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Laboratorio de Análisis Instrumental en Ingeniería II 1

ESPECTROFOTOMETRIA DEL VISIBLE


ANALISIS DE HIERRO
I OBJETIVOS
 Construir una curva de absorción y de calibrado
 Seleccionar la longitud de onda de trabajo
 Analizar el contenido de hierro en un alimento.

II GENERALIDADES
Gran cantidad de iones inorgánicos que presentan color en solución acuosa absorben suficiente
energía radiante en la región visible, lo que permite su determinación espectrofotométrica directa,
incluso en muy bajas concentraciones. Pero no todos los iones metálicos presentan color propio, y
otros tienen poco color.
Los colores de muchos cationes se pueden intensificar por formación de compuestos complejos al
hacerlo reaccionar con determinados reactivos denominados cromoforos. Muchos reactivos que
producen color han sido empleados para la determinación de hierro, en algunos se efectúa la
determinación directa de hierro (III), mientras en otros se aprovecha la formación de complejos
muy coloreados entre hierro (II ) y diversos ligandos orgánicos.
Entre los diversos reactivos más importantes para la determinación espectrofotométrica del hierro
figuran el reactivo 1, 10 fenantrolina y sus análogos como el 4, 7 difenil 1, 10 fenantrolina
(batofenantrolina). El ligando orgánico, tiene la estructura siguiente C12H8N2, donde tres de estos
ligandos están coordinados con un catión de hierro (II), por los pares de electrones sobre los
átomos de nitrógeno, para formar el complejo indicado, que en forma abreviada se escribe así:

Analito ligando complejo rojo anaranjado

Cada átomo de nitrógeno de la fenantrolina forma un enlace coordinado con el hierro (II) y que
hay un total de 6 enlaces de este tipo. El complejo se llama tris 1, 10 fenantrolina, hierro II.
El hierro está contenido en el pigmento de la sangre (hemoglobina) y sirve principalmente para el
transporte del oxígeno y la hematopoyesis. El hierro se encuentra en hígado, riñones, corazón,
carne, productos elaborados con cereales integrales, verdura verde, espinacas, alimentos como las
lentejas, etc. En los productos farmacéuticos se tiene la presencia de hierro como sulfato ferroso y
estos productos son empleados en caso de anemía ferropénica (profiláxis y tratamiento) y como
suplemento dietético.

1.- Interferencias
Las principales interferencias son plata (I), cobalto (II), cobre (II) y níquel (II) se ha demostrado que
una mezcla de ácido cítrico y ácido etilen diamino tetraacético ( EDTA ) puede emplearse para
enmascarar plata (I) , cobre (II), y níquel (II) y una gran cantidad de iones metálicos comunes.
También resultan interferentes los oxidantes enérgicos como cianuros, nitritos, y fosfatos. La
adición en exceso de hidroxilamina elimina los errores debido a estas sustancias.
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III FUNDAMENTO
El método de la fenantrolina consiste en reducir el hierro al estado ferroso con el reactivo orgánico
cloruro de hidroxilamina en un medio ácido ajustado a más ó menos 3.5, con solución buffer, en
estas condiciones se agrega el reactivo complejante 1, 10 fenantrolina; formándose un compuesto
complejo de fierro fenantrolina de color rojo naranja, y que es medido luego
espectrofotométricamente a una longitud de onda de 510 nm. La formación cuantitativa del
complejo se observa en el margen de pH comprendido entre 3 y 9 pero se recomienda un pH
próximo a 4 para evitar la precipitación de diversas sales de hierro.

IV ARREGLO EXPERIMENTAL
El circuito básico del equipo instrumental es el siguiente:

V APARATOS
 Espectrofotómetro : HACH DR 2800
 Cubeta : 2.5 Cm. De trayecto óptico
 Región de trabajo : Espectro visible
 Longitud de onda : 510 nm
 Blanco : Solución de reactivos y disolvente menos hierro.

