PRACTICA DE LABORATORIO No 1

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RAFAEL ARLEY VIEDA

20131181034

MARIA DEL PILAR SANTACRUZ GIL

20131181017

BIOQUIMICA

DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JÓSE DE CALDAS

FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERIA SANITARIA

BOGOTÁ D.C

2014
 RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RESUMEN
ABSTRACT
Los carbohidratos son biomoléculas, que
Carbohydrates are biomolecules that
contienen es sus estructuras grupos
contain functional groups are structures as
funcionales como aldehídos o cetonas
polyhydroxy aldehydes or ketones.
polihidroxilados. Los carbohidratos al
Carbohydrates to contain carbonyl and
contener grupos carbonilo e hidroxilo
hydroxyl groups present typical chemical
presentan propiedades y comportamiento
properties and behavior of these two
químico típico de estos dos grupos
functional groups, carbohydrates are
funcionales, los carbohidratos se clasifican
generally classified into monosaccharides
generalmente en monosacáridos y
polisacáridos (simples y complejos), los and polysaccharides (simple and
monosacáridos son carbohidratos que no complex), monosaccharides are
se pueden descomponer a compuestos más carbohydrates that can not be decomposed
simples por medio de hidrolisis, estos a su into simpler compounds by hydrolysis,
vez se subdividen por el número de átomos these in turn are divided by the number of
de carbono y grupo que contengan en: carbon atoms in the group containing
aldosas (aldehído) y cetosas (cetona). Un aldoses (aldehyde) and ketoses (ketone); a
polisacárido es un carbohidrato que al polysaccharide is a carbohydrate which
hidrolizarse da dos o más unidades de upon hydrolysis gives two or more
monosacáridos .Los monosacáridos monosaccharide units. The
presentan reacciones características de monosaccharides present characteristic
óxido-reducción como las reacciones con reactions as redox reactions with reagents
los reactivos de Tollens y Fehling, la Tollens and Fehling, osazones formation
formación de osazonas y la formación de and training of furfural.
furfurales.
Keywords: carbohydrates, chemical
Palabras claves: carbohidratos, properties, classification, characteristic
propiedades químicas, clasificación, reactions.
reacciones características.
OBJETIVOS
Objetivo general carbohidrato que por hidrólisis da dos
moléculas de monosacárido se llama
Identificar mediante reacciones
disacárido, mientras que el que da muchas
características el comportamiento químico
moléculas de monosacárido por hidrólisis
de los carbohidratos, caracterizándolos en
es un polisacárido.
monosacáridos (aldosas o cetosas), en
disacáridos o polisacáridos. Un monosacárido se puede clasificar más
precisamente: si contiene un grupo
Objetivos específicos
aldehído se le conoce como aldosa; si
Diferenciar mediante reacciones contiene una función cetona es una cetosa.
cualitativas los monosacáridos de los Según el número de átomos de carbono
disacáridos y polisacáridos. que contenga, se conoce el monosacárido

Reconocer y analizar las reacciones que se como triosa, tetrosa, pentosa, hexosa, y así

llevan en cada una de las pruebas de sucesivamente.

Molish, Azúcares reductores, Barfoed, Los carbohidratos que reducen los

Bial, Seliwanoff, Prueba del ácido músico, reactivos de Fehling (o Benedict) y
Formación de osazonas y Prueba de Tollens, se conocen como azúcares
Wolhk en los carbohidratos. reductores. Todos los monosacáridos, sean

Reconocer la capacidad oxido-reductora aldosas o cetosas, son azúcares reductores,

de los monosacáridos. como lo son también la mayoría de los

disacáridos, siendo una excepción
Identificar los carbohidratos en una
importante la sacarosa (azúcar de mesa
muestra problema.
común), la que no es reductora.

