Biotoxinas Marinas 2014-II Mar

CURSO: TOXICOLOGIA DE
ALIMENTOS
CODIGO (QA1040)
SEMESTRE ACADÉMICO : 2014-II
semana 04
Biotoxinas marinas
Intoxicación por setas.
Q.F. OSCAR PEDRO SANTISTEBAN ROJAS
ossanroj.umnsm.chem@gmail.com
Introducción
La Marea Roja es un fenómeno natural
caracterizado por un aumento de la
concentración de ciertos organismos
componentes del plancton. Bajo ciertas
condiciones ambientales se produce un aumento
exagerado de organismos fitoplanctónicos
(especialmente dinoflagelados), lo que se conoce
como florecimiento, floraciones algales o
"bloom", causando grandes cambios de
coloración del agua debido a que
poseen pigmentos con los que captan la luz.
Estos pigmentos pueden ser de color rojo,
amarillo, verde, café o combinaciones, siendo la
más frecuente la coloración rojiza. de ahí que se
ha generalizado mundialmente el término
"Marea Roja".
UNMSM FQIQeIAg Q.F. OSCAR
SANTISTEBAN ROJAS
La Marea Roja o FAN
•Floraciones Algales Nocivas
(FAN)
•La Marea Roja es un fenómeno
natural caracterizado por un
aumento de la concentración de
ciertos organismos componentes
del plancton.
El cambio de coloración depende también de la concentración

del organismo involucrado y de la profundidad en la que se
distribuye, llegando en ocasiones a ser no visibles. También son
fenómenos aperiódicos e impredecibles, aunque en algunos
sectores se presentan con cierta periodicidad y en otros en forma
ocasional.

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La Marea Roja o FAN
Estos pigmentos pueden ser de color
Rojo
Amarillo
Verde
Café
O combinaciones, siendo la más frecuente la coloración rojiza. de ahí
que se ha generalizado mundialmente el término "Marea Roja".
Los biotoxinas que son producidas por los organismos originadores de
marea roja son preferentemente concentrados por la filtración de
los bivalvos y encontradas en moluscos, crustáceos y peces.
Los mariscos bivalvos se alimentan filtrando grandes volúmenes de agua
lo que les permite obtener y concentrar apreciables cantidades de
organismos componentes del plancton, incluidos los tóxicos, originadores
de marea roja. Como consecuencia de la continua filtración de plancton
tóxico, grandes cantidades del veneno se ligan a los tejidos o se
concentran en las glándulas digestivas de choritos, cholgas, almejas u
otros mariscos. SANTISTEBAN ROJAS
Los mariscos afectados directamente por marea roja tóxica no sufren
ningún tipo de alteración en sus características (movimiento, digestión,
etc.), de manera tal, que a "simple vista" no es posible detectar su nivel
de toxicidad.

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En el mundo existen a los menos seis tipos de toxinas
marinas relacionadas con las floraciones de algas nocivas
•Toxina paralítica de los mariscos (VPM)
•Toxina diarreica de los mariscos (VDM)
•Toxina neurotóxica de los mariscos (VNM)
•Toxina amnésica de los mariscos (VAM)
•Tetrodotoxina (*)
•Ciguatera (*) PREGUNTA DE EXAMEN

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Proliferaciónes Nocivas
Pero la floración nociva que más nos
interesa es la relacionada con la especie
llamada Alexandrium catenella. Este
dinoflagelado está relacionado con el
veneno paralizante de los mariscos (VPM),
una toxina sumamente potente y que ha
ocasionado hasta la fecha 321 casos de
intoxicación, con un saldo lamentable de
20 muertes.

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ESPECIES QUE
PRODUCEN
MAREA ROJA

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Detección de toxinas
Una de las medidas básicas de

control y vigilancia sanitaria para
proteger la vida de las personas
ante la aparición del VPM,
consiste en determinar la
cantidad de toxina existente en
los mariscos de la región. Para
ello se toman muestras de los
productos en las localidades o
sectores que resulten
representativos o sospechosos,
para posteriormente realizarle un
análisis toxicológico en los
laboratorios del Servicio de Salud
respectivo.

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Los métodos más usados en el mundo
son:
•Bioensayo en ratón
•La cromatografía
•Radioensayo

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Las Directivas europeas específicas de
diferentes alimentos recogen criterios
generales relativos a la «ausencia de
compuestos tóxicos».
Sin embargo, existen dos Directivas
que tratan de forma específica las
biotoxinas marinas (Directivas 91/493 y
91/492), que fijan las normas sanitarias
aplicables a la producción y puesta en
el mercado de productos pesqueros y
moluscos bivalvos, respectivamente), y
establecen límites máximos y métodos
de control para las toxinas DSP y PSP.
Sin embargo, son bastante ambiguas
en lo relativo a las técnicas de control,
especificando únicamente que «el
método de referencia será biológico»
sin definir un protocolo concreto.
Camean
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La cromatografía líquida/espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS)
es el método de referencia para toxinas lipofílicas desde julio del
2011. Hasta entonces el bioensayo en ratón fue usado como referencia y su
aplicación para monitorización de estas toxinas en controles oficiales o
autocontrol ha estado permitida hasta el 31 de diciembre el 2014. Sin
embargo, su uso, para toxinas lipofílicas, está prohibido en Europa o países
exportadores a la UE desde el 1 de enero del 2015.
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La legislación Europea (Reglamentos CE No. 2074/2005 y 15/2011) también
permite el uso de otros métodos analíticos para la monitorización de
toxinas lipofílicas, siempre y cuando cumplan los criterios de eficacia
establecidos por el LR-UE (laboratorio de referencia Europeo) y proporcionen
el mismo grado de protección para la salud pública.
Actualmente existen otros dos métodos que cumplen con estos requisitos, un LC-
MS/MS (Van den Top et al, Food & Contaminants 2011) y un ensayo de inhibición
de fosfatasa (Smienk et al, Toxins 2012) .
El método LC-MS/MS de Van den Top usa metanol 100% como solvente de
extracción y condiciones alcalinas de ensayo. Este método ha sido validado inter
e intralaboratorio en el 2009 y 2011, respectivamente.
El ensayo de inhibición de fosfatasa- OkaTest– es el único test comercial

