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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL

ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
Práctica N° 4

TEMA:

HIDRATOS DE CARBONO

NOMBRE:

Francisco Sebastián Lozano Herrera

SEMESTRE:

Cuarto Semestre

DOCENTE:

Dra. Magdalena Díaz

AYUDANTES DE CATEDRA:

- Erick Ávalos
- Bryan Marcillo

QUITO-ECUADOR

2020-2020
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRÁCTICA 4

HIDRATOS DE CARBONO

1. OBJETIVOS
1.1.Identificación y caracterización de azucares.
1.2.Realizar una marcha analítica de reconocimiento de azucares en dos muestras
problema.
1.3.Caracterizar los carbohidratos presentes en una solución desconocida sobre la base
de varios ensayos químicos.
2. PROCEDIMIENTO
2.1.Familiarización con el sistema
2.1.1. Ingresar al link del sitio web donde se realizará la simulación.
https://vlab.amrita.edu/index.php?sub=3&brch=63&sim=631&cnt=1
2.1.2. Leer sobre la teoría de carbohidratos y las diferentes pruebas que se
realizará para determinar si es un azúcar reductor o no reductor, además
identificar si es un monosacárido, un disacárido o un polisacárido y saber
que reactivos se ocupan dentro de cada ensayo cualitativo.
2.2.Simulación dentro de la aplicación
2.2.1. Dar click en el enlace que redirige al simulador.
2.2.2. Dar click en el botón “start” y proceder con la simulación.
2.2.3. Identificar los materiales de laboratorio a utilizar.
2.2.4. Proceder a seleccionar cada prueba analítica de los carbohidratos.
2.2.5. Observar cada procedimiento que realiza el simulador en cada prueba
que se somete a los hidratos de carbono.
2.2.5.1.Prueba de Molisch
En un tubo de ensayo, agregue 2 ml de la solución de prueba de carbohidratos y 2 gotas
de solución de α-naftol. Incline cuidadosamente el tubo y vierta gota a gota conc. H2SO4,
usando un gotero, a lo largo de los lados del tubo. Observe el color violeta en la unión de
los dos líquidos.
2.2.5.2.Prueba de Benedic
En un tubo de ensayo, agregue 2 ml de la solución de carbohidratos de prueba y agregue
volúmenes iguales de Fehling A y Fehling B y colóquelo en un baño de agua hirviendo
durante unos minutos. Cuando el contenido del tubo de ensayo hierva, mézclelos. y
observe cualquier cambio de color o formación de precipitados. La producción de un
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precipitado amarillo o rojo parduzco de óxido cuproso indica la presencia de azúcares


reductores en la muestra dada.
2.2.5.3.Prueba de Fehling
En el tubo de ensayo con 2 ml de reactivo de Benedict, agregue 5-6 gotas de la solución
de carbohidratos de prueba y mezcle bien. Coloque el tubo de ensayo en un baño de agua
hirviendo durante 5 minutos y observe cualquier cambio de color o formación de
precipitados. Enfría la solución. Observe el cambio de color de azul a verde, amarillo,
naranja o rojo dependiendo de la cantidad de azúcar reductor presente en la prueba.
2.2.5.4.Prueba de Barfoed
A 2 ml de la solución de prueba agregue aproximadamente 2-3 ml del reactivo de Barfoed.
Mezclar bien y hervir durante un minuto en el baño de agua y dejar reposar durante unos
minutos. Formación de un precipitado rojo de óxido cuproso en el fondo y a lo largo de
los lados del tubo de ensayo de inmediato, solo los monosacáridos responden a esta
prueba. Dado que el reactivo de Barfoed es ligeramente ácido, esta prueba es específica
para monosacáridos.
2.2.5.5.Prueba de Seliwanoff
A 2 ml del reactivo de Seliwanoff, agregue dos gotas de solución de prueba. La mezcla
se calienta a ebullición. Se observará un producto de condensación rojo cereza que indica
la presencia de cetosis en la muestra de prueba. No habrá cambios significativos en el
color producido para el azúcar aldosa.
2.2.5.6.Prueba de Bial
A 5 ml de reactivo de Bial, agregue 2–3 ml de solución de prueba y caliente suavemente
en un baño de agua caliente durante 2 minutos. La formación de un producto verde
azulado es indicativo de pentosas. Las hexosas generalmente reaccionan para formar
productos marrones lodosos.
2.2.5.7.Prueba de Lugol
Agregue 2 gotas de solución de yodo a aproximadamente 2 ml de la solución de prueba
que contiene carbohidratos. Se observa un color azul-negro que es indicativo de la
presencia de polisacáridos.
2.2.5.8.Prueba de Osazone
A 0,5 g de hidrocloruro de fenilhidrazina, agregue 0,1 gramos de acetato de sodio y diez
gotas de ácido acético glacial. Agregue 5 ml de solución de prueba a esta mezcla y
caliéntela en baño de agua hirviendo durante aproximadamente media hora. Enfríe la
solución lentamente y examine los cristales bajo un microscopio. Se observarán cristales
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de osazona amarilla en forma de aguja para glucosa y fructosa, mientras que la


lactosazona muestra forma de hongo y la maltosa produce cristales en forma de flor.