MARCO TEORICO MATERIALES Y REACTIVOS

 Una gradilla para tubos de ensayo
Los carbohidratos son
 Tubos de ensayo (1= Blanco-
polihidroxialdehídos, polihidrixicetonas o Glucosa- y 2= Patrón-Fructosa)
compuestos que por hidrolisis se  Alfa Naftol 10%. Formula: C10H7O
convierten en aquéllos, un carbohidrato  Ácido sulfúrico concentrado.
que no es hidrolizable a compuestos más Formula : H2SO4
simples, se denomina monosácarido. Un
 Solución de almidón.  Reactivo de Benedict. Formula:
Formula: C6H10O5 CuSO4.5H2O/ CNa2O3/ CKNS
 Ácido clorhídrico. Formula: HCl  Sacarosa. Formula : C12H22O11
 Reactivo de lugol. Formula: I2 (1%)  Fructosa. Formula: C6H12O6
en equilibrio con KI (2%) en agua  Lactosa. Formula: C12H22O11
destilada.  Reactivo de Fehling.
 Galactosa 1%. Formula: C6H12O6

RESULTADOS
Tabla 1 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Molish
PRUEBA DE MOLISH ( C10H7O/ H2SO4 )
Compuesto Características Resultado
Sacarosa
C12H22O11

Se observó la aparición de dos capas, la

primera de color violeta y un precipitado de Positivo
color rojo

Fructosa
C6H12O6
Se observó la aparición de dos capas, la
primera de color violeta, el precipitado de
color rojo pero en mayor cantidad que la Positivo
presentada por la sacarosa

Tabla 2 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Fehling

PRUEBA DE FEHLING

Compuesto Característica Resultado

Fructosa Precipitado rojo
Positivo
C6H12O6

Sacarosa Precipitado rojo

Negativo
C12H22O11

Tabla 3 Reconocimiento de carbohidratos prueba de lugol o yodo

 PRUEBA DE LUGOL : I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua destilada
Compuesto Característica Resultado

Almidón Coloración café-rojiza oscura Positivo

C6H10O5

Tabla 4 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Tollens

PRUEBA CON EL REACTIVO DE TOLLENS
Compuesto Características Resultado
Fructosa Coloración rojiza
Positivo
C6H12O6

Sacarosa
se mantiene la coloración Negativo
C12H22O11
azul

Tabla 5 Reconocimiento de carbohidratos – reactivo de Benedict

 PRUEBA CON EL REACTIVO DE BENEDICT

Compuesto Características resultado

Sacarosa No se produjo ningún Negativo

cambio de coloración
C12H22O11

Galactosa Se produjo un cambio de Positivo

coloración del azul claro a
C6H12O6
rosado evidenciando el
proceso de reducción

Tabla 6 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Barfoed

PRUEBA DE BARFOED

Compuesto Características Resultado

Sacarosa Coloración azul Negativo

C12H22O11

Fructosa Coloración azul Negativo

C6H12O6

Tabla 7 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff

PRUEBA DE SELIWANOFF
Compuesto Características Resultado
Sacarosa Coloración rosada clara Positivo
 C12H22O11

Fructosa Coloración rosada intensa Positivo

C6H12O6

Tabla 8 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Bial

PRUEBA DE BIAL
Compuesto Características Resultados

Sacarosa Coloración anaranjado claro Negativo

C12H22O11

Fructosa Coloración anaranjado oscuro Negativo

C6H12O6

Tabla 9 Reconocimiento de carbohidratos- prueba del Ácido Músico

 PRUEBA DEL ÁCIDO MÚSICO
Compuesto Características Resultado

Galactosa Se forman los cristales Positivo

C6H12O6

Sacarosa No se forman cristales Negativo

C12H22O11

Tabla 10 Reconocimiento de carbohidratos- formación de osazonas

FORMACION DE OSAZONAS
Compuesto Características Resultado

Galactosa Coloración amarilla y cristales Positivo

del mismo color
C6H12O6

Fructosa Coloración amarilla pero no Negativo

aparecen cristales
C6H12O6

Tabla 11 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacáridos

 PRUEBA PARA DISCARIDOS – SACAROSA
Tubo con Características Resultado
HCl Coloración amarilla Positivo