validado en ensayos inter e intra-laboratorio puede ser usado para
la detección de toxinas del grupo del ácido okadaico (OA, DTX1, DTX2,
DTX3 incluyendo sus esteres) en moluscos bivalvos. El tests se lleva a cabo en
una placa microtiter de 96 pocillos, incluye 5 patrones listos para usar y permite
hacer hasta 43 muestras en unas 2.5 horas.
La combinación OkaTest y LC-MS/MS puede ser un buen sistema de monitorizar
toxinas lipofílicas en moluscos como se describe a continuación.

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http://www.zeulab.com/blog/tag/toxinas-diarreicas/page/2/
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El consumo de moluscos contaminados con
toxinas del grupo del ácido okadaico (AO,
DTX1, DTX2 y sus ésteres) causan la
intoxicación diarreica por moluscos (DSP o
VDM). La inhibición de la actividad de las
enzimas fosfatasas (PP1 y PP2A) por este
grupo de toxinas a las que se atribuyen estos
desórdenes diarreicos. OkaTest es un ensayo
colorimétrico basado en la inhibición de la
actividad de la fosfatasa PP2A. El kit permite la
cuantificación de las toxinas del grupo del ácido
okadaico, para el cual la fosfatasa es la diana
biológica. Este método es aplicable a moluscos
bivalvos como mejillones, almejas, ostras y •Rápido: 43 muestras en unas 2.5 horas
vieiras.0
•Simple: sólo 2 etapas de fácil realización
Detección de las toxinas del grupo ácido 5 estándares de AO listos para usar
okadaico y derivados en moluscos bivalvos
•Quantitativo: rango de trabajo: 63 -352 µg/Kg
LOQ: 56 µg/Kg
•Formatos: 48 ó 96 muestras
•Equipo: lector de placas de 405 nm
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2. Toxinas diarreicas de moluscos (DSP)
El bioensayo en ratón es el método más ampliamente utilizado para la detección
de toxinas DSP. Se observa la supervivencia de tres ratones albinos machos de
unos 20 g de peso tras la inyección intraperitoneal de un extracto de los moluscos
bivalvos. Este ensayo puede dar lugar a falsos resultados positivos por las
interferencias derivadas de la co-extracción de otros compuestos.
El empleo del crustáceo Daphnia magna es una alternativa in vivo 10 veces más
sensible que el bioensayo en ratón.
El tamaño de las dafnias varía entre 0,2 y 5,0 mm de longitud.

Habitan en medios acuáticos, desde charcos hasta ríos, y se
alimentan esencialmente de fitoplancton, pudiendo también
ingerir microorganismos como protistas y bacterias, así
como materia orgánica particulada o disuelta.

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Se han desarrollado varios ensayos de citotoxicidad para la determinación
de toxinas DSP. El primero se basó en la medición de la liberación de LDH en
hepatocitos de rata, que se complementó estudiando los cambios
morfológicos, la observación microscópica del daño en células de carcinoma
humano (KB), la incorporación de rojo neutro, o la metabolización de MTT.
Diversos ensayos de inhibición enzimática aprovechan la acción inhibitoria

de las toxinas pertenecientes al grupo del ácido okadaico sobre las
subunidades catalíticas de las fosfatasas de proteína PP1 y PP2A. Se han
desarrollado ensayos colorimétricos, isotópicos con 32P-fosfohistona como
substrato del enzima, y fluorescentes.
Este ensayo se encuentra en fase de validación.

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3. Toxinas paralizantes de moluscos (PSP)
El bioensayo en ratón constituye el método de mayor difusión para el control
de toxinas fitoplanctónicas PSP desde 1965 (AOAC, 1990). Es muy rápido y
cuantitativo, pero presenta sensibilidad limitada y se pueden producir falsos
negativos por la presencia de sales, y falsos positivos por metales.
En los ensayos de receptor se utiliza la competición establecida entre la [3H]-

STX empleada en el ensayo y las toxinas PSP presentes en la muestra por la
unión a los receptores específicos de los canales de Na+
Los ensayos de citotoxicidad se basan en la acción antagonista de las toxinas
PSP frente, provocando el hinchamiento y muerte celular.
Las toxinas PSP bloquean la entrada celular de Na+ inducida por ouabaína y
veratridina. Se ha empleado la línea celular de neuroblastoma de ratón
Neuro-2a con indicadores morfológicos, colorimétricos y fluorescentes, en
este caso para estudiar los cambios en el potencial de membrana en una
línea celular de neuroblastoma humano.

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4. Toxina amnésica (ASP)
La técnica de elección es la HPLC, ya que el bioensayo por inyección i.p. en
ratón, que es el método rutinario, es poco sensible para los actuales niveles de
seguridad de toxinas ASP (20 μg/g), aunque presenta sintomatología
patognomónica con rascado de los hombros con las patas traseras a
concentraciones de ácido domoico superiores a 40 μg/g.
Los ensayos de receptor en micro placa para el análisis de ácido domoico

utilizan sinaptosomas de cerebro de rana y [3H]-ac. kaínico como competidor.
Se ha desarrollado un ensayo de citotoxicidad con cultivos primarios de

neuronas cerebelares de rata para la detección del ácido domoico, valorando la
metabolización de MTT.
Se precisan cultivos primarios neuronales con receptores activos, ya que el

potente síndrome ASP por ácido domoico se produce por estimulación
de los receptores No-NMDA del sistema nervioso central, potenciando a su
vez la acción neurotóxica de otros aminoácidos excitadores que se unen
específicamente a los receptores del tipo NMDA.

