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UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

PROGRAMA DE INGENIERIA
AMBIENTAL Y SANITARIA
BIOLOGIA II

CARBOHIDRATOS.

OBJETIVOS:
• Identificar por métodos colorimétricos y cualitativos los
principales monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
• Identificar azucares reductores y no reductores

CONOCIMIENTOS PRE VIOS


Identifique las clases de carbohidratos que se encuentran en las vías metabolicas
Glicolisis, ciclo de Krebs y Glucogenesis.

MATERIAL QUE DEBE TRAER EL ESTUDIANTE

• Fosfóros
• Azucar(una cucharada)
• Hielo (termo pequeño)
• Laminas portaobjetos
• Pipetas de pasteur

I. FUNDAMENTO TEORICO.

La palabra carbohidrato proviene de que la formula molecular de estos compuestos


puede expresarse como hidratos de carbono. Definiendo los carbohidratos con mayor
presición en términos de su estructura orgánica, son polihidroxialdehidos,
polihidroxicetonas o sustancias que, por hidrólisis forman dichos productos. La química de
los carbohidratos es, principalmente, la combinación de la química de dos grupos
funcionales: el grupo hidroxilo y el grupo carbonilo. Los carbohidratos están distribuidos
ampliamente en vegetales y animales en los cuales tiene participación estructural, funcional
y metabólica.
En general los carbohidratos se clasifican, de acuerdo con su estructura, en monosacáridos,
oligosacaridos y polisacáridos.

Los monosacáridos se clasifican de acuerdo con el número de átomos de carbono presente


en (triosas, tertrosas, pentosas, hexosas, etc.) y depende también de que el grupo carbonilo
presente se halle como un aldehído (aldosas) o como una cetona (cetosas).5 Los
carbohidratos que no pueden hidrolizarse se llaman monosacáridos o azucares simples. Su
formula empírica es (CH2O)n.
En el grupo de los monosacáridos, quizás los más importantes son los que poseen
seis átomos de carbono en su molécula. Existen dieciséis aldohexosas (monosacáridos de
seis carbonos y un grupo funcional aldehído) sin embargo, las de mayor importancia son la
D-Glucosa, D-Galactosa y D-Manosa. Dentro de las cetohexosas (con seis carbonos y
grupo funcional cetona), el más importante es la D-Fructosa o Levulosa.
Los polisacáridos contienen muchos monosacáridos unidos entre si y varian en la
longitud de la cadena y peso molecular. La hidrólisis completa de la mayoria de los
polisacaridos producen monosacáridos.
Los polisacáridos son abundantes y representan para el hombre la principal fuente
de energía metabólica de fácil aprovechamiento, el almidón (un producto vegetal),
constituido por solo moléculas de glucosa la base alimenticia del globo terrestre,
especialmente en la población de bajos recursos. El glucógeno (producto animal) y la
celulosa (fibra vegetal).
II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS

• Tubos de ensayo • Agitador de


• Molish tubos de ensayo
• Gradilla • Barfoed
• Bial • Campana de
• Espátula • Seliwanoff extracción.
• Lugol
• Propipeta • Baño de maría
• Benedict
• Pipetas graduadas de 1, • Fenilhidrazina • Microscopio o
5 y 10 ml Lupa
• Glucosa
• Pisetas
• Galactosa
• Pinzas para tubos de
ensayo • Maltosa

• Lactosa

• Almidón

• Resorcina
III. PARTE EXPERIMENTAL

PRUEBA PROCEDIMIENTO VOLUMEN


En un tubo de ensayo por separado
colocar:
Sustancia problema:
MOLISH. Glucosa 1%
Identificación de Galactosa 1% 1 ml
Carbohidratos Maltosa 1%
Lactosa 1%
α- Naftol 2 gotas c/tubo
Agitar. Luego cuidadosamente dejar caer
por las paredes del tubo Acido sulfúrico
concentrado. La formación de un anillo 0,5 ml
color violeta en la interfase indica la
presencia de carbohidratos (Ver Figura Nº
34.3)
Sustancia problema:
BARFOED Glucosa 1%
Identificación de Galactosa 1% 1 ml
monosacáridos Maltosa 1%
Lactosa 1%
Reactivo de Barfoed 2,5 ml
Mezclar y calentar en baño hirviente,
contando los minutos y sacar del baño cada
tubo inmediatamente después que haya
aparecido el precipitado rojo ladrillo de
oxido cuprico. Anotar el tiempo que
corresponde a cada carbohidrato. La
aparición de un precipitado antes de los 6
minutos indica la presencia de un
monosacárido, un escaso precipitado rojo a
los 9 y 12 minutos indica la presencia de
Lactosa o Maltosa.
Sustancia problema:
BIAL Arabinosa 1%
Identificación de Galactosa 1% 1 ml
pentosas Maltosa 1%
Lactosa 1%
Reactivo de Bial 1,5 ml
Llevar a baño hirviente durante 3 minutos.
La aparición de un color verde azuloso y
totalmente transparente, indica la presencia
de una Pentosa.
CONTINUACION

