PROTEÍNAS

Reacción de Biuret

Material Peptona 2%
5 tubos de ensayo Gelatina 2%
Pipetas de 5 ml Caseína 2%
Reactivos Albúmina 2%
CuSO4 (sulfato de cobre)1% agua destilada
NaOH 10%

Procedimiento

a) Enumere 5 tubos de ensaye. Al tubo 1 agregue 2 ml de H2O t(-) a los tubos 2, 3, 4 y 5, 2 ml de

Peptona, Caseína, Gelatina y Albúmina de huevo respectivamente, todas al 2%.
b) Añada a cada tubo, 2 ml de solución NaOH al 10%.
¡¡¡PRECAUCIÓN!!!
c) Añada 3 gotas de solución de CuSO4 al 1%, a cada tubo.
d) Mezcle completamente el contenido de los tubos y déjelos reaccionar en reposo.
La aparición de una coloración violeta o rosa, máximo en 20 minutos, se considera prueba positiva.
La intensidad del color es proporcional al número de enlaces petídicos.
e) Anote la intensidad de la coloración obtenida en la tabla resumen que se encuentra al final del
capítulo.
Reacción Xantoprotéica
NH4OH (hidróxido de amonio) concentrado
Material Peptona 2%
5 tubos de ensayo Gelatina 2%
Pipetas de 5 ml Caseína 2%
Reactivos Albúmina 2%
HNO3 concentrado agua destilada

Procedimiento
a) Enumere 5 tubos de ensaye; al 1 agregue 2 ml de H2O t(-) a los tubos 2, 3,
4 y 5, 2 ml de Peptona, Caseína, Gelatina y Albúmina de huevo respectivamente, todas al 2%.
b) Con cuidado, añada al tubo uno, 1 ml de HNO3 concentrado, mezcle completamente.
c) Caliente ligeramente con precaución y observe si aparece una coloración
amarilla.
d) Deje enfriar la solución y añada, resbalando por la pared del tubo, lenta y
CUIDADOSAMENTE para estratificar, 15 gotas de NH4OH concentrado, para obtener alcalinidad,
observe si en la interfase aparece un anillo de color naranja.
e) Repita el experimento (incisos b, c y d) con el resto de los tubos.
f) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra al final del capítulo.
Cuestionario
1. ¿Se puede considerar esta reacción general para todas las proteínas?
2. Explique por qué se tiñe de amarillo la piel al contacto con el HNO3.

Reacción de Millon

Material Peptona 2%
5 tubos de ensayo Gelatina 2%
Pipetas de 5 ml Caseína 2%
Reactivos Albúmina 2%
Reactivo de Millon agua destilada
Procedimiento

a) Enumere 5 tubos de ensaye; al tubo 1 agregue 2 ml de H2O t(-) a los tubos 2, 3, 4 y 5, 2 ml de

Peptona, Caseína, Gelatina y Albúmina de huevo respectivamente, todas al 2%.
b) Añada 5 gotas del reactivo de Millon a cada tubo y mezcle completamente.
c) Con sumo cuidado, caliente cada tubo hasta que empiece a hervir
¡¡¡PRECAUCIÓN!!!!
La presencia de Tirosina se pone de manifiesto por la aparición de un precipitado blanco que por
acción del calor se vuelve rojo. La presencia de sales, así como soluciones muy alcalinas puede
interferir en esta reacción.
d) Anote en que soluciones apareció el precipitado y su coloración, en la tabla resumen que se
encuentra al final del capítulo.

Reacción de aminoácidos azufrados.

Material Pb(CH3COO)2 (acetato de plomo) 5%
5 tubos de ensayo Peptona 2%
Pipetas de 5 ml Gelatina 2%
Vaso de Precipitados de 500 ml Caseína 2%
Reactivos Albúmina 2%
NaOH 10% agua destilada

Procedimiento

a) Enumere 5 tubos de ensaye; al tubo 1 agregue 2 ml de H2O (t-) a los tubos 2, 3, 4 y 5, 2 ml de

Peptona, Caseína, Gelatina y Albúmina de huevo respectivamente, todas al 2%.
b) Añada a cada tubo 2 ml de solución de NaOH al 10% y caliéntelo ligeramente.
¡PRECAUCIÓN!
c) Añada a todos los tubos, 0.5 ml de solución de Pb(CH3COO)2.
d) Coloque los tubos en baño María a ebullición por 5 min. El oscurecimiento de la solución o la
formación de un precipitado negro, indica la presencia de aminoácidos azufrados.
e) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra a continuación.

PRUEBA PARA LÍPIDOS:

Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los
dos elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos.

1. Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de aceite vegetal y 2cc de una solución de hidróxido

sódico al 20%.
2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.
3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que
contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla de
aceite no utilizado, y la intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabón formado.