UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA

PERUANA

ENZIMOLOGÍA CLÍNICA

IQUITOS - PERU
Q.F. WILFREDO O. GUTIÉRREZ ALVARADO
Setiembre del 2020
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
1. CONSIDERACIONES GENERALES
Ez→Proteinas→catalizan reacciones Biolgicas→los S V sin alterar el equilibrio de
la reacción.
Reacciones enzimaticas, son específicas y esenciales para→funciones
fisiológicas.

Niveles enzimáticos aumentan → aparecen en suero→un daño en tejido o una

lesión celular, Proliferación celular (neoplasia), Disminución en clearance a través
del riñon.
Sin embargo, algunas veces y en pequeñas cantidades→de células degradadas o
de áreas de almacenamiento.
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
1. CONSIDERACIONES GENERALES
Algunas Ez cuya función principal (son especificas) es en el plasma.
y aparecen en concentraciones significativas en el mismo.
Ej. Ez de coagulación, activación de complemento, metabolismo de lipoproteína.

Otras Ez no son específicas del plasma, No tienen función en el plasma.

Ej. Ez secretadas por tejidos: amilasas, lipasas, fosfatasas, Ez asociadas con el
metabolismo celular.

Las [séricas Ez] son útiles en el Dx→enf particulares o anomalías fisiológicas.

 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
1. CONSIDERACIONES GENERALES
Uso de los enzimas en el diagnóstico clínico
Determinación de la actividad enzimática.
Es la velocidad a la cual los Ez catalizan las reacciones (U/l)

Análisis clínico.
Determinación de actividad enzimática en sangre.
Aumento:
- Daño tisular→necrosis del tej o ade la permeabilid
- Inducción enzimática→Aumento concentración IC
- Aumento del catabolis cel (reparación tisular, cáncer)
- Descenso del catabolismo
- Obstrucción en la salida exocrina (α-amilasa)
Disminución:
- Deficiencia en el tej D de sínt o a de degradación
- Falta de cofactores
- Inactivación enzimática
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
2. DEFINICION

Es la aplicación del conocimiento de las enzimas (proteínas especializadas en la

catálisis de reacciones orgánicas) al diagnóstico, tratamiento y pronóstico de la
enfermedad.

Aunque son raras las enzimas exclusivas de un tejido, la alteración de la

concentración sérica de un enzima determinada, orienta sobre los tejidos más
probablemente afectados.

Además, muchas enzimas muestran distintas formas moleculares (isoenzimas)

características de distintos tejidos.
El análisis isoenzimático de la enzima cuya concentración sérica se encuentra
alterada a menudo aporta información adicional sobre las causas de dicha
alteración.

Trata sobre los fundamentos de la biocatálisis, incluyendo aspectos preparativos,

estructurales, funcionales y aplicados.

Usa las propiedades funcionales o cinéticas de la catálisis enzimática homogénea

y heterogénea.
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
3. MEDIDA DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

La determinación de la actividad enzimática para diagnóstico clínico requiere:

➢ La enzima este presente en sangre, orina o fluido disponible

➢ La enzima debe ser fácil de analizar y el método automatizado

➢ Las diferencias entre las actividades enzimáticas entre la condición normal y la

enfermedad debe ser significativa

➢ La enzima debe ser estable para poder ser almacenada por un tiempo limitado
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
3. MEDIDA DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

3.1. Métodos de punto final

3.2. Métodos de puntos múltiples

3.3. Métodos cinéticos

 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
4. LAS ENZIMAS COMO REACTIVOS ANALÍTICOS

Pureza.
Evitar interferencias de contaminantes
Estabilidad.
Se mejora con la adición de albumina, glicerol o sulfato de amonio. Eliminar
actividad proteasica (purificación o adición de inhibidores)
Especificidad.
Para la actividad del reactivo →condiciones del analito
Temperatura.
Única 30 ºC también 37 y 25 ºC
pH.
Ctte→amortiguador
Fuerza iónica.
Es capaz de modificar la actividad ez →ctte
Efectores.
Si son activadores => en cc optimas sino eliminarlos
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
5. CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS CIRCULANTES