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6. Ciguatoxinas
El bioensayo en ratón es el método más ampliamente utilizado para el

análisis de ciguatoxinas en peces tropicales, si bien constituye una técnica
muy poco específica aunque segura desde el punto de vista de protección
de la salud pública.
Los ensayos de receptor se basan en la afinidad de las ciguatoxinas por

los canales de sodio en preparaciones de membranas de cerebros de
rata, evaluando mediante ensayos competitivos con brevetoxinas la tasa
de unión a los receptores.
Para detectar toxinas bloqueantes o activadoras de los canales de sodio se

utilizan células excitables como las líneas celulares de neuroblastoma de
ratón y diferentes agonistas o antagonistas de los canales de sodio
(ouabaína, veratridina), evaluando la citotoxicidad mediante MTT. La
sensibilidad es cuatro órdenes superior a la del bioensayo en ratón.

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Técnica para la manipulación de un ratón

SANTISTEBAN ROJAS
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Via intraperitoneal

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¿En qué especies marinas encontramos
las biotoxinas?
• Las biotoxinas marinas son
producidas por unas pocas docenas
de algas planctónicas
microscópicas que pertenecen
mayoritariamente al grupo de los
dinoflagelados. La toxicidad de
estas substancias depende de su
composición química y de su
concentración. En ocasiones,
pueden presentarse en cantidades
tan elevadas que se reconocen a
simple vista en la superficie del
mar por su coloración rojiza
(proliferación de microalgas
tóxicas).
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• Los principales factores que influyen en estas proliferaciones son la
temperatura, la transparencia, la salinidad, el viento, la iluminación
y muy especialmente la disponibilidad de nutrientes.
• El aumento de los niveles de nutrientes (nitrógeno y fósforo)
disponibles o eutrofización se produce de forma natural cuando
estacionalmente tienen lugar los fenómenos de afloramiento de
agua del fondo marino cargada de nutrientes hacia la superficie. No
obstante, lo que más preocupa es la denominada eutrofización
antrópica, que tiene su origen en el vertido al mar de las aguas
residuales domésticas e industriales y los lixiviados agrícolas.

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• Se desconoce la razón por la cual
estas microalgas producen sus
toxinas. Probablemente son
utilizadas como una forma de
competir por el espacio (con otras
especies del plancton) o para
combatir la depredación, e incluso
se especula con la idea de que se
producen como respuesta a la
exposición a concentraciones
atípicas de nutrientes a causa de la
eutrofización. La proliferación de
algas nocivas afecta gravemente a la
fauna marina y las instalaciones
acuícolas dedicadas a la producción
de mejillones, ostras y otros
bivalvos.
• http://salutipeix.udg.edu/es/donde-se-
encuentran.html

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Clasificación de toxinas
• Las ficotoxinas marinas más importantes son las toxinas de
mariscos y las ciguatoxinas. Hasta ahora, se distinguen cinco grupos
de toxinas de mariscos, denominadas:
• i. toxinas paralíticas de mariscos, causantes de la intoxicación
paralítica por mariscos (PSP);
• ii. toxinas de mariscos diarreicas, causantes de intoxicación
diarreica por mariscos (DSP);
• iii. toxinas de mariscos amnésicas, causantes de intoxicación
amnésica por mariscos (ASP);
• iv. toxinas de mariscos neurotóxicas, causantes de intoxicación
neurotóxica por mariscos (NSP); y
• v. toxinas de mariscos azaspiracidas, causantes de intoxicación
azaspiracida por mariscos (AZP)
• (Hallegraeff et al., 1995; Lindahl, 1998).
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Características Generales de las Biotoxinas Marinas
Entiéndase por biotoxinas marinas a los compuestos venenosos
producidos por microorganismos marinos (algas) y que son acumulados por
los moluscos bivalvos, destacándose los siguientes síndromes:
Toxina Paralizante de los Molusco (Paralytic Shellfish

Poisoning) = VPM ó PSP (Saxitoxina)
Las toxinas PSP son un grupo de 21 tetrahidropurinas, todas ellas son
análogas a la Saxitoxina (STX), la primera tipificada y la más estudiada,
divididos en cuatro subgrupos:
i) carbamato (STX, neoSTX y las gonyautoxinas (GNTX1-4);
ii) N-sulfo-carbamoil (GNTX5-6, C1-4);
iii) decarbamoil (dc-) (dcSTX, dcneoSTX, dcGNTX1-4); y
iv) compuestos de desoxidecarbamoil (do-) (doSTX, doneoSTX y
doGNTX1).
Las toxinas PSP son termoestables en pH ácido (salvo los componentes del
N-sulfo-carbamoil), pero inestables en condiciones alcalinas, oxidándose
fácilmente.
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Estructuras químicas de
las toxinas PSP

