PRÁCTICA 11.

Identificación de carbohidratos II.

1.- INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son las moléculas orgánicas más abundantes de la naturaleza.
Tienen una gran variedad de funciones, entre ellas la provisión de una fracción
significativa de la energía en la dieta de la mayoría de los organismos, actúan como
una forma de almacenamiento de energía en el cuerpo y actúan como componentes
de la membrana celular que median algunas formas de comunicación intercelular.

2.-OBJETIVOS

2.1. El alumno aprenderá a identificar a los carbohidratos de acuerdo a las propiedades

químicas que presentan en las reacciones de : prueba de antrona, prueba de
Fehling, prueba de Benedict.

3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN

Prueba de antrona: La antrona determina la presencia de carbohidratos presenetes
en las muestra, cuando el anillo furfural se combina con la antrona da un color verde-
azulado.
Prueba de Fehling: El grupo aldehído libre de los azúcares que los contengan , reduce
al ión cobre del CuSO4 (CU++) á oxido de cobre (Cu+) de color naranja y/o rojo ladrillo.
Prueba de Benedict: Detectar grupos aldehídos libres en monosacáridos y algunos
disacáridos por una reacción REDOX. Un color rojo o naranja indica abundancia de
azucares reductores. El cambio a verde es indicativo de una cantidad mínima de
azúcares reductores.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

4.1 REACTIVOS

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONC. CANTIDAD

1 Reactivo de antrona 10ml
2 Solución de xilosa 1% 50ml.
3 Solución de arabinosa 1% 50ml
4 Solución de glucosa 1% 50ml
5 Solución de fructosa 1% 50ml
 6 Reactivo A de Fehling 10ml
7 Reactivo B de Fehling 10ml
8 Solución de almidón 2% 10ml
9 Solución de sacarosa 2% 10ml
10 Solución de maltosa 2% 10ml
11 Reactivo de Benedict 20ml
12 Solución de glucosa 0.3% 10ml
13 Solución de glucosa 1% 10ml
14 Solución de glucosa 1.5% 10ml

4.2 MATERIAL

NUM. NOMBRE DEL MATERIAL CANTIDAD

1 Tubos de ensaye de 13x 100mm 16
2 Pipeta de 5ml graduada 6
3 Gradilla 1
5 Vaso de precipitados de 250ml 1
6 Pinzas para tubo 1

4.3 EQUIPO

NUM. NOMBRE DEL EQUIPO

1 Parrilla

5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1. Desarrollo de la Técnica.
5.1.1 Prueba de antrona: Rotular 4 tubos de ensaye de 13x100mm de la siguiente
manera: glucosa al 1%, fructosa al 1%, xilosa al 1%, arabinosa al 1%. Agregar
a cada tubo 2ml del reactivo de antrona.
5.1.2 Adicionar a cada tubo 5 gotas de la solución de carbohidratos correspondiente.
Anotar Sus observaciones.
5.1.3. Prueba de Fehling: Rotular 5 tubos de ensaye de 13 x 100mm con el nombre
del carbohidrato a probar (glucosa al 2%, arabinosa al 2%, sacarosa al 2%,
fructosa al 2%, maltosa al 2% y almidón al 2%) y el nombre de la prueba Fehling.
5.1.4. A cada tubo agregar 1 m del reactivo A Y 1ml del reactivo B de Fehling, adicionar
0.5ml de la solución de carbohidrato correspondiente.
5.1.5. Poner los tubos a baño maría hirviente por 3 minutos. Observar el cambio de
color.
5.1.6. Prueba de Benedict: Rotular 6 tubos de ensaye de 13 x 100mm con el nombre
de la prueba y el carbohidrato (almidón, sacarosa, glucosa al 0.3%, glucosa al
1%, glucosa al 1.5%, glucosa al 2%). Agregar 1ml del reactivo de Benedict y
0.5ml de la solución del carbohidrato. Calentar los tubos en baño maría de agua
hirviente, anotar sus observaciones.

5.2. REPORTE DE RESULTADOS

5.2.1. Cálculo de resultados.

No se realizan cálculos.