VI REACTIVOS
 Solución de Hidroxilamina .- Disolver 10.0 gramos de reactivo en 100 ml de agua destilada
 Solución buffer.- Disolver 250 gramos de acetato de amonio en 150 ml de agua destilada,
añadir 700 ml de ácido acético glacial.
 Solución de fenantrolina.- Disolver 0.250 gramos de 1, 10 fenantrolina monohidratada en 100
ml de agua destilada, agitando y calentando a 80 oC. Se evita el calentamiento si se añade 2
gotas de ácido clorhídrico en el agua destilada.
 Solución Stock de hierro.- La solución se prepara a partir del sulfato ferroso amoniacal [FeSO4
(NH4)2SO4.6H2O]. Para ello se disuelve 0.7020 gramos del reactivo, calidad analítica, en 50 ml de
agua destilada y 1 ml de ácido sulfúrico concentrado, pasar a una fiola en un litro, diluir
exactamente hasta el enrase y homogenice. La concentración de la solución es de 0.1 mg de
hierro por mililitro de solución (0.1 mg Fe / ml de solución).
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VIII TECNICA
1.- Preparación de soluciones estandares o patrones
Estas soluciones se deben preparar instantes antes del análisis porque son inestables. Disponer de
5 matraces aforados de 50 ml y rotular del uno al cinco; agregar a la fiola número 1, 0.5 ml,
agregar a la segunda fiola, 1.0 ml, a la tercera 1.5 ml, y a la cuarta fiola 2.0 ml de la solución Stock.
A la quinta fiola no se le añade dicho reactivo (solución blanco).

Se agrega a cada fiola, 3 ml de solución de hidroxilamina, 3 ml de solución de fenantrolina y ajuste


el pH de la solución a 3.5 con la solución buffer; diluya cada solución con agua destilada hasta el
aforo, se tapa la fiola, se agita y se deja en reposo durante media hora. El color de la solución es
rojo anaranjado.

CUADRO DE SOLUCIONES

N° volumen del Buffer Fenantrolina Concentració Volume


estanda Stock ml Ml Hidroxilamina ml n mg/ml n final
rd ml ml
1 0.5 3 3 0.001 50.0
2 1.0 3 3 0.002 50.0
3 1.5 3 3 0.003 50.0
4 2.0 3 3 0.004 50.0
5 0.0 3 3 0.000 50.0

2.- SELECCIÓN DE MODO BÁSICO DE TRABAJO

(a) ENCENDIDO Y APAGADO

 Conecte la toma de alimentación externa en un enchufe de la red eléctrica.


 Pulse el interruptor de encendido/apagado durante aproximadamente un
segundo para encender el instrumento
 Pulse el interruptor de encendido/apagado durante 3 a 5 segundos para
apagar el instrumento. Una señal acústica confirma que el instrumento se
ha apagado (no prender el instrumento rápidamente después de apagarlo,
espere unos 20 segundos antes de volver a encenderlo, para no dañar los
sistemas electrónico y mecánico)
(b) DIAGNOSTICO

 Cada vez que se enciende el instrumento, se ejecuta automáticamente una


serie de pruebas de autodiagnóstico para asegurar el correcto
funcionamiento de los principales componentes del sistema
 Este procedimiento, que dura unos dos minutos, autocomprueba el normal
funcionamiento del sistema, pruebas de lámpara, ajustes de filtros, la
calibración de las longitudes de onda y el voltaje. Los distintos tests que
funcionan correctamente se confirman con una marca de verificación.
Una vez completados los diagnósticos de puesta en mercha, aparece el
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MENU PRINCIPAL
 Si el instrumento detecta alguna desviación relativa a la última calibración,
es recomendable llevar a cabo una verificación del sistema.(pulsar la tecla
INICIO, esta verificación dura aproximadamente 6 minutos).
(C) MENU PRINCIPAL
 En el menú principal se pueden seleccionar diversos modos de trabajo

MENU DE MODO PRINCIPAL

Modo No “ “

1.- PROGRAMAS ALMACENADOS /PROGRAMAS DE CODIGOS DE BARRAS


2.- PROGRAMAS DEL USUARIO
3.- PROGRAMAS FAVORITOS
4.- LONGITUD DE ONDA UNICA
5.- LONGITUD DE ONDA MULTIPLE
6.- LAPSO DE TIEMPO
7.- VERIFICACIONES DEL SISTEMA
8.- RECUPERAR DATOS
9.- CONFIGURACION DEL INSTRUMENTO