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Agente causal
Los dinoflagelados del género
Alexandrium (conocido como
Gonyaulax o Protogonyaulax)
son los principales responsables
de la producción de estas toxinas
en zonas de clima tropical o
templado.
En las costas del Pacífico
Mexicano han ocurrido eventos
tóxicos por PSP, donde se ha
identificado como responsable a
las especies Gymnodinium
catenatum y Pyrodinium
bahamense var compressum.
red tide dinoflagellate Gonyaulax excavata in Bay of Fundy

sediments. UNMSM FQIQeIAg Q.F. OSCAR
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Toxicidad en seres humanos
La concentración causante de las intoxicaciones por PSP en los seres
humanos varía considerablemente. Esto se debe principalmente a diferencias
de sensibilidad individuales y a oscilaciones del método de determinación.
Síntomas tóxicos
En casos leves, los síntomas clínicos de intoxicación con PSP incluyen una
sensación de hormigueo o entumecimiento alrededor de los labios que
generalmente aparece dentro de los 30 minutos.
Luego el hormigueo o entumecimiento se extiende progresivamente por el
rostro y el cuello. Con frecuencia, el paciente experimenta una sensación de
picazón en las puntas de los dedos de las manos y de los pies, cefaleas,
mareos, nauseas, vómitos y diarrea y, ocasionalmente, también ceguera
temporal.
La mayoría de los síntomas aparecen rápidamente (en cuestión de horas), pueden
durar varios días y son prácticamente invariables en todos los casos de
intoxicación paralítica por mariscos.
Estos síntomas preceden una debilidad muscular característica ya que los
nervios sensoriales son más finos y tienen internodos más cortos que los nervios
motores y son los primeros afectados por cualquier agente de bloqueo axonal.
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En intoxicaciones moderadamente graves, la parestesia se extiende a los
brazos y las piernas, que presentan también debilidad motriz.
El paciente padece también vahídos y articulación incoherente. Con

frecuencia se observan manifestaciones del cerebelo, como por ejemplo
ataxia, falta de coordinación motora y dismetría.
Las primeras dificultades respiratorias se manifiestan con una sensación de

ahogo alrededor de la garganta.
En casos de intoxicación grave, la parálisis muscular se extiende y se

agrava. Generalmente, el pulso no presenta anormalidades alarmantes.
En algunos casos, entre dos y 24 horas luego de la ingestión el paciente

presenta dificultades respiratorias graves y muere por parálisis respiratoria
(Mons et al., 1998).

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Tratamiento
El tratamiento clínico de las víctimas es integral. Si no hubo vómitos espontáneos,
se procede con emesis inducida o con lavado gástrico para eliminar las fuentes de
toxinas aún no absorbidas. En un medio ácido como el gástrico, las toxinas PSP
tienen mucha carga y el carbón activado las absorbe eficazmente.
En casos moderadamente graves, el objetivo primordial es mantener
respirando al paciente. En casos de intoxicación por PSP sin complicaciones, las
vías respiratorias no se obstruyen con excreciones excesivas. La insuficiencia
respiratoria se debe a distintos grados de parálisis de los nervios y músculos
respiratorios por lo que se recomienda someter al paciente a respiración artificial
con presión positiva, si corresponde. La acidosis que pudiera presentar el paciente
se corrige con terapia de fluidos, que además facilita la excreción renal de toxinas.
Resulta eficaz el manejo integral, conservador y tradicional del paciente.
Si el sobrevive 18 horas, la prognosis es buena y la recuperación total rápida.
Algunos autores sostienen que en nueve horas se logra la disminución fisiológica
de la concentración de toxinas hasta grados relativamente inofensivos, salvo en
casos con concentraciones iniciales de toxinas muy elevadas o en víctimas con
disfunción renal.
Del punto de vista médico, las únicas medidas aceptables en casos de
intoxicación con STX son la respiración artificial y el lavado gástrico. En casos de
intoxicación grave, la respiración artificial no siempre es recomendable
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Toxina Diarreica de los Molusco (Diarrhetic Shellfish
Poisoning) = VDM ó DSP (Ac. Okadaico)
Las toxinas diarreicas (DSP) son compuestos liposolubles que se acumulan en
los tejidos adiposos de los bivalvos, como mejillones, ostras y almejas.
Las toxinas DSP se clasifican según su estructura química.
El primer grupo incluye las toxinas ácidas e incluye el ácido ocadaico (AO) y
sus derivados, las dinofisistoxinas (toxinas DTX);
el segundo grupo las toxinas neutras y compuestos tipo poliéter lactona del
grupo de las pectenotoxinas (toxinas PTX); y
el tercero los poliéteres sulfatados y sus derivados, las yesotoxinas (toxinas

YTX).

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Estructura Química
Todas las toxinas DSP son poliéteres
termoestables lipófilos.
Estructuras químicas del ácido okadaico,
de las dinofisistoxinas y de las
pectenotoxinas.

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Agente causal
Los productores de toxinas DSP son dinoflagelados de los géneros Dinophysis
spp. y Prorocentrum spp. En condiciones ambientales favorables, estas algas
pueden reproducirse rápidamente y causar floraciones.
El bioensayo en ratón es el método usado comúnmente para su determinación.
La ingestión de estos mariscos contaminados por

acumulación de toxinas causa, en el ser humano,
la Intoxicación Diarreica por Mariscos (DSP).
El mecanismo de acción de las toxinas DSP se
debe a que el AO provoca una contracción de
larga duración del músculo liso de las arterias
humanas.
La causa de la diarrea en el ser humano es la
hiperfosforilación de las proteínas que
controlan la secreción de sodio de las células
intestinales o un aumento de la fosforilación de las
proteínas citoesqueléticas o de unión,
responsables de regular la permeabilidad a los
solutos; lo que ocasiona una pérdida pasiva de
fluidos (Van Egmond et al., 1993; Hallegraeff et al., 1995).
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Síntomas Tóxicos y tratamiento
Los síntomas principales en el ser humano incluyen diarrea, nauseas,
vómitos y dolores abdominales.
Los síntomas, que nunca son letales, comienzan a aparecer entre 30

minutos y un par de horas luego de la ingestión de los mariscos
contaminados, y se observa una recuperación completa en un lapso de tres
días.
La intensidad de los síntomas varía según la cantidad de toxinas ingerida y

generalmente no es necesario hospitalizar al paciente.

