UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

CURSO: BIOLOGÍA GENERAL – LABORATORIO

INFORME DE LA PRÁCTICA Nº4

● Título: Proteínas y enzimas.

● Nombre del grupo: Aforezoos

● Integrantes:

1. Valdivia Paico Ursula Karina 20190440

2. Mayta Quintana Andy Kevin 20190234
3. Reyes Chutac Gloria Suli 20190081
4. Tirado Yactayo Cristopher 20180080

Horario de práctica: Jueves de 11:00 a.m. a 1:00 p.m.

● Apellidos y nombres del profesor: David Saravia

● Fecha de práctica realizada: 12 de setiembre de 2019

LA MOLINA – PERÚ
Introducción

La palabra célula fue usada e implementada por primera vez en el sentido biológico
por el científico inglés Robert Hooke (1635-1701). Con un microscopio que él mismo
fabricó notó q algunos tejidos están constituidos por pequeñas cavidades
separadas. Llamó a estas cavidades células que significan habitaciones pequeñas.
Las células están conformadas por proteínas.

Las proteínas son biomoléculas formadas básicamente por carbono, hidrógeno,

oxígeno y nitrógeno. Pueden contener en azufre y en algunos tipos de proteínas
fósforo hierro cobre magnesio y cobre entre otros. (Curtis, 2007)

Pueden considerarse polímeros de unas pequeñas moléculas que reciben el

nombre de aminoácidos y serían, por tanto, los monómeros.

Los aminoácidos se enlazan mediante enlaces peptídicos. La unión de pocos

aminoácidos da lugar a un péptido; si el número de aminoácidos que forma la
molécula no es mayor de 10, se denomina oligopéptido, si es superior a 10 se llama
polipéptido y si el número es superior a 50 aminoácidos se habla ya de proteína.

Las proteínas desempeñan un papel muy importante en los seres vivos y son las
biomoléculas más versátiles y diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones
diferentes, entre ellas funciones estructurales, enzimáticas, transportadora.
(Composición química y clasificación de proteína.
Objetivos

- Identificar proteínas en una muestra

- Observar experimentalmente la desnaturalización.
- Observar la actividad enzimática e identificar los factores que lo afectan.

Revisión literaria
Las proteínas son macromoléculas conformadas por carbono, hidrógeno, oxígeno y
nitrógeno, algunas pueden tener otro elementos como fósforo, azufre, hierro, cobre,
etc.
Constituyen el principio más importante y complejo de las funciones vitales para la
célula.
Está conformada por aminoácidos mediante enlaces peptídicos y se clasifican
según sus estructuras y según su función:
● Por función:
- Estructurales (queratina, fibroína, colágeno)
- Reserva (ovoalbúmina, caseína, ferritina)
- Transporte (hemoglobina, hemocianina, mioglobina)
- Enzimas (hexoquinasa, citocromo c, ADNpol)
- Hormonas (insulina, hormona del crecimiento)
- Protectoras (anticuerpos, fibrinógeno, trombina)
- Contráctiles (miosina, actina, dineína)
● Por estructura:
- Estructura primaria. Es la secuencia específica en el orden y ubicación
de cada tipo de aminoácido en la cadena. Presenta enlace peptídico y
son determinadas por el gen.
- Estructura secundaria. es producto de la atracción entre moléculas de
manera regular, tienen dos formas:
1. Alfa-hélice. presenta ampliamiento helicoidal del esqueleto
carbonado producido por enlaces puente de hidrógeno.
2. Beta-plegada. dos regiones diferentes conformadas por lo
menos de 5 a 10 aas, se unen por enlaces puente de
hidrógeno.
 - Estructura terciaria. Es la conformación que ocupa una proteína en el
espacio ya sea globular o fibrosa, presenta enlaces disulfuro entre la
los segmentos de la cadena polipeptídica y los aminoácidos
individuales. La atracción que se presenta en la hélice de ambos
grupos provoca que la molécula se enrolle sobre sí misma.
- Estructura cuaternaria. estas proteínas poseen más de una cadena de
aminoácidos, es la asociación de estructuras terciarias mediante
enlaces covalentes y no covalentes.

Materiales y métodos

- 1 huevo
- Semillas frescas de frijol
- Goteros
- 1 papa
- botella pequeña de
- Agua oxigenada
- Pequeños trozos de carne e hígado
- Tubos de ensayo
- Vaso de precipitado de 500ml
- Lugol
- Cocina
- Acetona
- CuSO4 al 1%
- Solución de albumina
- Agua destilada
- Ácido nítrico concentrado
- NaOH al 40%
- Ácido sulfhídrico al 75%
- Solución de NaCl al 20%
- Placas de porcelana
- Pipetas
- Gradillas
- Agua destilada
 - Solución de almidón al 1%

Discusión de resultados

Procedimiento [1] – Desnaturalización de proteínas

• Aquí se hizo uso de la albumina en 5 tubos de ensayo enumerados y discutiremos
los resultados observados en cada tubo.

