TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE ACAPULCO

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS

FILTRACIÓN POR MEMBRANA

GRUPO B
ALUMNO: EDGAR JORDI CLAUDIO RAMIREZ
NO. CONTROL: 16320349
NO. EQUIPO: 1

DOCENTE:
M.C. MIGUEL ANGEL DÍAZ ALDAY

ACAPULCO, GRO. A 30 DE SEPTIEMBRE DEL 2019

Contenido
INTRODUCCIÓN ..........................................................................................................................................................3
FUNDAMENTO ............................................................................................................................................................3
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .........................................................................................................................4
JUSTIFICACIÓN...........................................................................................................................................................4
OBJETIVOS ...................................................................................................................................................................4
GENERAL .................................................................................................................................................................4
ESPECÍFICOS ..........................................................................................................................................................4
MATERIALES Y MÉTODOS .........................................................................................................................................5
MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS.............................................................................................................................5
MÉTODOLOGÍA ...........................................................................................................................................................5
REFERENCIAS .............................................................................................................................................................6
 INTRODUCCIÓN

El agua es un factor importante en la producción de los medicamentos, por lo tanto, su calidad, es

de suma importancia ya que es la materia prima más usada y además está presente en otros
procesos relacionados con dicha producción, como por ejemplo en los de limpieza y sanitización.
Es por ello que el agua puede considerarse una fuente potencial de contaminación bacteriana de
los medicamentos.
En la industria farmacéutica se conocen cinco tipos de agua: agua potable, agua suavizada, agua
desionizada, agua destilada y agua producida por ósmosis reversa. La calidad microbiológica de
cualquier tipo, dependerá del contenido microbiano del agua utilizada como materia prima, de los
métodos de tratamientos a los que es sometida, y de los sistemas empleados para su
almacenamiento y distribución.
La filtración por membrana es el mecanismo mediante el cual se atrapan en la superficie de la
membrana microorganismos cuyo tamaño es mayor que el tamaño del poro 0.45 m, esto gracias
a que una bomba eléctrica ejerce una presión diferencial sobre la muestra de agua haciendo que se
filtre. Los contaminantes de tamaño menor que el específico del poro atraviesan la membrana o se
quedan retenidos en su interior, las bacterias quedan en la superficie de la membrana y luego está
es llevada a un medio de enriquecimiento selectivo, en el IDEAM se utiliza el medio de cultivo
Chromocult el cual promueve el crecimiento y la identificación.
Se basa en el crecimiento, la identificación y el recuento de las colonias de los microorganismos
retenidos en la superficie de un filtro, a través del cual se ha filtrado un volumen conocido de
muestra de agua. Incubada en un medio de cultivo durante un tiempo y a una temperatura
adecuadas. Este método se ha convertido en el método más común y preferido para evaluar las
características microbiológicas del agua.
El número de coliformes totales presentes en el agua se determina mediante la filtración de
volúmenes específicos de la muestra a través de filtros de membrana. Por lo general, están
compuestos de ésteres de celulosa, típicamente con poros de 0,45 mm de diámetro que retienen
los coliformes totales y otras clases de bacterias presentes en la muestra. Después se incuban las
membranas vueltas hacia arriba en un medio selectivo. En la práctica, la técnica de filtración de
membrana ofrece resultados comparables a los que se obtienen con el método de tubos múltiples.
La esencia de este método consiste en pasar una muestra de agua a través de un filtro de membrana
(0,45 µ tamaño de poro y 47 mm de diámetro). Posteriormente transferir el filtro con las bacterias
atrapadas a la superficie de un medio sólido (con agar) o a un soporte absorbente, conteniendo el
medio líquido deseado (sin agar). Al hacer esto, el uso del medio apropiado permite la detección
rápida de los coliformes totales (CT) y coliformes fecales (CF).
Fundamento
Este método se fundamenta en determinar el número y tipo de microorganismos presentes en una
muestra de agua de proceso, por medio de la filtración de la misma a través de una membrana
filtrante con poros de tamaño adecuado (0,45 μm de diámetro), la consiguiente retención de los

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microorganismos sobre dicha membrana y el cultivo de los mismos en diferentes agares de acuerdo
al tipo de microorganismo.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El análisis de aguas es un factor muy importante para garantizar la calidad microbiológica del
agua, es necesario realizar el control de la misma, utilizando diferentes métodos, que nos permitan
realizar la numeración o el recuento de bacterias aerobias mesófilas, mohos y levaduras, coliformes
o la investigación de microorganismos patógenos.