(D) MODO LONGITUD DE ONDA UNICA

El modo “longitud de onda única” se puede utilizar de tres maneras. Para


mediciones de la muestra a una longitud, se puede programar el instrumento para
medir la absorbancia, el % de transmitancia o la concentración del analito.
 En el menú principal pulse LONGITUD DE ONDA UNICA
 Pulse OPCIONES para configurar los parámetros

AJUSTE DE PARÁMETROS ANALÍTICOS

Luego que el modo longitud de onda única es seleccionado, aparecen las opciones
de configuración de longitud de onda única. Estos parámetros son los siguientes:

OPCIONES DE CONFIGURACIÓN DE LONGITUD DE ONDA ÚNICA


OPCION
1. MEMORIZAR APAGADO/ENCENDIDO los datos de medición se memorizan
automáticamente)

2. % TRANS/ABS/CONC cambia entre % de Transmitancia, lecturas de


absorbancia o concentración)
3. LONGITUD DE ONDA ( ) introduce la longitud de onda de la medición, uitlice
el teclado alfanumerico para introducir la longitud e onda de medición (rango
entre 340-900 nm
4. ICONO TEMPORIZADOR (funciona a modo de cronometro)
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5. FACTOR DE CONCENTRACION (factor de multiplicación para convertir los


valores de ABS en valores de concentración)
6. RESOLUCION DE LA CONCENTRACION (seleccione la posición de la coma
decimal en las lectruras de concentración calculadas)
7. GUARDAR COMO PROGRAMA DEL USUARIO (memoriza los parámetros
seleccionados como programa de usuario)
8. RECUPERAR DATOS (recupera datos de medición escaneados de longitudes de
onda o lapsos de tiempo guardados)
9. CONFIGURACION DEL INSTRUMENTO (ajustes de funcionamiento básicos del
isntrumento)

4 - MEDICIÓN DE ESTÁNDARES A LA LONGITUD DE ONDA UNICA


 Coloque la cubeta de blanco (agua destilada) completamente limpia y seca
EN EL SOPORTE PORTACUBETAS.
 Seleccionar ern opciones la tecla longitud de onda e Introducir la longitud
de onda de la medición utilizando el teclado alfanumérico (450 nm)
 Pulse CERO (La tecla medición sólo se activará cuando se haya realizado
la medición del cero).
 Coloque la cubeta de muestra en el soporte portacubetas.Pulse medición
y tome nota del valor de absorbancia
 Realizar mediciones de absorbancia entre 450 a 600 nm a intervalos de 10
nm, calibrando el instrumento (blanco) a cada cambio de la longitud de
onda

3.- Preparación de la muestra


Pesar exactamente, 6.0000 g de la muestra y calcinar en una mufla a 550 o C hasta la obtención de
cenizas blancas. Disolver con 10 ml de HCl 6 M, calentando suavemente evitando llegar a
sequedad. Diluir con más o menos 20 ml de aguas destilada y calentar. Filtrar si es necesario y
recibir los filtrados en una fiola de 100 ml enrasar y homogenizar la solución con agua destilada.

Medir una alícuota de 25.0 ml, colocarla en una fiola de 50.0 ml y darle el mismo tratamiento que
las soluciones estandar hasta obtener el color. Esta solución de la muestra en estudio está lista
para ser sometida a medición en el aparato.

5.- MEDICION DE LAS MUESTRAS


Medir la absorbancia de cada muestra a la longitud de onda de trabajo.

IX CALCULOS
1.- Método Gráfico
Obtener la curva de calibrado y en el se plotea el valor de absorbancia de la muestra en la curva
para determinar su concentración. Calcular la concentración final de la muestra teniendo en
cuenta las diluciones efectuadas.

2.- Método Analítico


Seguir los procedimientos de acuerdo a los pasos señalados:
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a) Cálculo de las absortividades de las soluciones estandar

Emplear la ecuación base de las leyes fotómetricas:

A = a.b.c

Calcular las absortividades de las soluciones standard.

a1 = A1 / C1

a2 = A2 / C2

a3 = A3 / C3

a4 = A4 / C4

Luego calcular la absortividad media:

a m = a1 +a2+ a3+ a4
4

b) Cálculo de la concentración de la muestra

En la ecuación: A = am.b.c.