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Veneno Amnésico de los Molusco (Amnesic Shellfish
Poisoning) = VAM ó ASP (Ac. Domoico)
La intoxicación amnésica por mariscos (ASP), conocida también como
intoxicación por ácido domoico, ya que la amnesia no siempre se manifiesta.
El ácido domoico (AD), un compuesto natural perteneciente a la categoría de los
cainoides aislados de diversas fuentes marinas, incluidas las macro y
microalgas (Wright y Quilliam, 1995).
El AD es un amino ácido cristalino, soluble en agua. Puede purificarse por

diversos métodos cromatográficos y su detección se facilita por espectroscopia
UV por poseer un cromóforo fuerte. El AD es una potente neurotoxina
estimulante de los neurotransmisores, que se unen a proteínas receptoras
especificas en las neuronas, causando su despolarización continuada hasta
la ruptura celular (Wright, 1995).

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El bioensayo en ratón para las toxinas PSP de la AOAC, también permite
detectar AD en concentraciones de aproximadamente 40 μg/g tejido (AOAC,
1990).
La señal típica de la presencia de AD es un síndrome característico en el que

los ratones se rascan con la pata trasera los hombros, seguido de
convulsiones.
Para la detección de rutina de las toxinas ASP, el método de ensayo en ratón

de la AOAC ha sido sustituido por métodos de Cromatografía Líquida con
detector fluorométrico o diodo/UV, que resultan herramientas más sensibles y
confiables (Fernandez y Cembella, 1995).

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Agente causal
El origen del AD en es la diatomea Pseudonitzschia ssp en sus diferentes
variedades pungens multiseries, Pseudonitzschia australis, Pseudo-nitzschia
Pseudodelicatissima y Pseudo-nitzschia seriata, aunque tambien se ha
encontrado en la macroalga roja, Chondria armata.

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Toxicidad en Humanos
El AD es un análogo de glutamato que se une con alta afinidad a receptores
glutamato del tipo quisqualato. El glutamato y también la subclase NMDA
abriendo los canales de membrana permeables al Na+, resultando en entrada
de Na+ y despolarización de la membrana. Sólo el canal abierto por un receptor
NMDA accesible al cainato, quisqualato y al AD, es además, altamente
permeable al Ca2+ e inducía la entrada del Ca2+ celular con efectos letales.
El DA es tóxico tanto para el sistema nervioso central como para el S N periférico.
El AD es un emético que provoca arcadas y vómitos, posiblemente por su efecto

sobre el centro del vómito en la zona postrema del cerebro. Produce un síndrome
de neuropatía axonal sensoriomotora, amnesia, ataques, coma y muerte.
Debido a su impacto sobre la memoria, entre otros efectos perjudiciales, la
intoxicación ha sido llamada intoxicación amnésica por mariscos (ASP).

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Síntomas Tóxicos
Los síntomas más comunes son nausea, vómitos, calambres abdominales,

dolor de cabeza, diarrea y pérdida de memoria.
La pérdida de memoria y la edad se correlacionan bien; aquellos con menos de

40 años son más susceptibles a diarreas y los mayores de 50 años a pérdida
de memoria. La perdida de memoria es fundamentalmente de corto plazo.
Los síntomas leves son principalmente gastrointestinales. Los casos más

serios presentan déficit neurológico severo

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Veneno Neurotóxico de los Moluscos (Neurotoxic Shellfish Poisoning) =
VNM ó NSP (Brevetoxinas)
Generalidades
La intoxicación neurológica o neurotóxica por mariscos (NSP) es causada por
brevetoxinas poliéteres producidas por un dinoflagelado desnudo,
Gymnodinium breve (también llamado Ptychodiscus breve, y desde el 2000
llamado Karenia brevis).
Las brevetoxinas son tóxicas para peces,

mamíferos marinos, aves y seres
humanos, aunque no para los mariscos. La
intoxicación neurológica por mariscos
era considerada endémica en el Golfo de
México y la costa este de la Florida, de
donde se han informado “mareas rojas”
desde 1844.
Una característica poco común de la
Karenia brevis es la formación por acción
de las olas de aerosoles tóxicos que
pueden resultar en síntomas similares al
asma en los seres humanos.UNMSM FQIQeIAg Q.F. OSCAR
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Estructuras químicas de las brevetoxinas de tipo A y B (Hua et al.,
1996)
Por medio del bioensayo en ratón se evalúa la toxicidad inyectando
intraperitonealmente extracto lípido en bruto de mariscos en ratones. Los
resultados se expresan en unidades ratón (UR), (Hokama, 1993). El método
aceptado actualmente es el procedimiento de la American Public Health
Association (APHA) de 1985 basado en la extracción del tejido de mariscos
con éter dietílico.

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Estructuras químicas de las brevetoxinas de tipo A y B (Hua et al., 1996)
Agente causal
Las toxinas NSP, denominadas brevetoxinas, son
neurotoxinas poliéter cíclicas insípidas, incoloras,
estables al calor y a los ácidos, solubles en lípidos y
producidas por el dinoflagelado marino Karenia brevis
(o G. breve).

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Toxicidad en humanos
Exposición oral
Cuando las brevetoxinas (NSP) se acumulan

en los mariscos, su consumo crudo o cocido, puede causar un síndrome
tóxico algo similar a las intoxicaciones PSP y ciguatera, aunque menos
severo.
Los síntomas de NSP aparecen entre los 30 minutos y las tres horas, duran
unos pocos días presentando nauseas, vómitos, diarrea, escalofrío,
sudoraciones, cambios de temperatura, hipotensión, arritmias,
entumecimientos, hormigueo, parestesia labial, de la cara y de las
extremidades, calambres, broncoconstricción, parálisis, ataques y coma.
No se han informado síntomas crónicos o mortalidad (Cembella et al., 1995;

Fleming et al., 1995; Tibbets, 1998).
El tratamiento es básicamente de apoyo (Fleming y Baden, 1999).