Enzima 1/2 (horas) Masa molecular

Alanina aminotransferasa (ALT, GPT) 50 110 000
Aspartato aminotransferasa (AST, GOT)
Isoenzima citoplasmática 14 120 000
Isoenzima mitocondrial 6 100 000
Lactato deshidrogenasa
LD-I 107 135 000
LD-5 10 135000
Creatina quinasa
CK-3 (CK-MM) 20 85 000
CK-2 (CK-MB) 10 87 000
CK-I (CK-BB) 3 88 400
Fosfatasa alcalina placentaria 170 120000
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
6. LIBERACIÓN CELULAR DE EZ

Cualquier proceso que altere la producción Energética→

Disminución de Ss oxidables o de oxígeno, promueve el deterioro de la membrana
celular.

En la membrana se inicia la pérdida→lesión celular irreversible, la célula muere.

Pequeñas moléculas→se liberan, a continuación→moléculas grandes, como: Ez, y el

contenido total.

Ez→cél son entre cientos y miles de veces más elevadas que las del líq extracelular.

Hipoxia. Agentes químicos y farmacológicos.

Agentes físicos. Agentes microbiológicos..
Mecanismos inmunitarios. Defectos genéticos.
Enf nutricionales.
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
7. ENZIMAS FRECUENTEMENTE ANALIZADAS

➢ Transaminasas hepáticas (ALT o GPT y AST o GOT)

➢ alfa−Amilasa
➢ Creatín fosfoquinasa (CPK)
➢ Fosfatasa ácida (AcP)
➢ Fosfatasa alcalina (ALP)
➢ Gama glutamil transpeptidasa (GGT)
➢ Láctico deshidrogenasa (LDH)
➢ 5’-nucleotidasa (NTP)
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
8. DISTRIBUCIÓN TISULAR DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE ENZIMAS CON
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
8. DISTRIBUCIÓN TISULAR DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE ENZIMAS CON
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
8. DISTRIBUCIÓN TISULAR DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE ENZIMAS CON
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
8. DISTRIBUCIÓN TISULAR DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE ENZIMAS CON
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
8. DISTRIBUCIÓN TISULAR DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE ENZIMAS CON
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
Enzima Fuentes principales Aplicaciones clínicas principales
Fosfatasa ácida Próstata, eritrocitos. Carcinoma de próstata.
Alanina aminotransferas Hígad, músc esquelétic, corazón. Enfermedad parenquimal hepática.
Aldolasa Músculo esquelético, corazón. Enferm. musculares.
Fosfatasa alcalina Hígado, hueso, mucosa intestinal, Enferm óseas, hepáticas.
placenta, riñón.
Amilasa Glándulas salivares, páncreas, Enfermedades pancreáticas.
ovarios.
Aspartato aminotransfer Hígado, músculo esquelético, Infarto de miocardio, enfermedad parenquimal
corazón, riñón, eritrocitos. hepática. enfermedad muscular.
Colinesterasa Hígado. Envenenamiento por insecticidas
organofosforados.
Creatina quinasa M. esquelético, cerebro, corazón, m. liso. Sensibilid al suxametonium, enfermedades hepáticas
parequimales.
Glutamato dh Higado Infarto de miocardio, enfermedades musculares.
g-Glutamiltransferasa Hígado, riñón. Enfermedades hepáticas parenquimales.
Lactato deshidrogenasa Corazón, hígado, músculo esquelético, Enfermedad hepatobiliar, alcoholismo.
eritrocitos, plaquetas, nódulos linfáts. Infarto de miocardio, hemólisis, enfermedades
hepáticas parenquimales.
5' -Nucleotidasa Tracto hepatobiliar. Enfermedad hepatobiliar.

Antígeno prostático Próstata. Carcinoma de próstata.

Específico
Sorbitol deshidrogenasa Hígado. Enfermedades hepáticas parequimales.
Tripsina (Tripsinógeno) Páncreas. Enfermedades pancreáticas.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA
Q.F. WILFREDO O. GUTIÉRREZ ALVARADO
SAN JUAN - PERU
CATEDRA DE BIOQUÍMICA 1 Setiembre del 2020