Se despeja C que corresponde a la concentración de la muestra:

C muestra = A muestra
am x b

c) Cálculo de la concentración de la muestra teniendo en consideración las diluciones


efectuadas

Calcular la concentración de la muestra tomando en cuenta las diluciones realizadas a la solución


problema.

d) Expresión del resultado


1.- En miligramos de hierro por mililitro
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Informe de laboratorio N° 4
Determinación de Hierro
Fecha: 18-10-2017 N° GRUPO: 6
Análisis: Determinación del espectro de absorción
Determinación de la longitud de onda de trabajo
Determinación de hierro
Método: Espectrofotometría de fenantrolina
Muestra: Leche en polvo Anchor 4.0000g
Contenido teórico: 10 mg/%
DATOS:
 Peso de la muestra = 4.000 g
 Volumen inicial = 50.0 ml
 Volumen alícuota = 25.0 ml
 Volumen final = 100.0 ml
 Solución stock = 0.1mg Fe/ml

DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO


Preparación de soluciones patrón
No Volumen del Buffer Hidroxilamin Fenantrolina Volumen
estándar Stock a final
1 0.5 2.0 3.0 3.0 50.0
2 1.0 2.0 3.0 3.0 50.0
3 1.5 2.0 3.0 3.0 50.0
4 2.0 2.0 3.0 3.0 50.0
5 Blanco 2.0 3.0 3.0 50.0

TABLA DE RESULTADOS DE LOS PATRONES


LONGITUD ABSORBANCIA
DE ONDA
450 0.656
460 0.711
470 0.776
480 0.814
490 0.828
500 0.855
510 0.879
520 0.813
530 0.648
540 0.431
550 0.258
560 0.147
570 0.090
580 0.054
590 0.033
600 0.019
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CURVA DE CALIBRACION (Abs vs ʎ)


1

0.8

0.6
Abs
0.4

0.2

0
450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600
londitug de onda (ʎ)

Longitud de onda de trabajo: 510 nm

MEDICIONES DE PATRONES

N° patrón Concentración mg/ml Abs


1 0.001 0.382
2 0.002 0.879
3 0.003 1.429
4 0.004 1.808

TABLA DE MEDICIÓN DE LA MUESTRA

N° Grupo Peso (g) Volumen inicial Volumen Volumen final Abs


alícuota
1 4.00 50 25 100 1.325
2 4.00 50 25 100 0.118
3 4.00 50 25 100 0.427
4 4.01 50 25 100 0.350
5 4.01 50 25 100 1.405
6 4.02 50 25 100 0.317
7 4.02 50 25 100 1.352
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CÁLCULOS:

1.- MÉTODO GRÁFICO (Curva de calibración)

CURVA DE CALIBRACION
2

1.5
Abs

1 y = 482.8x - 0.0825

0.5

0
0 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005
Concentracion mg/L

Formula:
𝑦 = 482.8𝑥 − 0.0825
𝐴𝑏𝑠 = 482.8𝐶𝑜𝑛 − 0.0825
𝐴𝑏𝑠 + 0.0825
𝐶𝑜𝑛 =
482.8

0.317 + 0.0825 𝑚𝑔
𝐶𝑜𝑛 = = 8.27𝑥10−4
482.8 𝑚𝑙
2.- MÉTODO ANALÍTICO
 Cálculo de la absortividad media
𝐴𝑏𝑠
𝑎=
𝑏𝑥𝑐

0.382 𝑚𝑙
𝑎1 = 𝑚𝑔 = 152.8 𝑐𝑚. 𝑚𝑔
2.5 𝑐𝑚𝑥 0.001
𝑚𝑙

0.879 𝑚𝑙
𝑎2 = 𝑚𝑔 = 175.8 𝑐𝑚. 𝑚𝑔
2.5 𝑐𝑚𝑥 0.002
𝑚𝑙

1.429 𝑚𝑙
𝑎3 = 𝑚𝑔 = 190.5 𝑐𝑚. 𝑚𝑔
2.5 𝑐𝑚𝑥 0.003
𝑚𝑙

1.808 𝑚𝑙
𝑎4 = 𝑚𝑔 = 180.8 𝑐𝑚. 𝑚𝑔
2.5 𝑐𝑚𝑥 0.004
𝑚𝑙
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𝑎1 + 𝑎2 + 𝑎3 + 𝑎4 152.8 + 175.8 + 190.5 + 180.8 𝑚𝑙