NaOH Coloración ligera rosada Negativo

H2O Traslucido Negativo

Tabla 12 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacáridos

PRUEBA DE WOLHK

Compuesto Características Resultado

Lactosa Ligera capa superior rojiza Positiva
C12H22O11

Fructosa Traslucido Negativo

C6H12O6

ANALISIS DE RESULTADOS
Ensayo
Prueba de La reacción de la fructosa con el H2SO4 concentrado, forma un furfural o
Molisch un derivado del furfural, que se reconoce con el alfa naftol por formación
de un color purpura violeta, el H2SO4 concentrado descompone el
carbohidrato presentándose una hidrolisis en los enlaces glucosidicos.

Este tipo de reacción es de adicción nucleofilica y de tipo SN1, en el cual

el H2SO4 concentrado presenta una hidrolisis de los enlaces glucosidicos y
con el alfa naftol se precipitan para dar una coloración violeta que es el
positivo para los hidratos de carbono.

Ilustración 1. Reacción del Monómero con el 𝐻 2 𝑆𝑂4 concentrado

Ilustración 2 Reacción del derivado furfural con el Alfa naftol

Reactivo de En este ensayo se identifican los azucares reductores, todos los monómeros
Benedict contienen en sus extremos funciones químicas (Aldehídos y Cetonas) que pueden
reducir otras sustancias.
 En la reacción con el reactivo de Benedict, la galactosa al ser una aldosa reduce
el complejo cúprico, desapareciendo el color azul intenso, por un color rojo ladrillo
que el cual es positivo para este ensayo.

La sacarosa es la unión por los dos extremos reductores de la glucosa y la fructosa,

por lo consiguiente no podrá efectuar esta reducción del ion cúprico.

Ilustración 3 Reacción de la glucosa con el Reactivo de Benedict

Reactivo de En presencia de agentes oxidantes, iones metálicos como el 𝐶𝑢+2, los

Fehling monosacáridos presentan varias reacciones de oxidación. Presentándose un
cambio de coloración a rojo ladrillo indicando la presencia de un azúcar reductor,
Para el ensayo con la sacarosa al ser esta la unión de los extremos nucleofilicos de
la glucosa y la fructosa no posee iones libres para formar la reacción de reducción.

Ilustración 4 Reacción de los Carbohidratos con el Reactivo de Fehling

Reactivo de El ensayo con el reactivo de Tollens es una reacción de oxidación, en la cual se

Tollens identifica a las aldosas, ya que las cetosas no reaccionan. En la reacción el reactivo
de Tollens se oxida totalmente, y genera el espejo de plata, ya que el ion de plata
se reduce a plata elemental. Sin embargo la fructosa si reduce el reactivo de
Tollens, esto se debe a que la fructosa se isomeriza fácilmente en una mezcla de
 aldosas (glucosa y manosa) en una disolución básica por una serie de
desplazamiento tautomericos ceto-enol1.

Ilustración 5 Reacción de los Carbohidratos con el Reactivo de Tollens

Prueba de El reactivo de Barfoed es una prueba para distinguir entre monosacáridos y

Barfoed disacáridos, en nuestro ensayo el resultado no fue representativo ya que la sacarosa
que trabajamos no era la indicada, para esta prueba.

Teóricamente la velocidad de reacción al reducir el ion 𝐶𝑢+2 , por parte del

monómero debe ser más rápida que la del disacárido, Esta reacción está limitada
al tamaño de la molécula, siendo la reacción de los monómeros mucho más rápida
que los disacáridos

Ilustración 6 Reacción de los Carbohidratos con el Reactivo de Barfoed

Prueba de El yodo se introduce en las espiras de la molécula del almidona, por lo cual
lugol este toma una coloración oscura. El almidón es coloreado de azul en
presencia de Lugol, debido a una adsorción o fijación del I-3sobre las
unidades de glucosa de la amilosa.