JUSTIFICACIÓN

El método de filtración por membrana permite determinar mediante la filtración de volúmenes

específicos de la muestra a través de filtros de membrana. Por lo general, están compuestos de
ésteres de celulosa, típicamente con poros de 0,45 mm de diámetro que retienen los coliformes
totales y otras clases de bacterias presentes en la muestra. Una de las ventajas del método de
filtración a través de membrana es la prontitud con que pueden obtenerse los resultados y, en
consecuencia, se pueden llevar a cabo rápidamente acciones correctivas y operar en la planta de
agua de nuevo en forma normal. Esta técnica puede aplicarse en el análisis de casi todos los tipos
de agua, también se utiliza en el análisis de leche y otros alimentos líquidos.

OBJETIVOS
GENERAL

• Determinar el número y el tipo de microorganismos presentes en muestras de agua por el

método de membrana filtrante (filtración por membrana).

ESPECÍFICOS

• Obtener muestra de agua de playa de Tlacopanocha en el municipio de Acapulco de

Juárez, Guerrero.
• Colocar la membrana evitando la formación de burbujas entre ésta y el medio de cultivo.

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 MATERIALES Y MÉTODOS

Materiales, Equipo y Reactivos

• Muestra de agua de proceso

• Agua peptonada al 0,1 %
• Placas estériles con medio ENDO
• Placas estériles con agar Sabouraud
• Placas estériles con agar Cetrimide
• Placas estériles con agar MacConkey
• Placas estériles con agar para Recuento en Placa (Agar Standard Methods)
• Equipo de filtración (Millipore)
• Membranas filtrantes estériles
• Bomba de vacío
• Pinzas estériles
• Estufa
• Autoclave
• Incubadora

Métodología

1. Colocar una membrana filtrante estéril, bajo condiciones asépticas, sobre el centro
del portafitro, usando pinzas estériles, con la superficie cuadriculada hacia arriba.
2. Ensamblar el equipo, colocando el dispositivo de filtración y asegurando con una
pinza.
3. Verter 100 mL de la muestra de agua, en el portafiltro y proceder a filtrar.
4. Lavar el embudo con aproximadamente 100 mL de agua peptonada al 0,1%.
5. Remover la parte superior del portafiltro, y con una pinza estéril transferir la
membrana a la placa de Petri que contiene el medio de cultivo correspondiente al
microorganismo que se va a identificar: Coliformes en agar endo, bacterias
aerobias mesófilas en agar para recuento en placas, mohos y levaduras en agar
Sabouraud y Pseudomonas aeruginosa en agar cetrimide.
6. Al colocar la membrana, evitar la formación de burbujas entre ésta y el medio de
cultivo.
7. Esperar aproximadamente 20 minutos, para permitir la adhesión de la membrana
al medio.
8. Con excepción de las placas de agar Sabouraud, incubar las placas en forma
invertida, a las diferentes temperaturas y tiempos, de acuerdo al microorganismo
investigado:

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 1. Coliformes: Agar ENDO Incubación 35ºC ± 2ºC x 24-48 h
2. Mohos y Levaduras: Agar Sabouraud Incubación 25ºC ± 2ºC x 5-7 días
3. Bacterias aerobias Agar Recuento Incubación 35ºC ± 2ºC x 24-48 h
mesófilas en Placas
4. Pseudomonas aeruginosa Agar cetrimide Incubación 35ºC ± 2ºC x 24-48
h

REFERENCIAS

1. Frazier, W.C., Westhoff, D.C., (1993). Microbiología de los alimentos, Zaragoza, España:
Editorial Acribia, S.A., cuarta edición.

2. Gutiérrez Romero et al., (2017). Manual de Laboratorio de Microbiología General I.

UNAM, Facultad de estudios superiores Zaragoza, Química Farmacéutica Biológica.

3. Madigan, M. T., Martinko, J.M. y Parker, J., (1999). Brock Biología de los
microorganismos, Madrid, España: Editorial Pearson-Prentice-Hall, octava edición.

4. Método de la membrana filtrante: https://n9.cl/knnw

5. Método de filtración por membrana: https://cutt.ly/qw5dVGX

6. Filtración a través de membrana: https://cutt.ly/yw5dBoq

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