TUBO 1
El tubo de ensayo con albumina, se le puso en el baño maría por 3 minutos y
observamos que se volvió un color blanco, se cocinó.
• ¿Por qué sucede esto?
‘’La desnaturalización irreversible de la proteína de la
clara de huevo y pérdida de solubilidad, es causada
por la alta temperatura. Cuando la temperatura es
elevada aumenta la energía cinética de las moléculas
con lo que se desorganiza la envoltura acuosa de las
proteínas y se desnaturalizan. ’’ (Sofi Ignacia Diaz
Chavez, 2014)

TUBO 2
Aquí se mezclaron la misma proteína albúmina con
ácido sulfhídrico, vimos que la albúmina se cocinó por
acción del ácido.
• ¿A qué se debió esto?
La estructura de las proteínas puede cambiar, debido
a que la estructura cuaternaria puede ser modificada
por ciertos factores como lo son los ácidos,
temperaturas altas, etc.

TUBO 3
Aquí se mezcló albúmina con una sal que fue el cloruro de sodio, observando que la
proteína se vuelve incolora, transparente, mucho más que su forma original.
• ¿Por qué se observó esto, que sucedió?
En este caso introducimos un dializador en la solución de
albúmina y cloruro de sodio (NaCl). El cloruro de sodio,
como sal que es, en medio acuoso se disocia en iones Na+
y Cl- , lo que hace que la solución de albúmina se torne de
ese color.

TUBO 4
Aquí mezclamos ácido nítrico (muy concentrado) con albúmina, observamos una
coloración amarillenta de la albúmina formándose un complejo.
• ¿Por qué se da esto con la proteína?
Al añadir a esta albúmina de huevo a ácido nítrico (HNO3)
ocurre una reacción de coagulación pero en diferentes
proporciones dependiendo del método utilizado y del
reactivo añadido. Este cambio de estructura da a la clara
de huevo la consistencia y color que se observa en la
muestra de solución de la albúmina. (Sofi Ignacia Diaz
Chavez, 2014)

Procedimiento [2] – Reacción de Biuret

• Aquí usamos tubos de ensayo para hacer reaccionar las proteínas con una
reacción especial, llamada reacción de Biuret.

TUBO DE ENSAYO 1
Aquí hicimos reaccionar la albúmina con hidróxido de sodio (NaOH), mezclando y
observamos que se tornó incoloro, posteriormente se añadió sulfato de cobre,
viendo que la solución se volvió de color morado.
• ¿A qué se debe esto en la reacción de Biuret?
El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa
alcalina (gracias a la presencia de NaOH). La reacción se
basa en la formación de un compuesto de color violeta,
debido a la formación de un complejo de coordinación entre
los iones Cu+2 , los pares de electrones no compartidos del
nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos, esto si la
reacción da positiva. Cuando la reacción de biuret da
negativa, queda de color azul.

Procedimiento [3] – Determinación de la enzima catalasa

• Aquí cogeremos pequeños trozos de carne, hígado, papa y frejol. Observaremos lo
que sucede en cada tubo de ensayo y trataremos de dar una breve explicación.

TUBO N°1
Se puso papa con agua oxigenada observando un intenso
burbujeo.
• ¿Por qué sucedió esto?
Es porque la papa contiene una enzima llamada "catalasa"
que es un potente antioxidante.

TUBO N°2
Se colocó carne con agua oxigenada, observando un burbujeo
regular, volviendo la carne un color blanco exteriormente
• ¿A qué se debe eso?
Se debió a las enzimas proteolíticas para ablandamiento de
carne que reaccionan al agregar agua oxigenada.

TUBO N° 3
Se colocó un frejol y se le añade agua oxigenada, se observó más espuma que la
papa y fue de mayor tiempo en general.
• ¿Sucedió algo?
Se vio como el agua oxigenada hizo generar un intenso burbujeo, debiéndose a la

enzima que contiene el frijol.

TUBO N° 4
Se puso un pequeño trozo de hígado y se le añadió agua oxigenada y se vio un
rápido burbujeo, pero de menor tiempo, también el cambio de color blanquesino del
higado.
• ¿Qué sucedió?
Ya que en el hígado hay mayor cantidad de peroxisomas
que en la papa, el burbujeo fue mayor y también justifica
el color blanquesino que tomó el hígado.

Procedimiento [4] – Reacción Aminolítica

Muestra A)
Se observa 4 gotas de lugol, amarillento transparente.

Muestra B)
Las 10 gotas de lugol + 2 de almidón. Se tornó un color morado oscuro y menos
denso que el lugol solo de la muestra A.