Prueba de Tanto las aldosas como las cetosas en presencia de ácidos minerales y en un
Seliwanoff medio caliente sufren procesos de deshidratación, lo cual da como producto un
anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, según sea el monosacárido
pentosa o hexosa, los furfurales se condensas dando una coloración roja. Las
 cetosas se deshidratan más rápido que las aldosas, lo cual permite
diferenciarlos. En la prueba de Seliwanoff la fructosa al ser una cetohexosa da
un resultado positivo, en cuanto a la sacarosa esta al contener fructosa da
también positivo si se deja correr el tiempo adecuado para que se efectué la
hidrolisis acida en donde la sacarosa libera fructosa.

Ilustración 7. Reacción de las cetohexosas con el reactivo de Seliwanoff

Prueba de Bial Esta prueba se basa en la formación de furfural, al hacer reaccionar pentosas
con HCl y posteriormente con orcinol. El furfural es un aldehído electrofilico, en
presencia de ácido, adiciona fenoles (con pérdida de agua) produciendo
sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan una coloración azul-
verde. En la prueba de Bial no se contó con la ribosa, procedimos a realizar la
prueba con fructosa y sacarosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser
pentosas no dan una coloración positiva, sin embargo las hexosas al reaccionar
con el reactivo de Bial originan una coloración verde, café o café-rojiza, razón
por lo cual en la fructosa se observó una coloración café –rojiza oscura y en la
sacarosa una coloración similar pero clara. Para la pentosas la reacción es:
 Ilustración 8. Reacción de las pentosas con reactivo de Bial

Prueba del La prueba de ácido músico permite identificar la galactosa. El HNO3 oxida tanto
ácido músico al grupo aldehído como al alcohólico primario para formar ácidos dicarboxilico,
el ácido músico insoluble se forma gracias a la oxidación de la galactosa, este
ácido dicarboxilico al ser insoluble precipita en forma de cristales.

Ilustración 9. Reacción de la galactosa con HNO3

Formación de Las aldosas y las cetosas al poseer un grupo aldehído y cetona respectivamente
osazonas pueden reaccionar con la fenilhidrazina para formar fenilhidrazonas, si se utiliza
un exceso de fenildidrazina se forma una osazona que contiene dos residuos de
fenilhidrazina por molécula, mientras que una tercera molécula del reactivo se
convierte en anilina y amoniaco1. La osazona formada por la galactosa (aldosa)
es insoluble y se presenta en forma de cristales amarillos.
 Ilustración 9 . Formación de osazonas
Prueba para La sacarosa es un disacárido que carece de poder reductor, esto se debe a que
disacáridos no posee en la molécula un grupo aldehído o cetona en forma de
hemiacetálitica, el HCl hidroliza la sacarosa dando lugar a la glucosa y la
Sacarosa
fructosa, sus monosacáridos integrantes. Al aplicar la prueba de Benedict y la
de Seliwanoff estas dan positivo. La hidrolisis acida de su enlace glicosidico
permite que sus mono sacáridos glucosa y fructosa (azucares reductores)
reaccionen con el reactivo de Benedict, por otro lado la glucosa y la fructosa en
la prueba de Seliwanoff también arroja un resultado positivo, a causa de las
razones anteriormente expuestas (ver prueba de Seliwanoff).

La prueba de Wolhk permite identificar la lactosa. Lactosa es un azúcar

reductor, forma una osazona y existe en formas alfa y beta que mutarrotan., se
Prueba de
toma como resultado positivo la aparición de una coloración rojiza; en nuestra
Wolhk
muestra de lactosa se observó una ligera capa superior rojiza mientras que en
nuestro blanco no hubo ningún cambio.

Los azucares reductores poseen un

grupo carbonilo libre, lo cual les
CUESTIONARIO
permite reducirse, en cambio en los
1. ¿Qué diferencia existe entre
azucares reductores y no
reductores?
azucares no reductores el grupo
carbonilo se encuentra combinado en
unión glicosidica, haciendo que estos
carezcan de capacidad reductora.

