UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

“Norte de la Universidad Peruana”

Fundada por Ley N° 14015 del 13 de febrero de 1962
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
Escuela Académico Profesional de Ingeniería Ambiental
- Sede Celendín -
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“Año del Dialogo y la Reconciliación Nacional”

BIOQUÍMICA

INFORME

“DEMOSTRACIÓN DE LA DEGRADACIÓN DEL ALMIDÓN Y

SACAROSA POR ALFA AMILASA Y SACAROSA”

 ALUMNOS: OLIVARES PALMA, Keiler Carlos

 DOCENTE: ing. Luis Javier Quipuscoa Castro

 AÑO ACADÉMICO: 2019.

 CICLO : V

CELENDÍN- PERÚ
2019

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 DEMOSTRACIÓN DE LA DEGRADACIÓN DEL ALMIDÓN Y
SACAROSA POR ALFA AMILASA Y SACAROSA

I. INTRODUCCIÓN

perpetúa y se replica así misma por medio de reacciones orgánicas encadenadas por
catalizadores que la misma célula produce: la totalidad de las reacciones encadenadas se
denominan metabolismo, cualquier participante en una reacción metabólica, sustrato,
intermediario o producto, se denomina metabolito.
El metabolismo puede ser dividido en dos categorías: Anabolismo procesos
concerniente con la biosíntesis de moléculas orgánicas complejas y Catabolismo,
procesos concernientes a la duración de moléculas orgánicas complejas, con la
generación simultanea de energía.
Los polisacáridos cumplen una variedad de funciones en los organismos vivos. Algunos
como el almidón y glucógeno (almidón animal) sirven principalmente para almacenar
azucares en las plantas, animales, otros como la celulosa, la quitina, son materiales
estructurales análogos a las proteínas estructurales.
Glucógeno, amilasa, amilopectina, están formados por alfa D- glucosa unida por enlaces
glucosídicos. El almidón se almacena en gránulos casi en toda clase de células. Pero en
granos de semillas, tubérculos y frutos verdes son especialmente ricos en este material.
Enzimas diferentes catalizan la hidrolisis y la síntesis de almidón y glucógeno; la alfa
amilasa cataliza la hidrolisis de los enlaces alfa glucosídicos, produciendo glucosa,
maltosa, maltotriosa y dextrinas limite; la beta amilasa cataliza la hidrolisis de los
enlaces alfa 1,4 glucosídicos produciendo maltosa a partir del extremo no reductor. El
alfa amilasa y beta amilasa no pueden hidrolizar los enlaces 1,6 glucosídicos; es
necesario que la enzima amilo 1,6 glucosidasa presente en animales, plantas y
microorganismos.
La prueba de Benedict es otra de las reacciones de oxidación, que como conocemos, nos
ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es decir, aquellos compuestos que
presentan su OH anomérico libre, como por ejemplo la glucosa, lactosa o maltosa o
celobiosa, en la reacción de Benedict
Los disacáridos lo encontramos de muchas formas en los organismos vivos entre ellos
tenemos: sacarosa, maltosa, lactosa, trehalosa. Los cuales podemos clasificar en
azúcares reductores y no reductores.

II. OBJETIVOS

II.1. OBJETIVO ESPECIFICO

 Demostrar que las alfa amilasas hidrolizan al almidón hasta azúcar reductor.

II.2. OBJETIVOS PARTICULARES

 Demostrar que la levadura de panificación tiene una enzima sacarasa que hidroliza a la
sacarosa en un azúcar reductor.
 Cuantificar el azúcar reductor mediante la realización de una curva patrón.

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 III. MARCO TEÓRICO

1. La prueba de Benedict
es otra de las reacciones de oxidación, que como conocemos, nos ayuda al reconocimiento de
azúcares reductores, es decir, aquellos compuestos que presentan su OH anomérico libre, como
por ejemplo la glucosa, lactosa o maltosa o celobiosa, en la reacción de Benedict, se puede
reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en un medio alcalino, el ión cúprico (otorgado por
el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su
forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al
óxido cuproso (Cu2O), que precipita de la solución alcalina con un color rojo-naranja, a este
precipitado se lo considera como la evidencia de que existe un azúcar reductor.
El reactivo de Benedict está compuesto por:
-Sulfato cúprico.
-Citrato de sodio.
-Carbonato anhidro de sodio.
2. Los polisacáridos
cumplen una variedad de funciones en los organismos vivos. Algunos como el almidón y el
glucógeno (almidón animal) sirven principalmente para almacenar azucares en las plantas,
animales, otros como la celulosa, la quitina son materiales estructurales análogos a las proteínas
estructurales.
3. Disacáridos
los encontramos de muchas formas en los seres vivos, los cuales se clasifican en : azucares
reductores y no reductores.
Azucares reductores: maltosa (glucosa + glucosa -alfa-1,4) procedente de la hidrolisis parcial
del almidón y del glucógeno; lactosa (galactosa + glucosa – beta-1,4) azúcar de la leche.
Azucares no reductores: sacarosa (glucosa + fructosa – alfa -1-beta-2), es el azúcar de mesa
procedente de la caña; trehalosa (glucosa+ glucosa-alfa-1-alfa-2), se encuentra en los insectos.