𝑎𝑚 = = = 174.9
4 4 𝑐𝑚. 𝑚𝑔

 Cálculo de la concentración de la muestra


𝐴𝑏𝑠
𝑐𝑚 =
𝑏 𝑥 𝑎𝑚

0.317
𝑐𝑚 = = 7.25𝑥10−4 𝑚𝑔/𝑚𝑙
𝑚𝑙
2.5𝑐𝑚 𝑥 174.9 𝑐𝑚. 𝑚𝑔
 Cálculo de la concentración para las diluciones

𝑚𝑔
7.25𝑥10−4 𝑥 100 𝑚𝑙 = 25 𝑚𝑙 𝑥 𝐶2
𝑚𝑙
𝑚𝑔
𝐶2 = 2.9𝑥10−3
𝑚𝑙
𝑚𝑔
2.9𝑥10−3 𝑥 50 𝑚𝑙 = 0.145 𝑚𝑔
𝑚𝑙

 Cálculo del peso de hierro en miligramos por ciento

0.145 𝑚𝑔
= 𝑥 100 = 3.61 𝑚𝑔/%
4.02 𝑔

TABLA DE RESULTADOS DEL ANÁLISIS


No Muestra mg %hierro
1 15.75
2 1.33
3 4.40
4 3.94
5 15.71
6 3.56
7 15.18

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
No se puede realizar un análisis estadístico debido a las variaciones tan grandes que presentan los
datos, esto se debió a errores en la práctica.

CONCLUSION
Se logra analizar el contenido de hierro en leche en polvo, gracias al método de espectrofotometría,
generándose primero la curva de calibración y posterior selección de longitud de onda.

Apellidos y nombres: Uscamayta Ccuito, Alicia Judith

Firma del alumno: __________________________


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CUESTIONARIO

1.- Efectue la reacción entre el hierro (II) y el reactivo fenantrolina


La reacción de formación del complejo se describe según la ecuación:

Fe2+ + 3PhH+ ↔ Fe(Ph)3 2+ + 3H+

2.- Para que sirve el blanco y como esta constituido en la determinación de hierro por el método
de la fenantrolina
Todo método espectrofotométrico se basa en la comparación de la absorbancia de una sustancia
de concentración desconocida con la de una solución de la misma sustancia cuya concentración se
conoce a la cual se denomina solución patrón o estándar
Para la medición de la absorbancia se tiliza una sustancia llamada blanco, con el blanco se calibra
el instrumento a absorbancia igual a 0, o sea 100% de transmisión

Para la determinación de hierro por el método de la fenantrilina el blanco esta constituido por
solución Buffer, hidrixilamina y fenantrolina

3.- Si una muestra contiene hierro (II) y hierro (III), diseñe una técnica mediante un diagrama de
bloques para analizar estos componentes por separado.
Muestra de hierro II

Calcinar la muestra a 550°C

Diluir en Hcl 6 M

Calentar a sequedad

Añadir 25 ml de agua destilada

Calentar

Llevar a una fiola de 50 ml y enrazar con


agua destilada

Medir una alicuora de 25 ml

Llevar a una fiola de 100 ml

Añadir la solucion buffer, solucion de hidroxilamina y la solucion de


fenantrolina

Envasar y medir la absobancia


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Muestra de hierro III


Calcinar la muestra a 550°C

Diluir en Hcl 6 M

Calentar a sequedad

Añadir 25 ml de agua destilada

Llevar a una fiola de 50 ml y enrazar con agua


destilada

Medir una alicuora de 25 ml

Llevar a una fiola de 100 ml

Añadir la solucion buffer, solucion de cloruro de hidroxilamina y la solucion de


TIocianato de potasio

Envasar y medir la absobancia

4.- Que tipos de interferencia puede presentarse en un análisis espectrofotométrico

Intereferencias físicas

Este tipo de interferencias está relacionado con la efectividad con que la solución es transportada
a la llama y son causadas por diferencias en las propiedades físicas de las soluciones: viscosidad,
tensión superficial o presión de vapor.

Un ejemplo de estas interferencias se observa en la determinación de Mg y Cu en presencia de


ácido fosfórico. A mayor concentración de H3PO4 la viscosidad de la solución aumenta,
disminuyendo la velocidad de aspiración de ella y una fracción menor llega a la llama,
produciéndose una absorbancia menor de la muestra.

