Alteraciones Estructurales

Alteraciones Estructurales
 Translocaciones cromosomales

Ø  Fusión aberrante del

material genético de dos
cromosomas.

Ø  Formación de quiebres No recíproca

en la doble hebra
(DSBs)

Ø  Regiones de quiebre
cromosomales (BCRs)

Recíproca
Translocaciones cromosómicas marcan distintos
tipos de cáncer
 Translocaciones No Reciprocas

•  La transferencia de material genético ocurre en una sola dirección.

•  Uno de los cromosomas pierde parte de su material genético
•  El otro cromosoma gana material genético
 Translocaciones reciprocas

•  Involucran solo un intercambio físico de material genético

•  No hay ganancias ni perdidas del mismo
•  Se mantiene la cantidad neta de ADN
•  También se denominan translocaciones balanceadas
 Translocaciones Recíproca
A nivel cromosomal, observaremos el siguiente rearreglo

Cromosomas químericos o
derivativos
 Translocaciones no balanceadas

Involucran la ganancia o perdida del contenido de ADN total

Translocación
balanceada
 Translocaciones Recíproca
A nivel cromosomal, observaremos el siguiente rearreglo
 Translocación 8;21
RUNX1 ETO
•  8q
•  21q
•  150 Kb : 13 exones
•  260 Kb : 9 exones

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1a 1b 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Gen quimérico AML1/ETO

1 2 3 4 1a5 1b 62 3 4 57 6 78 89 9 10 11 12

ARNm AML1/ETO o Transcrito de fusión AML1/ETO

1 2 3 4 5 1b 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Proteína quimérica o de fusión AML1/ETO

Modificado de Zhang y col. (2002)

 Translocaciones Cromosómicas

t(21;8)

1 2 3 4 5 1b 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
21

t(8;21)

8
1 2 3 4 1a5 1b 62 3 4 57 6 78 89 9 10 11 12

Qué se necesita para generar una translocación cromosómica?

•  Quiebres en la doble hebra de ADN

•  Mecanismo de reparación anómala

Cuales son las causas de los quiebres de la doble hebra?
Causas Patológicas
Causas fisiológicas

1.  Recombinación V(D)J mediada 1.  ROS

por las RAGs 2.  Radiación ionizante
3.  Fallas de Topoisomerasa
2.  Quiebres CSR mediados por 4.  Nicks en la horquilla de
AID replicación
5.  Stress mecánico
6.  otros
 Recombinación V(d)J

Variable Diversa Unión

Nonámero:
•  motivo de unión a RAG1
Heptámero:
•  Potencia la unión de RAG recombinasa.
•  Determina el sitio de clivaje

7 pb 9 pb
 RAGs Complex

RAG1: RAG2:
Interacción con DNA y RAG2 Clivaje
Etápas de la recombinación V(D)J

RSS: Secuencia señal de Reconocimiento

Las RAGs se unen a las RSS (12 Y 23)

El reconocimiento de la segunda RSS se denomina

Sinapsis

Se establece una interacción entre los complejos

RAG-RSS12 y RAG-RSS23

Formación de una horquilla

Clivaje de las hechas de ADN en las regiones RSS

Unión de los extremos de ADN mediante NHEJ

Clivaje de ADN mediado por RAGs
 Resección del ADN previo a NHEJ.

1.- Quiebre en la Doble hebra

2.-Digestión por nucleasas

 Resección del ADN previo a NHEJ.

3.-Pérdida de Nucleótidos
 Resección del ADN previo a NHEJ.

En resumen:
 Translocaciones Cromosómicas

t(21;8)

1 2 3 4 5 1b 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
21

t(8;21)

8
1 2 3 4 1a5 1b 62 3 4 57 6 78 89 9 10 11 12

Qué se necesita para generar una translocación cromosómica?

•  Quiebres en la doble hebra de ADN

•  Mecanismo de reparación anómala Puede ser: HR y NHEJ

Reparación del ADN de tipo No Homologo (NHEJ)

Una vez que se produce el DSB, existe perdida

espontánea de nucleótidos

Ku Complex: Ku80 y Ku70

Reparación del ADN de tipo No Homologo (NHEJ)
Reparación del ADN de tipo No Homologo (NHEJ)
Reparación del ADN de tipo Homologo (HR)
Reparación del ADN de tipo Homologo (HR)
NHEJ vs HR
Como se puede evidenciar una translocación cromosómica?
 FISH
Utiliza sondas de ADN que pueden reconocer distintos blancos: un gen,
cromosoma
Diferenciar entre sonda y fluoróforo
FISH para la detección de translocaciones cromosómicas

•  Se utilizan dos sondas con distintos fluoróforos dirigidas contra los

genes a estudiar (Ej BCR y ABL)

•  La superposición de colores permite establecer si los genes

translocaron
 FISH Multicolor

•  Utiliza distintas sondas para reconocer los cromosomas

•  Fluoroforos distintos