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Exposición dérmica
Por su fragilidad relativa el organismo K. brevis se abre fácilmente por acción
del mar liberando las toxinas (G. breve es un organismo "desnudo" desprovisto
de caparazón externa de placas de polisacáridos como otros dinoflagelados). Si
se nada en contacto directo con floraciones tóxicas, puede causar irritaciones
de los ojos y membranas nasales (Cembella et al., 1995; Fleming y Baden, 1999; Tibbets, 1998).
También puede ocurrir exposición por inhalación a las brevetoxinas resultante

en dificultades respiratorias, así como irritación de las membranas nasal y de
los ojos por la fragilidad relativa del organismo (Cembella et al., 1995; Fleming y Baden, 1999; Tibbets,
1998).
Las toxinas NSP estimulan fibras colinérgicas post-gangliónares lo que puede
resultar, por exposición a agua de mar en aerosol o a sus mareas rojas, en
irritaciones respiratorias y conjuntivales, catarros con copiosos exudados,
rinorea, toses no productivas, y bronco- constricción.
Algunas personas informan de otros síntomas como mareos, visión en túnel y

sarpullidos de la piel. La irritación y la broncoconstricción en las poblaciones es
rápidamente reversibles al abandonar las playas o al permanecer en zonas con
aire acondicionado. Los asmáticos parecen ser, particularmente susceptibles.
Además, hay informes de enfermedades pulmonares prolongadas,
especialmente en poblaciones susceptibles como ancianos o personas con
enfermedades pulmonares crónicas (Fleming y Q.F.
UNMSM FQIQeIAg Baden, 1999; Watters, 1995).
OSCAR
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Síntomas toxicos
Las brevetoxinas son sustancias depolarizantes que accionan los canales de

sodio de las paredes celulares sensibles al voltaje. De esta forma se alteran las
propiedades de membrana de las células excitables favoreciendo el flujo hacia el
interior de iones Na+.
La toxina parece que produce sus síntomas sensoriales al volver lentos los
canales de sodio rápidos, resultando en una activación persistente y un gatillado
repetitivo (Watters, 1995).

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Tratamientos
Los problemas respiratorios asociados con la inhalación de brevetoxinas en

aerosol son posiblemente debidos en parte a la apertura de los canales de
sodio.
Se informa que la brevetoxina puede combinarse con una posición separada
del canal de sodio, provocando la liberación de neurotransmisores desde las
terminaciones nerviosas autónomas.
En particular, puede liberar acetilcolina, que provoca contracciones moderadas
de la traquea (Fleming y Baden, 1999).
Por ser además las brevetoxinas inhibidores enzimáticos de las proteinasas
lisosomales conocidas como catepsinas, encontradas en células fagocíticas
como los macrófagos y los linfocitos, es posible que puedan asociarse también
efectos inmunológicos agudos y crónicos (incluida la liberación de
intermediarios inflamatorios resultantes en un shock tóxico fatal) con la
exposición a brevetoxinas en aerosol, especialmente crónicas y/o poblaciones
susceptibles (Bossart et al., 1998), aunque Fleming y Baden (1999) dudan del
mecanismo de las catepsina.
La catepsina es una proteína con actividad proteolítica (enzima), se encuentra

en tejidos animales, cataliza la hidrólisis de proteínas a polipéptidos.
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Veneno Neurológico y gastrointestinal por Ciguatoxina.
Generalidades
La ciguatera es una enfermedad conocida en el caribe desde la época de la
conquista española. Se trata de un intoxicación debida a la ingestión de peces
que han acumulado esta ficotoxina a través de la cadena alimenticia. Este tipo
de intoxicación es típico de áreas tropicales y subtropicales con arrecifes
coralinos, donde vive una variedad de dinoflagelados tóxicos que son
consumidos por los peces herbívoros que bioacumulan las toxina para luego
transmitirlas al ser humano directamente o a través de otros peces.

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Estructura Química
Las ciguatoxinas son compuestos lipídicos poliéteres solubles formados por
13 a 14 anillos unidos por enlaces éter con una estructura muy rígida del tipo
escalera. Son moléculas relativamente estables al calor que conservan su
toxicidad luego de la cocción y de exponerse a condiciones ácidas o básicas
suaves. Las ciguatoxinas resultan de la biotransformación en los peces de
sus precursoras, las gambiertoxinas (Lehane y Lewis, 2000; Lehane, 2000).

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Agente causal
El Gambierdiscus toxicus es la fuente de dos tipos de toxinas marinas, las
maitotoxinas, solubles en agua (MTXs) y las ciguatoxinas, solubles en
grasas.
Las ciguatoxinas son producidas solamente algunas cepas de G. toxicus, se
encuentran en el hígado, músculos, piel y espinas de los peces carnívoros de
gran tamaño, y son consideradas como la causa principal del
envenenamiento por Ciguatera en los seres humanos (Chinain et al., 1999;
Lehane y Lewis, 2000).

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Toxicidad en humanos
En intoxicaciones severas, la aparición de los primeros síntomas puede

ocurrir en menos de 30 minutos después de consumidos los pescados
contaminados con ciguatoxina, demorando, para casos más benignos hasta
24 y ocasionalmente 48 horas.
Los primeros síntomas pueden ser gastrointestinales como vómitos, diarrea,

nausea y dolores abdominales que tienen habitualmente lugar en las
primeras etapas de la enfermedad y a menudo, aunque no siempre,
acompañan a las perturbaciones neurológicas.
Estas invariablemente resultan en hormigueo en labios, manos y pies,

trastornos inusuales de la percepción de la temperatura, los objetos fríos dan
sensación de hielo seco y una picazón severa localizada de la piel. Estos
síntomas, junto con una profunda sensación de fatiga, pueden darse durante
la enfermedad. Se presentan en diverso grado dolores musculares,
articulares y de dientes, en tanto que ocurren con menor frecuencia
desordenes del comportamiento, como depresión y ansiedad.