IV. MÉTODOS Y MATERIALES

 Materiales
 Almidón 1%
 Cloruro de sodio 8.5%
 Alfa amilasa pancreática
 Solución cúprico-alcalino
 Solución fosfomolibdica
 Buffer fosfato pH 4.7
 Reactivo de benedict
 Reactivos
 sacarosa 0.25M
 alfa amilasa salival 1%

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  alfa amilasa de trigo
 espectrofotómetro visible
 buffer fosfato pH 6.6
 levadura de panificación al 10%

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

sistema
componentes I II III IV V VI VII VIII
Buffer fosfato PH 6.6 1.5ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml
Buffer acetato pH 4.7 1.5ml 1.5ml     1.5ml 1.5ml
Cloruro de sodio 1%  0.5ml  0.5ml    0.5ml  0.5ml  
Solución de almidón 1%  1ml  1ml  1ml 1ml  1ml  1ml  
Solución sacarosa 0.25 M            1ml 1ml
Alfa amilasa salival 1%    0.5ml        
Alfa amilasa de
trigo(germinado)        0.5ml    
Alfa amilasa pancreática 0.5ml
Suspensión de levadura de 0.5ml
planificación al 10%  
Agua destilada 0.5ml 1ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml
incubar a 37 ºC por 30 minutos 10 minutos

armar otro sistema

tomar 0.5 ml de los tubos anteriores(incubados) y colocar en el nuevo sistema.
sistema
componentes I II III IV V VI VII VIII
Buffer fosfato PH 6.6 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml
Buffer acetato pH 4.7 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml  0.5ml  0.5ml 0.5ml 0.5ml
HERVIR POR 10 MINUTOS Y LUEGO ENFRIAR CON AGUA A CHORRO  
Agua destilada 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
AGITAR ENÉRGICAMENTE
Agua destilada 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml

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 VI. RESULTADOS

TUBO I
Finalmente, después de agregar la última solución fosfomolibdica se obtuvo un color celeste
transparente.
TUBO II
Después de agregar solución fosfomolibdica y solución cúprico alcalina se obtuvo un color
celeste transparente.
TUBO III

También se tornó un color celeste transparente.

TUBO IV
Después de la incubación se obtiene una sedimentación y se torna de un color lechoso; luego de
agregar la solución fosfomolibdica se obtiene un color azul metálico.
TUBO V
Después de la incubación hubo sedimentación, pero no cambió de color; luego se agregó la
solución fosfomolibdica, pero el color siguió intacto.
TUBO VI
La incubación se dio por 30 minutos, luego se obtuvo una sedimentación y cambio de colores
de rojo oscuro en la parte alta y la parte baja se tornó de un color rojo opaco.
TUBO VII
Se tornó de un color celeste con la solución alcalina, después de haber hervido se volvió de
color celeste claro y finalmente con el agua destilada se obtuvo un color transparente.
TUBO VIII
Se tornó de color celeste con la solución cúprica alcalina, mientras ha ido hirviendo se a
tornado de color verde, a los 6 minutos se vuelve de color amarillo, a los 9 minutos se torna de
color anaranjado; finalmente se obtiene un azul oscuro en la parte inferior y en la parte superior
celeste.

Resultados de algunos tubos de ensayo

CONCENTRACIÓN DE GLUCOSA

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TUBOS
I.462 II.464 III.486 IV. 0.820
V. 5.32 VII. O.488 VIII. 0.776
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Respecto a nuestra práctica podemos observar que cuando existe la presencia de amilasa ,
almidón y agua no existe la hidrólisis , en cambio cuando existe la presencia de almidón y el
agua ; si existe la hidrólisis.
Cuando observamos los resultados con Benedict podemos observar que en la presencia de la
enzima amilasa si existe presencia de azúcares ya que esta enzima compleja convierte al
almidón en una molécula simple en donde se presentan los azucare, en cambio donde solo se
encuentra agua y almidón no presenciamos los azucares.

