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Degradacin enzimtica

UNIVERSIDAD DEL SANTA


de la sacarosa
FACULTAD DE CIENCIAS
EAP MEDICINA HUMANA

Bioqumica
Prof. Camones
Medicina Humana - V Ciclo
Velsquez Tubillas Catalina Ana

PRACTICA 4
DEGRADACIN ENZIMATICA DE LA SACAROSA
I. INTRODUCCIN
Algunas de las enzimas son protenas sencillas, la mayora son protenas
complejas, estos ltimos pueden descomponerse en una porcin proteica y
otro elemento orgnico no proteico (grupo prosttico); en cada caso la
reaccin catalizada enzimticamente depende de una combinacin
transitoria entre la enzima y el sustrato, o el compuesto cuya reactividad es
acelerada por la enzima. Esta combinacin transitoria se denomina
COMPLEJO-ENZIMA-SUSTRATO (E-S). Hoy sabemos que hay al menos 22
tipos de enzimas son responsables de la transformacin de los alimentos
que ingerimos en sustancias ms simples capaces de pasar al torrente
sanguneo a fin de ser utilizadas. Enzimas capaces de acelerar las
reacciones qumicas de la digestin ahorrando as una importante cantidad
de energa y tiempo.
La clula viva puede ser considerada termodinmicamente como un sistema
abierto; la cual se perpeta y se replica a si misma por medio de reacciones
orgnicas encadenadas por catalizadores que la misma clula produce. La
totalidad de las reacciones encadenadas se denomina metabolismo,
cualquier participante en una reaccin metablica, sustrato, intermediario o
producto, se denomina metabolito.
El metabolismo puede ser dividido en dos categoras: ANABOLISMO
procesos concerniente con la biosntesis de molculas orgnicas complejas
y CATABOLISMO, procesos concernientes a la degradacin de molculas
orgnicas complejas, con la generacin simultnea de energa.
Enzimas diferentes catalizan la hidrlisis y la sntesis del almidn y
glucgeno; Alfa amilasa cataliza la hidrlisis de los enlaces alfa glucosdicos,
produciendo glucosa, maltosa, maltotriosa y dextrina. B-amilasa cataliza la
hidrlisis de los enlaces alfa 1 - 4 glucosdicos produciendo maltosa a partir
del extremo no reductor. El alfa amilasa y Beta- amilasa no pueden
hidrolizar los enlaces alfa 1 - 6 glucosdicos; es necesario del enzima amilo
1,6 glucosidasa presente en los animales, plantas y microorganismos.
La hidrlisis de estos enlaces se puede seguir mediante el almidn o el
glucgeno por la reaccin de iodo, o midiendo el producto formado
mediante los azucares reductores, con los reactivos de Fehling y Benedict.
Los disacridos los encontramos en muchas formas en los organismos vivos;
entre ellos tenemos: sacarosa, lactosa, maltosa, etc. Los cuales se clasifican
en: Azucares reductores como la maltosa (Glucosa + glucosa, procedente de
la hidrlisis parcial del almidn y del glucgeno) y la lactosa (Galactosa +
Glucosa) es el azcar de la leche; y no reductores como la sacarosa
(Glucosa + Fructuosa) es el azcar de mesa procedente de la caa de
azcar y remolacha.
Los monosacridos son aldehdos o cetonas polihidroxilados, los
monosacridos que tienen un grupo aldehdo se denomina aldosas y los que
contienen un grupo cetnico - cetosas.. Las aldosas y cetosas en medio
alcalino, son capaces de oxidarse a cidos aldnicos, con lo que pueden
reducir determinados reactivos. Son muy comunes las reacciones de
reduccin del Ion cprico (azul intenso en medio alcalino) a Ion cuproso (rojo
ladrillo), insoluble. Las conocidas reacciones de FEHLING y de BENEDICT.
En solucin alcalina y en caliente la glucosa reduce fcilmente al ion cprico
a cuproso (xido cuproso), en un segundo paso el agregado de solucin

fosfomolbdica es reducido por el ion cuproso con formacin de xidos


inferior de molibdeno los cuales producen un color azul adecuado para las
mediciones espectrofotomtricas.
CAPACIDAD:
Comprueba la accin enzima de la sacarasa sobre la sacarosa, explicando
mediante reacciones qumicas dicha accin e identificando los productos
que se forman.
II. MATERIALES
Material biolgico
Suspensin de levadura al 10%
Reactivos
200 ml de solucin de sacarosa 0.25 M

200 ml de Reactivo de Benedict

200 ml. de solucin Buffer Acetato 0,2M pH 4.8

Materiales
12 Tubos de Ensayo 16x15

4 Mecheros

4 Pinzas

4 Gradillas

Pipetas de 5 ml.

4 Pipeteadores
Equipos
Equipo de Bao Mara a 37C

III. PROCEDIMIENTO
Armar el siguiente set de tubos.

IV. RESULTADOS:
TUBO

COLORACIN

Naranja ladrillo

II

Verde Azulado

III

Azul claro

PRODUCTO
xido cuproso, glucosa y
fructuosa
Solucin de Benedict, levadura
al 10%, agua destilada y
solucin buffer de acetato
Solucin buffer de acetato,
sacarosa al 0.25 M, agua
destilada y solucin Benedict

V. CUESTIONARIO
1. Represente la reaccin enzimtica de la degradacin de
la sacarosa por accin de la sacarasa.

sacara

+
H2O

2. Mediante una reaccin qumica explique la aparicin de


la coloracin rojo ladrillo
El reactivo de Benedict se usa para reconocer azcares reductores
que tienen el OH anmero libre. Puede reducir el Cu +2 (color azul) a
Cu2O (naranja ladrillo)
Cu+2 (Ion cprico)
Cu+1 (Ion
cuproso)
La reaccin de Benedict es especfica para azcares con grupo reductores libres
(C=O). Todos los monosacridos poseen un grupo reductor libre. Los disacridos
maltosa y lactosa tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee,
ya que se pierden los grupos reductores de sus componentes cuando sta es
formada.

Esta prueba se basa en la capacidad del carbohidrato de reducir el Cu2+ en un


medioalcalino a Cu+. Este Cu+ se oxida y precipita en forma de Cu2O, lo que
proporciona la coloracin positiva de la reaccin. La coloracin producida va
desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la concentracin de
xido de cobre y sta a su vez de la cantidad de cobre reducido

3. Grafique la estructura qumica de los azucares


reductores y no reductores
AZUCARES REDUCTORES: Los Azcares reductores son aquellos
azcares que poseen su grupo carbonilo (grupofuncional) intacto, y
que a travs del mismo pueden reaccionar con otras molculas. Por
ejemplo la glucosa.
Los azcares reductores provocan la alteracin de las protenas
mediante la reaccin de glucosilacin no enzimtica tambin
denominada reaccin de Maillard o glicacin.

GLUCOSA

AZUCARES NO REDUCTORES: Los azcares No Reductores son


aquellos que se unen por enlaces glucosdicos de tipo Alfa o Beta,
cuando 2 monosacridos iguales o diferentes se unen forman un
disacrido, los Disacridos por condensacin liberan una molcula de
agua y son azcares no reductores ya que el grupo Oxidrilo ( OH ) de
una hexosa se combina con el grupo Aldehdo ( CHO ) de otra hexosa
liberando 1 molcula de H20, por ejemplo: la Sacarosa ( glucosa +
fructosa ) Maltosa ( 2 unidades de alfa glucosa), Trehalosa, etc.