Práctica N°15: Transformación Bacteriana

1. Determinación de la Eficiencia de Transformación.

Se sabe que a partir del DNA que lleva la información genética se acaban traduciendo las
proteínas y así manifestando los diferentes fenotipos. La transformación es un proceso de
transferencia genética que lleva cierto material genético libre a una célula receptora, esto lo
comprobamos en la práctica al someter una cepa bacteriana originalmente sensible a un medio
con cierto antibiótico en conjunto con 50 𝑛𝑔 de DNA plasmídico que lleva el gen de resistencia
al antibiótico. Cabe mencionar además que para lograr que el DNA plasmídico llegue al interior
de la bacteria se realiza un shock térmico, para lo cual previamente es muy importante mantener
una cadena de frío del DNA plasmídico para evitar posible deterioro. Si esta transferencia
genética se realiza, se podrán identificar colonias resistentes al antibiótico y que crezcan en el
medio con el mismo, de no haber ninguna colonia con la incorporación del DNA plásmido no
habrá ningún crecimiento en la placa. Posteriormente a partir de los resultados en las diferentes
placas se hallará la eficiencia de transformación.

Volumen Total (μL) DNA plasmídico (ng) DNA plásmico (μg) UFC
Inicial 1055 50 5.00E-02 -
Placa 1 100 4.74 4.74E-03 1
200 9.48 9.48E-03 0
Placa 2
Placa 3 755 35.78 3.58E-02 0
Tabla 1. Número de unidades formadoras de colonias (UFC) a diferentes condiciones para
probar la transformación bacteriana.

# 𝑑𝑒 𝐶𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 𝑇𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑛𝑡𝑒𝑠 1
𝐸𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑇𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑐𝑖ó𝑛 = =
𝐶𝑎𝑚𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝐷𝑁𝐴 𝑃𝑙𝑎𝑠𝑚í𝑑𝑖𝑐𝑜 4.74𝑥10−3
𝑈𝐹𝐶
= 2.11𝑥102
𝜇𝑔 𝑑𝑒 𝑝𝐷𝑁𝐴

2. Discusión

No se obtuvo un conteo significativo de unidades formadoras de colonias en esta práctica,

obteniéndose exclusivamente en una de las 3 placas 2 colonias, lo que podría dar conllevar a
una interpretación errónea de la realidad por la falta de significancia estadística.

3. Conclusiones

 Sí se da transformación bacteriana para la resistencia a antibióticos para la sepa de E.

coli utilizada.

𝑈𝐹𝐶
 La eficiencia de transformación obtenida fue de 2.11𝑥102 𝜇𝑔 𝑑𝑒 𝑝𝐷𝑁𝐴.