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Los casos severos pueden incluir hipotensión con bradicardia, dificultades
respiratorias y parálisis, aunque la muerte es poco común. Los síntomas de la
ciguatera persisten habitualmente de varias semanas a varios meses. En un
pequeño porcentaje de casos, algunos síntomas pueden persistir por varios
años. Se han informado combinaciones de unas pocas a más de 30
perturbaciones gastrointestinales, y/o neurológicas generalizadas.
Tratamientos
No se conoce ninguna terapia de antídoto. Si el paciente presenta síntomas de
intoxicación por ciguatera poco después de ingerir pescado, puede resultar útil
un lavado gástrico seguido de un tratamiento con carbono activado. El mayor
éxito en el tratamiento de la ciguatera fue con manitol que parece no influir sobre
los síntomas cardiovasculares o gastrointestinales, pero reduce la gravedad y
duración de los síntomas neurológicos. Idealmente, para ser efectivo, el manitol
debiera administraseen la fase aguda. La investigación clínica demuestra que no
es efectivo si se administra pasadas 48 horas de la aparición de los síntomas
(De Fouw et al., 2001).

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TETRODOTOXINA

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TETRODOTOXINA
Introducción
La tetrodotoxina ( TTX , Número CAS [ 4368-28-9 ]) es una neurotoxina potente

marina, llamado según el orden de los peces de la que se asocia con mayor
frecuencia, la Tetraodontiformes ( tetras y cuatro años yodontos -diente), o el pez
globo tetraodon .
Los peces globo tetraodon están equipadas con cuatro grandes dientes que casi
se funden, formando una estructura en forma de pico utilizado para el craqueo de
moluscos y otros invertebrados, así como para raspar los corales y los arrecifes
de pastoreo general. Los miembros de este orden incluyen el globo fahaka
( Tetraodon fahaka ), el globo Congo ( Tetraodon miurus ), y el globo mbu gigante
( Tetraodon mbu ). Pez globo del género de Fugu (F. flavidus , F.
poecilonotus, y F.niphobles ), Arothron ( A.nigropunctatus ), Chelonodon ( Chelon
odon spp. ), y Takifugu ( Takifugu rubripes ) también tienda de TTX y análogos
relacionados en sus tejidos.

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Se han encontrado otros organismos marinos para almacenar TTX e incluyen el
pulpo de anillos azules australiano ( Hapaloclaena maculosa , utiliza TTX como
una toxina para la captura de presas), peces loro, peces ballesta, gobio, pez
ángel, el bacalao, el pez cofre ( Ostracion spp. ), Tobies, pez erizo, molas o pez
luna, pez globo, estrellas de mar, estrellas de mar ( Astropecten
scoparius), cangrejos xanthid ( Eriphia spp. ),
un cangrejo de herradura ( Carcinoscorpius rotundicauda) , dos cangrejos de

Filipinas ( Zósimo aeneus y Atergatis floridus ) ,
una serie de caracoles marinos , gusanos planos, ascidias, ribbonworms y

arrowworms (que ambos utilizan TTX como un veneno para la presa), moluscos
( Nassarius spp. y la trompeta de concha japonesa "Boshubora" ), y algas
marinas ( Jania spp. ).
Los organismos terrestres incluyen las ranas arlequín (Atelopus spp. ), la rana
de Costa Rica ( Atelopus chiriquiensis ), tres especies de tritón de
California Taricha spp ., y miembros de la Salamandridae (salamandras). El
número de especies continúa creciendo.

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Propiedades fisiológicas de TTX
TTX es una neurotoxina especialmente potente, bloqueando

específicamente los canales de sodio dependientes de voltaje en la
superficie de las membranas nerviosas.
La molécula consiste en una carga positivaGuanidinium grupo (catión

resultante es estabilizado por resonancia - ver modelo de palo por debajo de
donde el grupo guanidina, que consiste en tres átomos de nitrógeno, se
resume en azul - y que da el nombre a esta clase de neurotoxinas, qv,
toxinas guanidinio ) y un anillo de pirimidina (en rojo en el modelo de palo
abajo) con sistemas adicionales fusionados anillo (estos sistemas de anillos
adicionales, de los cuales hay cinco en total, contienen grupos hidroxilo que
sin duda debe ayudar a estabilizar el canal de sodio TTX-vinculante
complejo en la interfaz acuosa).

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Etapas de la TTX TTX intoxicación y Toxicidad
El primer síntoma de intoxicación es un leve adormecimiento de los labios y

la lengua, que aparecen entre los 20 minutos a tres horas después de comer
el pez globo venenoso.
El siguiente síntoma está aumentando parestesia en la cara y las
extremidades, que puede ser seguida por sensaciones de ligereza o
flotante. Dolor de cabeza, pueden ocurrir dolor epigástrico, náusea, diarrea, y
/ o vómitos. Ocasionalmente, pueden ocurrir algunos devanado o dificultad
para caminar. La segunda etapa de la intoxicación está aumentando la
parálisis.
Muchas víctimas son incapaces de moverse, incluso de estar puede ser

difícil. Hay una dificultad respiratoria. El habla es afectada, y la víctima suele
presentar disnea, cianosis e hipotensión. Pueden producirse aumentos de
parálisis y convulsiones, deterioro mental y arritmia cardiaca. La víctima,
aunque totalmente paralizado, puede ser consciente y en algunos casos
totalmente lúcida hasta poco antes de la muerte.
La muerte generalmente ocurre dentro de 4 a 6 horas, con un rango conocido

de cerca de 20 minutos a 8 horas.
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Las personas que ingieren la toxina y no mueren en las primeras 24 horas
normalmente sobreviven, a pesar de que a menudo caen en un estado similar
al coma durante varios días.
Completamente paralizadas, pero totalmente conscientes, las víctimas son

declaradas muertas y enterradas. Después de unos días, el hechicero vudú
vuelve y llama al cuerpo, que a su vezFQIQeIAg
UNMSM pareceQ.F.resucitar
OSCAR de entre los muertos
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BIOTOXINAS MARINAS