También la presencia de solventes orgánicos produce este tipo de interferencias debido a un


aumento en la eficiencia de la nebulización (menor viscosidad y menor tensión superficial), lo que
produce un aumento de la absorbancia.

Una forma de compensar este tipo de interferencia es preparar las soluciones estándar con los
mismos componentes de la matriz de la solución problema.
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Interferencias químicas

Interferencia química es cualquier alteración en el número total de átomos libres formados por
unidad de volumen debido a la formación de compuestos químicos termoestables. Las causas más
comunes de éstas son:

i. Disociación incompleta de la molécula formada o formación de una sal difícil de fundir.

El efecto del fosfato en la determinación de calcio es un ejemplo de este tipo de


interferencia. El calcio con el fosfato forman el fosfato de calcio, el cual se transforma en
pirofosfato de calcio, que es relativamente estable en una llama aire/acetileno. Así la
cantidad de átomos libres de calcio generados en la llama será menor que la obtenida con
una solución de calcio de igual concentración, pero sin presencia de fosfato, provocando
una disminución de la señal.

Existen otros componentes refractarios que dan también una disminución de la señal de
absorción del elemento de interés. Tal es el caso de silicatos, aluminatos y pirosulfatos de
calcio, magnesio, estroncio y bario.

ii. Reacción espontánea de los átomos libres con otros átomos o radicales presentes en el
medio ambiente.

Esta interferencia es causada por la formación de óxidos e hidróxidos u ocasionalmente


carburos o nitruros, debido a la reacción de los átomos libres con los productos de la
combustión de la llama. Aproximadamente unos 30 metales no se pueden determinar con
llama aire/acetileno (ejemplo: aluminio, silicio, boro, elementos lantánidos, etc.). La
magnitud de la interferencia va a depender del tipo de estequiometría de la llama.

Las interferencias químicas pueden ser minimizadas por las siguientes formas:

 Empleo de llamas con mayores temperaturas. Como ejemplo tenemos la llama


acetileno/óxido nitroso, la que es capaz de descomponer totalmente los compuestos
refractarios.
 Agregar a la solución muestra un elemento “buffer”, el cual forma con el elemento
interferente un compuesto más estable que con el elemento a determinar. El ejemplo más
conocido es la adición de lantano o estroncio en la determinación de calcio en presencia
de fosfato.
 Preparación de las soluciones estándar de modo tal que su composición sea lo más
semejante con la de la solución problema. Esta alternativa es difícil de aplicar debido a que
requiere un conocimiento completo de la muestra.

Interferencia de ionización

Un átomo neutro en su estado fundamental puede ser ionizado a temperaturas elevadas. Estos
iones exhiben propiedades espectroscópicas diferentes a un átomo neutro y no pueden ser
determinados por espectroscopia de absorción atómica. Así, el número total de átomos
disponibles para la absorción atómica. Así, el número total de átomos disponibles para la
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absorción de la radiación por unidad de volumen disminuye, lo que produce una pérdida de
sensibilidad. Esta interferencia depende tanto de la temperatura de la llama como del potencial de
ionización del elemento en estudio.

La ionización puede ser detectada notando que la curva de calibración tiene una desviación
positiva a concentraciones altas, dado que la fracción de átomos ionizados es menor a
concentraciones mayores. Estas interferencias se pueden eliminar agregando a todas las
soluciones estándar y a la muestra un exceso del elemento que sea fácilmente ionizable en la
llama, por ejemplo: el sodio, potasio, litio o cesio, o mediante el empleo de una llama de menor
temperatura.

Interferencias espectrales

En este tipo de interferencias, la radiación del elemento a determinar es directamente


influenciada, existiendo interferencias espectrales de línea e interferencias espectrales de banda:

 Las interferencias espectrales de línea ocurren cuando hay superposición de dos líneas
atómicas o cuando éstas no son resueltas por el monocromador.

Un ejemplo para el primer caso se tiene en la determinación de trazas de zinc en una


matriz de hierro, debido a que la línea de absorción del hierro (213.86 nm) se superpone a
la línea de resonancia del zinc (213.86 nm).

El empleo de lámparas multielementales fabricadas con una combinación inadecuada de


elementos puede producir interferencias del segundo tipo, si dentro de la banda espectral
del monocromador se encuentra una línea de resonancia de otro elemento junto a la del
elemento a determinar.