CONCLUSIÓN
 Se obtiene la hidrólisis de la sacarosa, gracias a la adición de ácido sulfúrico (o ácido
clorhídrico) y baño maría, lo que nos permite la incorporación de una molécula de agua,
permitiendo la reacción positiva de este azúcar por la capacidad reductora que poseen
los glúcidos, al ser sometido a este proceso, ya que el ácido nos ayuda a separar la
sacarosa en glucosa y fructosa.
 Se comprueba de una forma práctica, que la sacarosa, es un disacárido que en
reacciones de oxidación como la reacción de Benedict, no presenta evidencia de un
precipitado con coloración rojo ladrillo, y no es un azúcar reducto

VII. CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son los polisacáridos que se encuentran en los animales, plantas e insectos
y cuál es la función que cumplen?

 Almidón. es un polisacárido de reserva en los vegetales. se trata de un polímero de

glucosa, formado por dos tipos de moléculas: amilosa en un 30%, molécula lineal,
que se encuentra enrollada en forma de hélice y amilopectina en un 70%, molécula
ramificada.
 Glucógeno.es un polisacárido de reserva en animales, que se encuentra en el hígado
y músculos.
 Celulosa. Polisacárido estructural de los vegetales en los que constituye la pared
celular. es el componente principal de la madera, que se unen para dar fibrillas y
que a su vez producen fibras visibles.
 Quitina. Forma el exoesqueleto de los artrópodos y pared celular de los hongos

2. Realizar la fórmula estructural de los siguientes disacáridos y cuál es su fuente

natural: sacarosa, maltosa, lactosa, thealosa, celobiosa.

 La sacarosa, sucrosa, azúcar común o azúcar de mesa es un disacárido formado por

glucosa y fructosa. Es un disacárido que no tiene poder reductor sobre el reactivo de
Fehling y el reactivo de Tollens.

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 La maltosa, también conocida como maltobiosa o azúcar de malta, es un disacárido
formado por dos glucosas unidas por un enlace glucosídico producido entre el oxígeno
del primer carbono anomérico (proveniente de -OH) de una glucosa y el oxígeno
perteneciente al cuarto carbono de la otra.

 La lactosa, es un disacárido formado por la unión de una molécula de glucosa y otra de

galactosa. Se conoce también como azúcar de la leche

 La trehalosa, es un disacárido formado de dos moléculas de glucosa donde la unión

glucosídica de tipo α (1->1) involucra los grupos OH de los dos carbonos anoméricos.
Partiendo de dos glucosas reductoras dulces se consigue un disacárido no reductor, con
un bajo poder edulcorante.

 Celobiosa, tiene la misma composición química que la maltosa, excepto que el residuo
glicosídico del enlace está en configuración anomérica b-. Por ello, el nombre
sistemático de la celobiosa es b-D-glucopiranosil (1,4) D-glucopiranosa.

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3. Realizar la formula estructural de Hawart para:
D- glucosa D- galactosa

D- fructosa

4. Realizar la fórmula estructural de los siguientes compuestos:

D- glucosamina D-galactosamina

D-N Acetilglucosamina.

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5. Un azúcar reductor da positivo a la reacción de Fehling o Benedict; de los
disacáridos de la pregunta2. ¿cuáles se comportan como azucares reductores y
cuáles no?

Disacáridos reductores
En ellos, el carbono anomérico de un monosacárido reacciona con un OH alcohólico de
otro.
A este grupo pertenecen la maltosa, la celobiosa y la lactosa.
Disacáridos no reductores
En ellos, el carbono anomérico de un monosacárido reacciona con el carbono
anomérico del otro monosacárido.
A este grupo pertenecen los disacáridos sacarosa y trehalosa.

6. Realizar el esquema de degradación del almidón por acción de la alfa amilasa

pancreática.

7. Realizar el esquema de degradación de la sacarosa por acción de la sacarasa.

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8. ¿por qué en los tubos 4 y 8 se presenta un precipitado rojo ladrillo? Explique
mediante reacciones químicas.

La glucosa, fructosa y maltosa presentan un precipitado de color anaranjado

denominado óxido cuproso (Cu20) es decir que se trata de azúcares reductores.

Cu+2 -----------------------------Cu+1
Ion cúprico --------------------------------Ion cuproso

9. Indique a qué clase pertenece las enzimas utilizadas en la práctica.

Pertenecen a la clase de hidrolasas ya que las enzimas son la amilasa y sacarasa.

VIII. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICAS

 Robert Anthony Robinson, Roger G. Bates: Dissociation constant of

hydrochloric acid from partial vapor pressures over hydrogen chloride-
lithium chloride solutions, In: Analytical Chemistry, 43(7), 1971, pp
969-970
 "Intoxicación con Ácido Clorhídrico." National Library of Medicine.
Medline Plus, n.d. miércoles. 16 Nov. 2011.
 Susan R. Feldman. Sodium chloride. Kirk-Othmer Encyclopedia of
Chemical Technology. John Wiley & Sons, Inc. Published online 2005.

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