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BIOTOXINAS USADAS TERAPEUTICAMENTE
FUENTE TOXINA LD50 mg/kg EFECTOS USO TERAPEUTICO
Clostridium BTX-A 0.00003 Paralisis Espasmos, distonias y

botulinium muerte paralisis cerebral
Serpientes ancrod 460-10000 Neurotoxico Anticoagulante en
batroxobina Hemolitico trombosis
Necrosante
Apitoxinas 2800 Alergia Hipertensión,
muerte aprendizaje, memoria e
inmunidad
Toxinas de alacrán escozul - - Anticancerígeno
Alacrán Centruroides polipeptidos 310-60000 Falla respiratoria Antiplasmodico,

muerte Antibiotico
antiveneno

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BIOTOXINAS USADAS TERAPEUTICAMENTE
FUENTE TOXINA EFECTOS USO TERAPEUTICO
Tetrodotoxina TTX Paralisis Euforia, anestesico

muerte local, adiccion a
heroina
Amfidinolidos y Macrolidos Antitumoral
caribenolidos
Acido ocadaico AO Envenenamiento Antitumoral de
diarreico cancer de seno
Saxitoxina STX Bloqueo de canal Anestésico dolores
de sodio crónicos,
dependencia de
nicotina
Camacho et al (2007), Biotechnological significance of toxic marine
dinoflagellates
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FUENTE TOXINA EFECTOS USO TERAPEUTICO
Yesotoxina YTX citotoxico Afecta la producción de

colesterol celular, supresor de
tumores
Neurotoxina BTX Abre canales de sodio Fibrosis quistica y
enfermedades pulmonares
Gonyautoxinas GTX Bloquea canales de solio Infiltraciones anales clinicas
Goniodimina antifungal
Gymnocina citotoxico util en leucemia
Protoceratina citotoxico anticancerigeno
Pectenotoxina citotoxico anticancerigeno
Zooxantellatoxina simbioimina Vasoconstrictor Osteoporosis, antiinflamatorio y
antileucemico
Acido gambierico Antifungal
Ciguatera maitotoxina Abre canal de calcio Antifungal

Estimula secreción de
SANTISTEBAN ROJAS crecimiento de nervio
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Biotoxinas Marinas 2014-II Mar

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CURSO: TOXICOLOGIA DE

El cambio de coloración depende también de la concentración

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•Toxina paralítica de los mariscos (VPM)

•Toxina diarreica de los mariscos (VDM)

•Toxina neurotóxica de los mariscos (VNM)

•Toxina amnésica de los mariscos (VAM)

•Ciguatera (*) PREGUNTA DE EXAMEN

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Una de las medidas básicas de

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El ensayo de inhibición de fosfatasa- OkaTest– es el único test comercial

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El tamaño de las dafnias varía entre 0,2 y 5,0 mm de longitud.

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Diversos ensayos de inhibición enzimática aprovechan la acción inhibitoria

Este ensayo se encuentra en fase de validación.

UNMSM FQIQeIAg Q.F. OSCAR

En los ensayos de receptor se utiliza la competición establecida entre la [3H]-

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Los ensayos de receptor en micro placa para el análisis de ácido domoico

Se ha desarrollado un ensayo de citotoxicidad con cultivos primarios de

Se precisan cultivos primarios neuronales con receptores activos, ya que el

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El bioensayo en ratón es el método más ampliamente utilizado para el

Los ensayos de receptor se basan en la afinidad de las ciguatoxinas por

Para detectar toxinas bloqueantes o activadoras de los canales de sodio se

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Toxina Paralizante de los Molusco (Paralytic Shellfish

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red tide dinoflagellate Gonyaulax excavata in Bay of Fundy

El paciente padece también vahídos y articulación incoherente. Con

Las primeras dificultades respiratorias se manifiestan con una sensación de

En casos de intoxicación grave, la parálisis muscular se extiende y se

En algunos casos, entre dos y 24 horas luego de la ingestión el paciente

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Las toxinas DSP se clasifican según su estructura química.

el tercero los poliéteres sulfatados y sus derivados, las yesotoxinas (toxinas

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La ingestión de estos mariscos contaminados por

Los síntomas, que nunca son letales, comienzan a aparecer entre 30

La intensidad de los síntomas varía según la cantidad de toxinas ingerida y

UNMSM FQIQeIAg Q.F. OSCAR

El AD es un amino ácido cristalino, soluble en agua. Puede purificarse por

UNMSM FQIQeIAg Q.F. OSCAR

La señal típica de la presencia de AD es un síndrome característico en el que

Para la detección de rutina de las toxinas ASP, el método de ensayo en ratón

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El DA es tóxico tanto para el sistema nervioso central como para el S N periférico.

El AD es un emético que provoca arcadas y vómitos, posiblemente por su efecto

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Los síntomas más comunes son nausea, vómitos, calambres abdominales,

La pérdida de memoria y la edad se correlacionan bien; aquellos con menos de

Los síntomas leves son principalmente gastrointestinales. Los casos más