Sesión 3: Calibración de los Métodos instrumentales

• Jean Paul Miranda Paredes

Método de mínimos cuadrados

A menudo se busca trazar la “mejor” línea recta que pase a través de una serie de puntos
experimentales en una grafica.

Un recurso muy importante para encontrar dicha “mejor” recta es aplicando el método de
mínimos cuadrados.

Es un método matemático que permite ajustarlos puntos en una recta.

Sea la ecuación de la recta: y = mx + b

 Calibración de los Métodos Instrumentales

Los tres métodos mas usados son:

1. Curva de calibrado

2. Adición estándar

3. Patrón interno

El objetivo es convertir la señal en concentración.

Curva de calibración

Se requieren varios estándares de concentraciones conocidas del analito de interés.

Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra original excepto

del analito.

Se representa una grafica de respuesta del instrumento vs concentración del analito

(método de mínimos cuadrados).
 Haga clic para modificar el estilo de título del patrón

Preparación de la muestra

filtración dilución
señal
Preparación de las soluciones estándar

[X]
i = 10 ppm

St

0 1 2 3 4 5 V t = 25 mL

[X] = 0,0 0,4 0,8 1,2 1,6 2,0

f
Se obtiene la señal, mediante un método instrumental

[X] S

0,0 10
0,4 192
0,8 357
1,2 516
1,6 708
2,0 906
Se corrige la señal

[X] S correg.

0,4 182
0,8 347
1,2 506
1,6 698
2,0 896
Método grafico
Método analítico

Sx - b
Cx =
m
Ejemplo 1

Una prueba de calibración para la determinación de Mg+2 arroja los siguientes

resultados:

[Mg+2 ] ppm S
0,0 1,05
1,0 84,19
2,0 115,50
4,0 187,03
8,0 235,66

Se recibe 1g de muestra que contiene Mg+2 .se disuelve cuantitativamente en una fiola de
1L, de ella se diluye 5,0 mL en una fiola de 50 mL produciendo una señal de 105, 22 ¿Cual
es el porcentaje de Mg+2 en la muestra?
Ejemplo 2

Se recibe 2,5 g de muestra que contiene el analito X, se disuelve cuantitativamente en

una fiola de 250 mL, de ella se diluye 2,0 mL en una fiola de 25 mL produciendo una
señal de 1,015 ¿Cual es el porcentaje de X en la muestra?

[ X ] mg/L S
2 0,164
5 0,242
8 0,628
12 0,951
16 1,260
20 1,582
Adición estándar

Se utilizan en muestras complejas donde los efectos de matriz son importantes

Implica añadir uno o mas incrementos de una solución estándar a una alícuota de
muestra.

El valor del volumen en la intersección de la línea recta con el eje-x es el volumen del
reactivo estándar equivalente a la cantidad de analito en la muestra.
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Preparación de la muestra

filtración dilución

x
Preparación de las disoluciones

[c] i = 10 ppm

St

0 1 2 3 4 5 V t = 25 mL

2 mL

X
Se obtiene la señal, mediante un método instrumental

Vs Señal

0,0 130
1,0 300
2,0 490
3,0 650
4,0 820
5,0 1000
Método gráfico
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Método gráfico

Vx Cs
Cx =
Vx
Método analítico

b Cs
Cx =
m Vx
 Ejemplo 1

Un elemento X es mezclado con alícuotas de una solución estándar del mencionado

elemento para absorción atómica. La solución estándar contiene 1000 ug de X por mL

V. Muestra (mL) V. Estandar V. Total (mL) Señal

(mL)
10 0 100 0,163
10 1,0 100 0,240
10 2,0 100 0,319
10 3,0 100 0,402
10 4,0 100 0,478

Calcule la concentración de X por el método analítico y por el método grafico.

Ejemplo 2

Se pipetean varias alícuotas de 10 mL de una muestra de agua mineral en fiolas de 50

mL. A cada uno se adicionan exactamente 0,0; 5,0; 10,0; 15,0 y 20,0 mL de una
disolución patrón que contiene 11,1 ppm de Fe+3 seguido de u exceso de ion tiocianato
para dar el complejo rojo Fe(SCN)+2 y se enrasan hasta 50 mL. Las señales del
fotómetro para las 5 disoluciones fueron 0,240; 0,437; 0,621; 0,809 y 1,009,
respectivamente ¿Qué concentración de Fe+3 hay en la muestra de agua?
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Patrón interno

Un estándar es una sustancia que se añade a todas las muestras en una cantidad
constante.

la calibración supone representar la razón entre la señal del analito y la del estándar
interno como una función de la concentración del analito.

El estándar interno puede compensar distintos tipos de errores sistemáticos y

aleatorios.
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Ejercicios
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Ejercicio 1

Un procedimiento común para determinar proteínas en el ensayo colorimétrico de Bradford. En este

método un colorante se une a la proteína y su color cambia de castaño a azul. La intensidad del color
azul es proporcional a la cantidad de proteína presente. Enseguida se muestran algunos datos reales:

Proteína (ug): 0,00 9,36 18,72 28,08 37,44

Señal: 0,466 0,676 0,883 1,086 1,280

Una muestra problema deproteina tuvo una señal de 0,973. Calcule la cantidad de proteina en mg
presente en la muestra problema
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Ejercicio 2

Se determina Litio por emisión atómica. El patrón de litio contiene 1,50 ug/mL

Problema (mL) Patron (mL) V. Final (mL) Señal

10 0 100 309
10 5,0 100 452
10 10,0 100 600
10 15,0 100 765
10 20,0 100 906

A partir de los datos de la tabla, calcule la concentracion de Li en ppm en el problema (se obtiene a
partir de 1,33g de muestra el cual se disuelve cuantitativamente a una fiola de 500 mL, de ella se diluye
5 mL en una fiola de 50 mL.
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Ejemplo 3
Tras las diluciones adecuadas de una disolución estándar de hierro de 50 ppm, el complejo
coloreado de hierro(II)/1,10-fenantrolina se desarrolló en fiolas de 25 mL.
Vs (mL) S
1,0 0,164
2,5 0,424
4,0 0,627
6,0 0,958
8,0 1,259
10,0 1,585
El método desarrollado se aplicó a la determinación rutinaria de hierro en tabletas de complemento
vitamínico. Colocamos una tableta en un erlenmeyer de 150 mL y adicionamos 20 mL de HCl 6M,
llevamos a ebullición por 5 minutos y filtramos. Al enfriar transferimos cuantitativamente a una fiola de
50 mL enrasando con agua destilada. Tomamos 2 mL de la solución y formamos el complejo coloreado
en una fiola de 25 mL. La señal de la muestra fue de 0,721. Determine la concentración (en mg de
Fe/tableta) de la muestra.
LICENCIADA POR