PRUEBA PROCEDIMIENTO: VOLUMEN


En un tubo de ensayo por separado
colocar:
SELIWANOFF Sustancia problema:
Identificación de Cetosas o Sacarosa 1%
azucares no reductores Glucosa 1% 1 ml
Maltosa 1%
Fructosa 1%
Reactivo de Seliwanoff 2 ml
Llevar a baño de maría a 90ºC durante
10 min. La aparición de un color rojo
cereza, indica la presencia de un
azúcar no reductor (Ver figura Nº
35.3)
LUGOL Sustancia problema:
Identificación de Almidón 1%
polisacáridos Galactosa 1% 2 ml
Maltosa 1%
Lactosa 1%

Reactivo de Lugol 1 gota

Mezclar y observar. La aparición de


una coloración azul indica la presencia
del almidón y una coloración roja,
indica el Glucógeno, si el color no
cambia el carbohidrato es un Mono o
Disacárido (Ver figura Nº 36.3)

Sustancia problema
BENEDICT Glucosa 1%
Identificación de Azúcar Galactosa 1% 0,5 ml
Reductor. Maltosa 1%
Lactosa 1%

Reactivo de Benediet 2 ml

Llevar a baño de maría a 90ºC durante


5 min. La aparición de un precipitado,
verde, amarillo o rojo indica la
presencia de un azúcar reductor.
CONTINUACION

PRUEBA PROCEDIMIENTO VOLUMEN


En un tubo de ensayo por separado
colocar:
Sustancia problema
FENILHIDRAZINA Glucosa 1%
Identificación de Osazonas. Galactosa 1% 2 ml
Maltosa 1%
Lactosa 1%

Reactivo de Fenilhidrazina 0,5 ml

Mezclar bien. Colocar los tubos en baño


de maría hirviente durante10 min. Al
final del periodo enfríe los tubos con
agua de chorro. Dejar en reposo durante
5 min. Luego observar al microscopio
las osazonas, colocando una gota en el
portaobjeto y cubrir con el cubreobjeto
evitando dañar los cristales con
movimientos bruscos o exceso de
muestra. (Ver figura Nº 37.3)
IV. MARCHA ANALITICA

SUSTANCIA DESCONOCIDA

P. MOLISH

(+) ANILLO ROJO O


(-) INCOLORA VIOLETA
No es carbohidrato Carbohidrato
P.BARFOED

(+) P.P ROJO antes de 6 min. (+) P.P ROJO de 9 a 12


Monosacárido min. Di o Polisacárido

P.BIAL

(+) ROJO O
(-) OTRO COLOR AMARILLO OSCURO
HEXOSA GLUCOGENO

(+) VERDE
P.SELIWANOFF

PENTOSA (+) AZUL


ALMIDON
(+) ROJO
FRUCTOSA

(-) AMARILLO
(-) INCOLORO O Disacárido
LEVE COLORACION
P.BENEDICT
GLUCOSA O
GALACTOSA
P. FENILHIDRAZINA

(+) CRISTALES EN (+) P.P ROJO (-) NO CAMBIA


FORMA DE Reductor No es Reductor
ESTRELLA SACAROSA
(Galactosazona)
GALACTOSA
P.FENILHIDRAZINA

(+) CRISTALES EN
FORMA DE PALMA (+) CRISTALES EN
(+) CRISTALES EN
(Glucosazona) FORMA DE NIDO FORMA DE FLOR
GLUCOSA (Lactosazona) (Maltosazona)
LACTOSA MALTOSA

Figura Nº 2.5. Marcha analítica para identificar carbohidratos


Glucosazona Glucosazona
(Agujas o plumas) (Agujas o plumas)
(Cristales en forma de palma)
(Cristales en forma de palma)

Lactosazona. Cristales en
Arabinosazona. Agujas forma de nido .(Agujas finas
agrupadas en bolas no agrupadas en bolas muy
muy densas densas)

Maltosazona Xilosazonas
(Agujas aplanadas) (Agujas largas y finas) (Cristales en
forma de flor)

Figura Nº 2.4. Apariencia cristalina de las osazonas vistas al microscopio

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