5.2.2. Reporte de resultados.

Se reporta el nombre de la reacción, el carbohidrato en estudio, el color de la

reacción, el resultado y la interpretación.

PRUEBA DE ANTRONA

El objetivo de esta prueba es identificar la presencia de carbohidratos.

Los reactivos que ocupamos en esta prueba son: fructosa, xilosa y
glucosa
Los 3 reactivos dieron positivos debido a que son carbohidratos,
además que al mezclarlos con el reactivo de antrona tuvo una reacción
exotérmica.
PRUEBA DE FEHLING

El objetivo de esta prueba es identificar

azúcares reductores, si dan positivos su
coloración será de color rojo y morado.
Los reactivos son: glucosa, sacarosa,
fructosa, maltosa y almidón.
Los resultados positivos fueron: la maltosa de
color rojo ladrillo, glucosa y fructosa su color
fue morado.
Los resultados negativos fueron la sacarosa y
almidón, debido a que no tienen azucares
reductores en su composición.
 PRUEBA DE BENEDICT

El objetivo de esta practica es identificar azucares

reductores, pero en este caso con el reactivo de
benedict.

Los carbohidratos que ocupamos son: almidón,

sacarosa y glucosa (en diferentes concentraciones,
0.3, 1.5 y 2%)

Los resultados positivos fue la glucosa en diferentes

concentraciones, dando como color naranja, el 0.3%
fue un color naranja claro, el 1.5% un naranja más
fuerte y por ultimo el 2% fue el más naranja más
intenso.

Los resultados negativos fueron el almidón y la

sacarosa debido a que no tienen azúcares
reductores en su composición, dando como colores
azul turquesa y verde.
CONCLUSIÒN:

PRUEBA DE ANTRONA identifica la presencia de carbohidratos, si cambia de color a negro con un fondo
amarillo, significa que estamos en presencia de un carbohidrato; además que tendrá una reacción exotérmica;
si no cambia, el resultado es negativo.
PRUEBA FEHLING esta prueba nos permite identificar azucares reductores en los carbohidratos, con ayuda
del reactivo de Fehling para ver sus resultados. (recordado que los azucares reductores se identifican porque
en el carbono anomérico el grupo OH es libre)
PRUEBA DE BENEDICT esta prueba también nos permite identificar azúcares reductores, pero en este caso
nosotros ocupamos el reactivo de benedict en los carbohidratos.

Como pudimos observar estas pruebas nos sirven para identificar carbohidratos y para ver si tienen azucares
reductores en su composición, esto nos permite tener 2 opciones ala hora de identificar azucares reductores.
Por la prueba de Fehling y la de benedict.
6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA.
Utilizar las soluciones en la concentración indicada.
Calibrar correctamente la balanza analítica para evitar errores en la pesada.

7.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)

Utilizar los tubos de ensaye limpios y secos.
Pipetear correctamente los reactivos.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1. El analista debe ser un alumno de Química Clínica supervisado por el docente o
el Técnico Académico o bien un Químico Clínico, Químico Fármaco biólogo ó
Quimicobiólogo Parasitólogo con entrenamiento supervisado.
9.- BIBLIOGRAFÍA

9.1. Champe, Pamela C. Harvey, Richard A. Bioquímica. 4ª

ed. Barcelona: Wolters Kluwer/Lippincott Williams &
Wilkins, 2008.

9.2. Mathews, Christipher K.E. van Holde, Kevin g.

Ahern. Bioquímica. 3ª ed, Madrid: Pearson
Education: Addison Wesley. 2002.

9.3. Harper. Bioquímica ilustrada. 17ª ed. México, D.F.: Manual

Moderno. 2007.

9.4. Koolman, Jan, Klaus-Heinrich Röhm. Bioquímica: texto

y atlas 3ªed. Madrid, Buenos Aires: Médica
Panamericana; 2004.

9.5. Nelson, David, L. Cox, M. Michael. Lehninger,

Principles of biochemistry. 3rd . New York: Worth
Publishers. 2000.