2. ¿cómo puede justificar el hecho de

que la glucosa, al igual que la
fructosa de prueba positiva para
azucares reductores?

Tanto la glucosa como la fructosa son

considerados azucares reductores, es
decir se oxidan fácilmente con Forma abierta Forma
oxidantes suaves, los dos poseen cerrada
carbonos libres en forma de
La manosa se encuentra en las gomas
hemiacetales otorgándoles la
vegetales y es constituyente de muchas
capacidad de reducir.
proteínas.
3. Consulte las estructuras en forma
b) Galactosa
abierta o cerrada de los
siguientes azucares y consulte de
donde se extraen o en donde
abundan y para que se emplean
cada una de ellas:
a) Manosa

La galactosa es sintetizada por las

glándulas mamarias para producir lactosa,
que es un disacárido formado por la unión
de glucosa y galactosa, por tanto el mayor
aporte de galactosa en la nutrición
proviene de la ingesta de lactosa de la
leche. Es un monosacárido que se obtiene
en el intestino, por medio de la acción de
la enzima lactasa. se convierte en glucosa
en el hígado como aporte energético,
forma parte de los glucolípidos
glucoproteínas de las membranas celulares
de las células sobre todo de las neuronas
Se encuentra en los vegetales, las
frutas, la miel, la hidrolisis del azúcar
y de caña y de la inulina. El hígado la
almacena en forma de glucógeno
también es convertida en glucosa y
utilizada por el organismo.

e) Almidón
c) Lactosa

Es un homopolisacárido de reserva energética

Está presente en todas las leches de los
predominante en las plantas, constituido por
mamíferos. La lactosa representa una la unión de grandes cantidades de
fuente energética de fácil utilización y monómeros de glucosa.El almidón se
favorece la absorción de calcio y encuentra en los amiloplastos de las células
vegetales, sobre todo en las semillas, las
magnesio.
raíces y los tallos, incluidos los tubérculos.

d) Fructosa f) Sacarosa

Abundante en la frutas y vegetales, es

usado por la abejas para hacer miel, es
usada como edulcorante, fuente de
energía y conservante.

g) maltosa
 suaves como el reactivo de fehling o de
Tollens o la capacidad de formar
osazonas, además esta clase de
reacciones permiten diferenciar
monosacáridos de disacáridos como la
Se encuentra en la cerveza, en los sacarosa.
granos de cebada, se puede obtener por
Los monosacáridos se diferencia de los
hidrolisis de almidón y glucógeno. Se
disacáridos (sacarosa) por su poder
usa como edulcorante y en jarabes.
reductor, poder que es otorgado por el
h) Ribosa carbono libre que posee, los
monosacáridos a su vez se subdividen
en aldosas y cetosas, y en pentosas o
hexosas, estos fueron identificados y
diferenciados mediante la prueba de
Tollens, de Seliwanoff y de Bial, en las
que se evidencio la velocidad de
deshidratación de las aldosas y cetosas,
La fuente principal de la ribosa son los y la formación de furfural o
ácidos nucleicos, es vital para los hidroximetil furfural, según provenga
elementos estructurales de los ácidos una pentosa o hexosa.
nucleicos y de las coenzimas como
ATO, NAD+, NADP+, flavoproteinas, La sacarosa al hidrolizarse libera a sus

intermediario en la via de las pentosas. monosacáridos constituyentes: la

glucosa y la fructosa, debido a esto la
CONCLUSIONES sacarosa presento resultados positivos
en la prueba para disacáridos y en la
Los carbohidratos al poseer en su
prueba de Seliwanoff.
estructura aldehídos o cetonas,
presentan un comportamiento químico BIBLIOGRAFIA
ligado a los grupos funcionales de
estos, como por ejemplo la capacidad
de oxidarse con agentes oxidantes
1. Morrison, J.Boyd, R. (1976). Química
orgánica: Bioquímica. Estados Unidos

2. Morales. (2005)Reconocimiento de los

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