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MÉTODO DE BIURET
Resumen
Palabras claves:
Introducción:
Las proteínas son principios inmediatos orgánicos constituidos por largas cadenas de
aminoácidos, los cuales se unen entre sí mediante en laces peptídicos. La existencia del
enlace peptídico, de aminoácidos azufrados, puede ponerse de manifiesto en el laboratorio
mediante una serie de reacciones coloreadas específicas, que sirven para la identificación
de las proteínas. (Gonzales, 2003)
La reacción de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros
compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida
(Alais, 2003).Es un reactivo muy bueno para demostrar la presencia de proteínas e incluso
cuantificarlas. La prueba da positiva en todos los componentes que tenga dos o más uniones
peptídicas, por lo cual es propia para proteínas y péptidos. La intensidad del color de la
reacción es proporcional a la cantidad de proteína en la muestra. (Vejar, E. 2005). Si su
color es (violeta) se debe a la formación de un complejo de Cu en un medio alcalino en
compuestos que poseen más de un enlace peptidico, como las proteinas (Cambell et al,
2006):
La curva de patrón es un método de química analítica empleado para medir la
concentración de una sustancia en una muestra por comparación con una serie de elementos
de concentración conocida. Se basa en la existencia de una relación en principio lineal entre
un carácter medible (por ejemplo la absorbancia en los enfoques de espectrofotometría) y la
variable a determinar (la concentración). Para ello, se efectúan diluciones de unas muestras
de contenido conocido y se produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una
función matemática que relacione ambas; después, se lee el mismo carácter en la muestra
problema y, mediante la sustitución de la variable independiente de esa función, se obtiene
la concentración de esta. Se dice pues que la respuesta de la muestra puede cuantificarse y,
empleando la curva patrón, se puede interpolar el dato de la muestra problema hasta
encontrar la concentración (Harris, 2003)
Materiales y Métodos:
Materiales: 8 tubos de ensayo, 1 gradilla para tubos, 1 pinza para tubos, 1 matraz aforado
de 100 mL , 1 matraz aforado de 25 mL, 1 Erlenmeyer de 100 mL, 1 Erlenmeyer de 250
mL, 3 vasos de precipitado de 100 mL, 1 embudo de vidrio,1 papel filtro y 1
Espectrofotómetro
Cuestionario
RTA: Sirve para calcular las concentraciones de las distintas sustancias en función de la
absorción del color. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz
monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por
dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
RTA: Son las medidas conocidas en orden ascendente que sirven de guía para ajustar una
solución problema.
3. Cuáles son las ventajas y las desventajas, de emplear los reactivos de biuret para
cuantificar proteínas explique.
RTA: Dentro de las ventajas del reactivo de Biuret es que es bastante específico para
proteínas, muestra pocas interferencias y es barato. Y la desventaja es que es poco sensible.
5. Explique si una curva patrón puede ser empleada para cuantificar sustancias diferentes a
las proteínas y cuál sería la diferencia con estas.
6. ¿Cuál es la finalidad de utilizar un tubo como blanco? Mencione si siempre se utiliza
agua como blanco.
RTA: Tomar la medida de la cual parte la curva patrón, no siempre se utiliza agua como
blanco, sino una mezcla concentrada de la sustancia con la cual se está trabajando.
(Freifelder, D. 2003)
Bibliografía
Alais, C. 2003. Ciencias de la leche. Editorial Reverté S.A. Impreso en España. Pp 25.