemplo, de un método cromatográfico consiste en
referencia las experiencias en el desarrollo de los métodos la comparación de resultados de las pruebas de
sacarimétricos en la industria azucarera que emplea los adecuación y análisis en paralelo, al menos dos
polarímetros automáticos como instrumento fundamental muestras homogéneas de concentraciones
del laboratorio de análisis y experiencias en el control de la conocidas, dentro del rango de aceptación del
fermentación de la industria vinícola. producto o dentro del rango de aplicación de la
metodología. []
MATERIALES Y MÉTODOS
En un ensayo de validación deben considerarse los
Se hizo uso de un polarímetro Carlzeiss Jena con una siguientes parámetros:
precisión de +/- 0,05, esto basado en la técnica de

____________________________
7

o Selectividad. [6] Jou Rojo. Polarimetría. [Online] Disponible en:


o Linealidad. https://www.academia.edu/23978479/Polarimetria .
o Precisión. Acceso: 12 mar. 2020.
o Exactitud.
o Sensibilidad. [7] Jesús Castro. Polarimetría [Online] Disponible en:
o Robustez. https://es.scribd.com/doc/70932411/Polarimetria .
Acceso 13 mar. 2020.
4. Consultar en qué consiste la Escala Internacional
del Azúcar. [8] Juliana López. Polarimetría [Online] Disponible en:
https://www.academia.edu/32015148/lab_analisis_polar
R/ En la industria del azúcar, la Escala imetría..pdf . Acceso: 5 mar. 2020.
Internacional del Azúcar (ISS en sus siglas
inglesas) es la escala oficial por ICUMSA para la [9] Dra. Luz María Paucar Menacho. Tecnología de azúcar
medición de la concentración de sacarosa, que se [Online] Disponible en:
denota °Z. [8] http://biblioteca.uns.edu.pe/saladocentes/archivoz/curzo
z/tema_10_azucar.pdf . Acceso: 13 mar. 2020.
Los polarímetros utilizados en la industria del
azúcar se suelen configurar para mostrar los [10] Fajer V.*, Rodríguez C.**, Flores R.***, Naranjo S.**,
resultados en la Escala Internacional del Azúcar Cossío G.* y López J.*. APLICACIÓN DE LA
directamente. La solución normal de azúcar de 26 g POLARIMETRÍA LÁSER EN EL PROCESO DE
de sacarosa pura, disuelta en agua pura a 100 cm 3, CONTROL DE LA PRODUCCIÓN DE LA
medidos a 20 °C, es igual a 100°Z. [9] INDUSTRIA TEQUILERA [Online] Disponible en:
https://www.cenam.mx/Memorias/descarga/Memorias
%20Simposio/documentos/ta-or083.PDF . Acceso: 13
mar. 2020.

REFERENCIAS

[1] Ing. Fanny E. Molina Suárez. Refractometría y [Resultados y discusión] Luisa Fernanda Del Rio
polarimetría. [Online] Disponible en: Renteria. Informe laboratorio de análisis instrumental.
https://www.coursehero.com/file/41052534/refractometria- Polarimetría [Online] Disponible en:
y-polarimetria-2013-051942-1pdf/polarimetria . Acceso 13 https://www.studocu.com/co/document/universidad-
mar. 2020. tecnologica depereira/analisis-instrumental-
i/informe/informe-lab-polarimetria/5641259/view .
[2] Everly Huanca Ramírez. Polarimetría [Online] Acceso: 13 mar. 2020.
Disponible en:
https://es.slideshare.net/everlyramirez/61753722-
polarimetria. Acceso 13 mar. 2020.

[3] Ingeniero en formación. ¿Cuáles son las sustancias


dextrógiras, las sustancias levógiras y que tienen que ver
con la luz polarizada?. [Online] Disponible en:
http://ingenform.blogspot.com/2009/09/cuales-son-las-
sustancias-dextrogiras.html . Acceso 13 mar. 2020.

[4] AGS Analítica. ¿Para qué sirve un polarímetro?.


[Online] Disponible en:
https://www.agsanalitica.com/para-que-sirve-un-
polarimetro . Acceso 11 mar. 2020

[5] Polarimetría y refractometría. [Online] Disponible en:


https://es.scribd.com/doc/18665750/POLARIMETRIA-
Y-REFRACTROMETRIA . Acceso 11 de mar. 2020.

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8

Anexo 1. Tabla de las posibles sustancias para P1

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