En general este tipo de interferencias no son frecuentes debido a la naturaleza muy


específica de la longitud de onda que se usa en espectroscopia de absorción atómica. Si se
llegan a presentar se pueden eliminar seleccionando una segunda línea de resonancia del
elemento de interés (probablemente se obtenga mayor sensibilidad o empleando una
ranura del monocromador más angosta).

 Las interferencias espectrales de banda se producen debido a la absorción de la radiación


por moléculas o radicales, y por dispersión de la radiación por sólidos. Para ambos efectos,
que en principio son distintos, se emplea el término absorción de fondo. Aquí existe una
pérdida de radiación no específica que lleva a absorbancias mayores que la absorbancia
obtenida por el analito. La señal está compuesta por la absorción del elemento a
determinar más la absorción no específica.

5.- Calcular la absortividad molar del complejo rojo anaranjado fe-fenantrolina, si se trató un
volumen alícuota de 5 ml de una solución estandar con un total de 20 microgramos de hierro y
luego se diluyó a un volumen final de 10 ml. La absorbancia de la solución medida a 510 nm es
de 0.4 y se empleó una celda de 1 cm

𝐴𝑏𝑠 = 𝜀 ∗ 𝑏 ∗ 𝑐
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5𝜇𝑔 1𝑔 1𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑚𝑜𝑙


𝑐= ∗ ∗ = 8.93𝑥10−6
10𝑚𝑙 1000000𝜇𝑔 0.056𝑔 𝑚𝑙

𝐴𝑏𝑠
𝑐=
𝑏∗𝜀
0.4
𝜀=
𝑚𝑚𝑜𝑙
1𝑐𝑚 ∗ 8.93𝑥10−6
𝑚𝑙
𝑚𝑙
𝜀 = 44792.83
𝑐𝑚 ∗ 𝑚𝑚𝑜𝑙

6.- Que otros métodos espectroscópicos del visible conoce para la determinación de hierro,
señale sus fundamentos brevemente

Determinación Espectrofotométrica de Fe(II) utilizando Ferrozina como reactivo cromogénico


La sal mono o disódica del ácido 3-(2-piridil)-5,6,-difenil-1,2,4 triazina-4'-4" disulfónico se combina
como ligando con el Fe(II) gracias a los electrones no compartidos de los átomos de nitrógeno del
grupo ferroína. Las condiciones óptimas de formación de este complejo exigen un medio acetato
en un intervalo de pH entre 4.0 y 5.5. El complejo que se forma, de color magenta, presenta un
máximo de absorción a 562 nm y es apto para la determinación espectrofotométrica de bajas
concentraciones de Fe(II) en disolución acuosa .

7.- Calcular la concentración del analito Fe determinado en la práctica mediante el método de


regresión lineal

Abs Linear (Abs)

2
1.5
y = 482.8x - 0.0825
1 R² = 0.9949
Abs

0.5
0
0 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005
Concentrcion (mg/ml)

𝑦 = 482.8𝑥 − 0.0825
𝐴𝑏𝑠 = 482.8𝑐 − 0.0825

Para
Abs = 0.317
0.317 = 482.8 𝐶 − 0.0825
0.317 + 0.0825
𝐶=
482.8
𝑚𝑔
𝐶 = 8.27𝑥10−4
𝑚𝑙
Laboratorio de Análisis Instrumental en Ingeniería II 16

PROCEDIMIENTO
Preparación de soluciones estándares o patrones

Agregar a una fiola solución Medir la


Stock. Luego se agrega a cada absorbancia de
solución de hidroxilamina, las soluciones
solución de fenantrolina y patrón en el
ajuste el pH de la solución a 3.5 equipo
con la solución buffer; se espectrofotométr
diluye con agua destilada hasta ico
el aforo

Preparación de la muestra

Calcinar Disolver
la con de
muestra HCl 6 M
a 550°C

Calentando En fiola de 100 ml


suavemente enrasar la solución
evitando llegar a obtenida, luego
sequedad. Diluir medir una alícuota
con agua de 25.0 ml,
destilada y colocarla en una
calentar. fiola de 50.0 ml

Se les da el Medir la
mismo absorbancia
tratamiento de cada
que las muestra a la
soluciones longitud de
estándar hasta onda de
obtener el color trabajo.