3. OBSERVACIONES
Tabla 3.1. Observaciones “Muestra de Sangre”
Muestra Observación

Prueba de Molish

Presenta un Carbohidrato

Prueba de Benedict
Dentro de la sangre existe glucosa por lo
tanto es un azúcar reductor

Prueba de Fehling
Es un azúcar reductor
SOLUCIÓN DE
SANGRE
Prueba de Barfoed

Es un azúcar reductor

Prueba de
Seliwanoff

No presenta una cetosa en su estructura

Prueba de Bial
No presenta una hexosa en su estructura.
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Prueba de Lugol

No es un polisacarido

Prueba de Osazone

Es un azúcar reductor

Figura 3.1. Qué carbohidrato obtuve


Solución de
Sangre

Solubilidad en Solubilidad en
frío caliente

Negativo No es Prueba de Prueba de Negativo


Carbohidrato “Molish” “Lugol”

Prueba de
Es un azúcar
“Barfoed”
Reductor
“Fehling”
“Benedict”

Prueba de Prueba de Negativo


Negativo
“Bial” “Seliwanoff”

Presenta una No presenta una


Hexosa en su cetosa en su
estructura estructura

Glucosa Fructosa

Positivo Negativo
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3.1. Reacciones
3.1.1. Reacción de la Glucosa “Prueba de Molish”

3.1.2. Reacción de la Glucosa “Prueba de Benedict”

3.1.3. Reacción de la Glucosa “Prueba de Fehling”

3.1.4. Reacción de la Glucosa “Prueba de Barfoed”

3.1.5. Reacción de la Glucosa “Prueba de Seliwanoff”

3.1.6. Reacción de la Glucosa “Prueba de Bial”

3.1.7. Reacción de la Glucosa “Prueba de Lugol”

3.1.8. Reacción de la Glucosa “Prueba de Osazone”


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4. DISCUCIÓN
Se puede decir que la muestra de sangre en su estructura contiene glucosa por lo tanto
nuestro análisis previo es válido, ya que la misma es un monosacárido con una estructura
de una aldohexosa, la cual es un azúcar reductor, por ende dio positivo a las pruebas de
Molish, Barfoed, Fehling, Barfoed, Bial y Osazone y negativo a las pruebas de Lugol y
Seliwanoff lo mismo que nos dice que no es un polisacárido y una cetosa respectivamente.
5. CONCLUSIONES
5.1.Mediante la práctica se logró identificar y caracterizar los diferentes azúcares que
podemos encontrar en nuestra vida cotidiana.
5.2.A partir de marchas analítica y diferentes reactivos se logró reconocer los azucares
que contienen las diferentes soluciones problema.
5.3.Se determinó que dentro de la muestra de sangre existe en su estructura glucosa por
lo tanto es un carbohidrato.
5.4.A partir de las diferentes pruebas de carbohidratos se determinó que nuestra muestra
de sangre es un monosacárido con una estructura de una aldohexosa, además que
es un azúcar reductor.
6. CUESTIONARIO
6.1. ¿Cuál será el producto de reacción de la xilosa sometida a la prueba de
Bial?

a) Producto de condensación de color azul


b) Producto de condensación de color verde azulado
c) Un precipitado color marrón lodoso
d) Coloración rojo cereza

6.2. ¿Cuál es el papel del ácido sulfúrico en la prueba de Molisch?

a) Agente reductor
b) Agente deshidratante
c) Oxidante
d) Producción de color

6.3. Si una muestra que se analiza da un resultado positivo para la prueba de


Benedict y la prueba de Fehling, ¿cuál será la muestra?
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a) Reducir azúcar
b) Azúcar no reductor
c) Monosacárido
d) Disacárido

6.4. Qué prueba distingue entre pentosas y hexosas?

a) Prueba de Barfoed
b) Prueba de Bial
c) Prueba de Seliwanoff
d) Prueba de yodo

6.5. En la prueba de Benedict, la reducción de azúcares reduce el hidróxido


cúprico a:

a) Óxido cuproso
b) Óxido cúprico
c) Hidruro cuproso
d) Ninguna de las anteriores

6.6. De lo siguiente, la reacción de color específica para cetosis es:

a) Prueba de Bial
b) Prueba de Seliwanoff
c) Prueba de Osazone
d) Prueba de Barfoed

6.7. Los cristales de osazona en forma de flor son ________________.

a) Lactosa
b) Glucosa
c) Maltosa
d) Manosa

6.8. La prueba de Seliwanoff es positiva para sacarosa.

a) Cierto
b) Falso

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