CATEDRA: MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS CARRERA: CTA Determinación de coliformes por filtración de membranas. Integrantes: Alejandra Arias - Paula Emery JTPA: Lic. Lourdes Liz Santa Cruz – Lic. Karina Medina Introducción Los coliformes totales son las Enterobacteriaceae lactosa-positivas, bacilos gramnegativos, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados. Del grupo coliforme forman parte varios géneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter, etc. Se encuentran en el intestino del hombre y de los animales, pero también en otros ambientes: agua, suelo, plantas, cáscara de huevo, etc. Los Coliformes Fecales son un subgrupo de los Coliformes totales, capaces de fermentar la lactosa a 44º C en vez de 37 ºC como lo hacen los totales. Los filtros de membrana son filtros de superficie, que muestran una estructura microporosa precisa. Durante la filtración las partículas mayores que los poros de la membrana son retenidas de forma fiable en la superficie de la misma. Las partículas más pequeñas pueden pasar el filtro, no todas las formas vivas son retenidas, bacterias de micronaje menores a 0,2 micras y ultravirus pasan atraves de los virus bacterianos. Objetivos Objetivo general: ◦ Investigar la presencia de microrganismos coliformes utilizando la técnica de filtración por membrana. Objetivos específicos: ◦ Conocer los fundamentos del método de filtración por membrana ◦ Realizar correctamente dicho método ◦ Interpretar los resultados obtenidos Metodología de trabajo
◦ Muestra: Cerveza en lata
◦ Transporte de la muestra: a temperatura ambiente, no fue necesario refrigerar la muestra pues la misma era un producto en lata. ◦ Toma de la muesta: de manera aleatoria de un supermercado. Procedimiento 1. Desinfectar el área de trabajo 2. Montaje del equipo
Componentes: -Bomba de vacío -Vaso colector -Conexión de goma -Porta filtro
Observación: debe trabajarse
cerca de un mechero encendido. 3. Retirar la cobertura de la membrana 4. Colocar la membrana sobre el porta filtro 5. Filtrar 100 mL de la muestra 6. Retirar la membrana 7. Colocar la membrana sobre la placa conteniendo el medio de cultivo EMB 8. Incubacion a 45ºC para coliformes fecales y a 35ºC para coliformes totales durante 48 horas. Resultados Nombre del Límite máximo Resultado microrganismo
Coliformes fecales º ≤ 1ufc/100mL 0 ufc/100mL
Coliformes totales ∗≤ 1ufc/100mL 0 ufc/100mL
* Requisitos microbiológicos de la cerveza. Norma técnica obligatoria
nicaragüense. º Norma española microbiológica de los alimentos y asimilados Conclusión Mediante la aplicación del método de filtración por membranas se investigó la presencia de coliformes totales y fecales en una muestra de cerveza. Al comparar con las normas microbiológicas se concluye que la bebida se encuentra apta para el consumo, ya que la misma cumple con los requisitos microbiológicos establecidos por las normas consultadas. Bibliografía 1-Norma española de alimentos y asimilados. País: España. Consultado: 10/10/18.Link: http://www.euskadi.eus/contenidos/informacion/doc_seguridad_alimentaria/e s_def/adjuntos/control-alimentos/seguridad-microbiologica/normas- microbiologicas-de-alimentos-y-asimilados-2017.pdf 2-Norma técnica obligatoria nicaragüense. País: Nicaragua. Consultado: 10/10/18. Link: http://www.puntofocal.gov.ar/notific_otros_miembros/nic69_t.pdf 3- Pascual, M.; Calderon. V. 2000. microbiología de los alimentos. Metodología analítica para alimentos y bebidas. 2º ed, Ed. Diaz de Santos. España.