PRACTICA 1: SEPARACIÓN EN CAPA FINA DE UNA MEZCLA DE

AMINOÁCIDOS

INFORME DE LABORATORIO 1

PARTICIPANTES:

- Christian Fernando Tuni Huanca

- Abel Arnold Neyra Torres

GRUPO: A3 VIERNES DE 5:40 – 7:20

DOCENTE: ING. MARCIA JUANA QUEQUEZANA BEDREGAL

CUESTIONARIO:

1. Indique en que caso de la vida diaria, se observa un ascenso líquido eluyente

sobre una superficie sólida, y cuál es la explicación fisicoquímica de tal
fenómeno.

El análisis de drogas y fármacos en fluidos biológicos como la saliva, la sangre, la

orina;
Seguir la transformación de las sustancias responsables de la transmisión
neurológica;
Determinar la presencia de contaminantes en el medio ambiente;
Descifrar la composición de los combustibles fósiles; Realizar el control de calidad
de los productos químicos y farmacéuticos manufacturados, etcétera

EXPLICACIÓN FISICOQUIMICA
 La clave de la separación en cromatografía es que la velocidad con la que se mueve
cada sustancia depende de su afinidad relativa por ambas fases
En general, los componentes más afines a la fase estacionaria avanzan lentamente
(más retenidos) mientras que los más afines a la fase móvil (menos retenidos) se
mueven con mayor rapidez. Por consecuencia, el medio cromatográfico (columna,
placa o papel) funciona como un controlador de la velocidad de cada sustancia que
constituye la mezcla, logrando así su separación y mediante el uso de un detector,
su caracterización química

2. Explique, qué significa el termino eluyente, y si este puede ser sólido, líquido o
gaseoso, para hacer cromatografía de aminoácidos de una muestra de
proteínas.

Es un disolvente utilizado en técnicas de cromatografía para extraer un componente

que se quiere separar de otra fase. Al ser una fase móvil y no estacionaria solo
puede actuar como un disolvente líquido y gaseoso y arrastrar las sustancias a
través de la fase fija
3. Qué es la cromatografía de exclusión molecular y cuáles son sus aplicaciones.
Cuales son similitudes y diferencias con la de capa fina.

La cromatografía de exclusión es un tipo de cromatografía líquida en la cual la

fase estacionaria es sólida y la fase móvil es líquida. Se utiliza el término de
“Cromatografía de exclusión por tamaño” y “cromatografía de permeabilidad
sobre gel” (GPC) o de permeación en gel.

Su principal aplicación es la separación de las moléculas en función de su tamaño

con la finalidad de estudiar el peso molecular y distribución de los polímeros.

El inicio de esta técnica se estableció a partir de la preparación de microesferas de

geles de compuestos orgánicos y biológicos solubles en agua, los cuales se
aplicaron a la separación de polímeros disueltos en disolventes orgánicos
utilizando un relleno de poliestireno. En consecuencia, la técnica se denominó
permeabilidad en gel. Actualmente esta tecnología es rápida y permite trabajar a
presiones elevadas mediante el empleo de nuevos rellenos con una distribución de
poros muy precisa y una resistencia mecánica apropiada para altas presiones. Las
principales características de esta técnica cromatográfica son:

‐ Fase estacionaria es inerte, por lo que la columna no se desactiva.

‐ La muestra no interacciona químicamente con la fase estacionaria, ni con la fase
móvil.
‐ Los solutos son generalmente sustancias de peso molecular elevado (mayores de
2000). Dependiendo de su medida y estructura, éstos se retienen o se eluyen a
través de la columna.

La diferencia entre ambas es que en el caso de la cromatografía de exclusión

molecular no existen interacciones por atracción entre la fase estacionaria y el
soluto. La fase móvil líquida o gaseosa pasa a través de un gel poroso. Los
poros son suficientemente pequeños para excluir las moléculas grandes de
soluto, pero no las pequeñas. Las moléculas pequeñas requieren más tiempo
para pasar a través de la columna porque entran en el gel y por tanto
deben fluir a través de un volumen más grande antes de dejar la columna

4. Qué es la cromatografía de intercambio iónico y cuáles son sus aplicaciones.

Cuáles son sus similitudes y diferencias con la de capa fina

Esta cromatografía está basada en las interacciones electrostáticas que se

producen entre los grupos ionizables de los productos a separar y los grupos
cargados unidos a un soporte inerte (fase estacionaria). Existen dos clases
principales de soportes (cambiadores), según el tipo de grupos enlazados que
posea:
• Catiónicos: con grupos cargados negativamente y que intercambian iones del
medio con carga positiva.
• Aniónicos: con grupos positivos y que intercambian iones negativos.
 Este tipo de cromatografía se usa para la separación de aminoácidos, péptidos,
proteínas, nucleótidos y, en general, para los compuestos que tengan naturaleza
iónica. En clínica, se utilizan para la separación de hemoglobinas, isoenzimas,
esteroides, etc.

La ventaja principal de la capa fina es que se analizan simultáneamente la muestra

y el patrón y que los componentes no se pierden en los vapores que rodean la
placa, todos estarán en algún lugar de la misma. En cuanto al intercambio iónico
va a depender de la adsorción reversible de moléculas de soluto cargadas, a
una resina con grupos iónicos de carga opuesta, y su mecanismo de separación se
basa en un equilibrio de intercambio iónico

BIBLIOGRAFIA

- Isaac Túnez Fiñana, María del Carmen, Cromatografía en capa fina de lípidos,
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de Medicina,
Universidad de Córdoba, Avda. Menéndez Pidal s/n, 14004-Córdoba.

https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/12%20CROMATOGRAFIA
%20DE%20CAPA%20FINA%20DE%20LIPIDOS.pdf

http://blog.utp.edu.co/docenciaedwin/files/2014/09/TIPOS-CROMATOGRAF
%C3%8DA.pdf

- Cromatografía líquida de adsorción en columna (cc) y capa fina (tlc)

Fundamentos de química
- https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/curso0405/practic
a10.pdf