Muestra C)
Las 10 gotas de lugol + 10 gotas de amilasa salival por 10min. Luego 2 gotas de
lugol. La amilasa actúa con el almidón observando un color transparente.

Muestra D)
10 gotas de amilasa + 10 de ácido sulfhídrico por 10min. Luego 10 gotas de almidón
por 7 min. Finalmente 2 gotas de lugol
Se observó un cambio de densidad y finalmente se observó un color morado más
claro que la muestra B.

Conclusiones

● Se identificaron las proteínas en cada uno de los tratamientos realizados.

● Observamos y reconocimos la desnaturalización de las proteínas.
● La desnaturalización de las proteínas se da por cambios bruscos del medio
donde esta se encuentra. Los factores tales como la temperatura, el pH,
sales, ácidos, minerales fuertes y metales pesados afectan las interacciones
de las estructuras de las proteínas de manera reversible o irreversible
disminuyendo así la solubilidad de la misma.
● Entre los indicadores de la desnaturalización están el cambio de color, el
aumento de la densidad, en caso esté en contacto con un ácido fuerte se
produciría una reacción exotérmica, liberando calor.

Cuestionario

1. ¿Cuál es el fundamento teórico del reactivo de Biuret?

Su fundamento se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a

la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
Precipitando a una coloración amarilla la reacción nos torna negativa al no haber
presencia de proteínas.
 2. Describir las diferencias estructurales de las proteínas:

ESTRUCTURA PRIMARIA: El nivel más sencillo de estructura de una proteína es

simplemente la secuencia de aminoácidos en una cadena polipeptídica.

Ejemplo: La insulina.

ESTRUCTURA SECUNDARIA: Estructuras plegadas localmente, que se forman

dentro de un polipéptido debido a las interacciones entre los átomos del esqueleto
(el esqueleto se refiere únicamente a la cadena polipeptídica, dejando aparte los
grupos R, lo que significa que la estructura secundaria no implica a los átomos de
los grupos R).

Ejemplo: Los tipos de estructuras secundarias más comunes son la hélice-α y la

hoja o lámina plegada β.

ESTRUCTURA TERCIARIA: Generada principalmente por las interacciones entre

los grupos R de los aminoácidos que conforman las proteínas, se denomina
estructura terciaria. Las interacciones del grupo R que contribuyen a la estructura
terciaria incluyen puentes de hidrógeno, enlaces iónicos, interacciones dipolo-dipolo
y fuerzas de dispersión de London.

Ejemplo: Los grupos R con cargas similares se repelen entre sí, mientras que
aquellos con cargas opuestas pueden formar un enlace iónico. Asimismo, los grupos
R polares pueden formar puentes de hidrógeno y otro tipo de interacciones dipolo-
dipolo.

ESTRUCTURA CUATERNARIA: Unión de subunidades (de varias cadenas poli

peptídicas)

Ejemplo: Hemoglobina.

3. ¿Cuál es la diferencia entre fuerzas de Van der Waals y las atracciones

hidrofobicas?
La diferencias entre las fuerzas de Van der Waals y las atracciones hidrofobicas es
que las primeras son moléculas polares y transitoriamente dipolo-dipolo, en cambio
los componentes del segundo son apolares.

4. ¿Qué es energía de activación?

Es la mínima cantidad energía que necesita un sistema antes de poder iniciar un

determinado proceso. Para que ocurra una reacción entre dos moléculas, éstas
deben colisionar en la orientación correcta y poseer una cantidad de energía
mínima. A medida que las moléculas se aproximan, sus nubes de electrones se
repelen. Esto requiere energía (energía de activación) y proviene del calor del
sistema, es decir de la energía traslacional, vibracional, etcétera de cada molécula.

5. ¿Qué es el sitio activo de las enzimas y cuáles son sus características?

Zona o surco que comparte cierta complementariedad tridimensional con el sustrato.

En este surco existe complementariedad de cargas o de densidades de carga, con
el sustrato; lo cual depende de los aminoácidos que queden en esa zona que, a su
vez corresponderá, en últimas instancia, a la estructura primaria de la proteína.

Características:

Responde a una porción relativamente pequeña del volumen total de la enzima.

Es una entidad tridimensional.

Los sustratos se unen a las enzimas por numerosas fuerzas débiles.

Presentan forma de surco o hendidura.

La especificidad depende de la disposición exactamente definida de los átomos del

centro activo.

Referencias bibliográficas

● https://www.monografias.com/trabajos98/caracterizacion-
proteinas/caracterizacion-proteinas.shtml
● https://cuidateplus.marca.com/alimentacion/diccionario/proteinas.html
● Vásquez Urday, C., Biología, Asoc. Prisma.