Manual de Practicas Parasitologia II BUAP PDF

BENÉMERITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
VICERRECTORÍA DE DOCENCIA
DIRECCIÓN GENERAL DE EDUCACIÓN SUPERIOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LICENCIATURA EN QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO
AREA: ANÁLISIS CLÍNICOS
ASIGNATURA:
LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA II
MANUAL
CÓDIGO: QFBM-262L
CRÉDITOS: 4
FECHA: MAYO 2009

NIVEL EDUCATIVO: Licenciatura
NOMBRE DEL PROGRAMA EDUCATIVO: Licenciatura en Químico Farmacobiólogo
MODALIDAD ACADÉMICA: Presencial
NOMBRE DE LA ASIGNATURA: PARASITOLOGÍA II
UBICACIÓN: Nivel Formativo
CORRELACIÓN:
Parasitología I, Biología celular y molecular,
Anatomía e Histología, Fisiología I y II,
– ASIGNATURAS PRECEDENTES: Microbiología, Inmunología y Hematología I ,
Química clínica I.
– ASIGNATURAS CONSECUENTES: Integradoras
Estructura y funcionamiento de; la célula,
órganos, tejidos, aparatos y sistemas.
Embriología, métodos de estudio de la
célula y tejidos, incluyendo microscopía y
sus variantes. Clasificación de los seres
– CONOCIMIENTOS vivos. Respuesta inmune y métodos de
diagnóstico. Procesos bioquímicos,
Hepatopatías y métodos de diagnóstico.
Clasificación de Anemias, hematopoyesis,
citometría hemática. Métodos de biología
molecular.
Capacidad de observación, análisis, crítica,
– HABILIDADES Y ACTITUDES integración, actitud de colaboración y de
trabajo en equipo.
– VALORES PREVIOS: Responsabilidad, organización
CARGA HORARIA DEL ESTUDIANTE

HORAS POR
NÚMERO
PERIODO
CONCEPTO DE
(PERIODO = 16
CRÉDITOS
SEMANAS)
64
HORAS TEORIA Y PRÁCTICA. (2 HT/Semana = 32 4
2 HP/Semana = 32)
HORAS DE PRÁCTICA PROFESIONAL CRÍTICA 0 0
HORAS DE TRABAJO INDEPENDIENTE 0 0
TOTAL 64 4
MC Alma Delia Ramírez Guarneros, MC

María de Lourdes Martínez Moreno, MC
AUTORES:
Martha Alicia Salgado Juárez, MC Rafael
Muñoz Bedolla, MC Maricela Torres y Soto,
MC Jose Manuel Rodriguez Luna
FECHA DE DISEÑO: MAYO 2009
FECHA DE LA ÚLTIMA
Mayo 2009
ACTUALIZACIÓN:
MC María de Lourdes Martínez Moreno MC
Alma Delia Ramírez Guarneros, MC Martha
REVISORES: Alicia Salgado Juarez, MC Rafael Muñoz
Bedolla, MC Maricela Torres y Soto, MC
Jose Manuel Rodriguez Luna
Se realizó un análisis del programa del plan
educativo anterior, y se actualizó de acuerdo
SINOPSIS DE LA REVISIÓN Y/O a los criterios de clasificación de las
ACTUALIZACIÓN enfermedades, de la OMS y de los
requerimientos del proyecto Minerva de
nuestra universidad.
PERFIL DESEABLE DEL PROFESOR (A) PARA IMPARTIR LA ASIGNATURA:
DISCIPLINA PROFESIONAL: Químico Farmacobiólogo

NIVEL ACADÉMICO: Maestría
5 años y haber impartido al menos una vez el curso
EXPERIENCIA DOCENTE:
de Parasitología I
EXPERIENCIA PROFESIONAL: 2 años en el área
Elaborada en forma conjunta por la Secretaria de Salud y de Medio Ambiente y

Recursos Naturales, la norma oficial mexicana NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002,
Protección Ambiental - Salud Ambiental - Residuos Peligrosos Biológico - Infecciosos –
Clasificación y Especificaciones de Manejo, fue publicada en el Diario Oficial de la
Federación el 17 de Febrero del 2003 y sustituye a la NOM-087-ECOL-1995.
Los RPBI se consideran como residuos peligrosos y como tal se debe establecer un
plan integral para su manejo, almacenamiento, transporte, tratamiento y disposición
final.
PRINCIPALES MODIFICACIONES EFECTUADAS EN LA NOM-087-SEMARNAT-
SSA1-2002.
I. Criterios para considerar un residuo como RPBI
II. Nueva clasificación de los RPBI
III. Cantidad de sangre o fluido corporal en los RPBI
IV. Niveles de los establecimientos generadores
V. Periodo de almacenamiento temporal de los RPBI en los establecimientos generadores.
VI. Atribución a la Secretaria de Salud, para la vigilancia de la norma.
I. Los lugares que ofrecen atención médica y los centros de investigación, son
considerados establecimientos generadores de materiales contaminados por agentes
biológico-infecciosos. Estos desechos se denominan Residuos Peligrosos Biológico-
Infecciosos (RPBI´s), su manejo y disposición inadecuados, representa un riesgo para
la salud del personal que labora en estos sitios, así como para la salud de la población
aledaña, ocasionando además, el deterioro del medio ambiente. Los microorganismos
patógenos, virus, parásitos y priones (estructuras proteicas) son ejemplos de agentes
biológicos-infecciosos. Para que un microorganismo sea capaz de producir enfermedad,
es decir, que sea un Agente Biológico-Infeccioso, debe ocurrir lo siguiente: tener una
concentración suficiente (inóculo), estar en un ambiente propicio (supervivencia), en
presencia de una vía de entrada en un hospedero susceptible.
II. En la Nueva clasificación, los RPBI´s son:

1. La sangre y sus componentes únicamente en estado líquido.
2. Los cultivos de agentes biológico-infecciosos generados en:
a. Los procedimientos de diagnóstico e investigación.
b. La producción y el control de agentes biológico-infecciosos.
3. Los utensilios desechables usados para contener, transferir, inocular y mezclar
cultivos de agentes biológico-infecciosos.
4. Los tejidos, órganos y partes que se extirpan o remueven durante las autopsias,
las cirugías o algún otro tipo de intervención quirúrgica que no estén
conservados en solución de formol.
5. Las muestras biológicas empleadas en los análisis clínicos (excepto las
muestras de orina y de excremento), y aquellas usadas en los análisis
patológicos.
6. En los centros de investigación, los cadáveres y las partes de los animales que
fueron inoculados con agentes entero patógenos.
7. Los residuos no anatómicos:
a. Los recipientes desechables que contengan sangre líquida.
b. Los materiales desechables que contengan fluidos y secreciones
corporales, provenientes de los pacientes de quienes se sospechen o
exista un diagnóstico de una enfermedad infecto-contagiosa como la
tuberculosis.
c. Los materiales de curación empapados de sangre líquida o de cualquier
otra secreción o líquido corporal.
d. Los materiales absorbentes utilizados en las jaulas de los animales que
hayan sido expuestos a agentes entero patógenos.
8. Los materiales punzo cortantes desechables como las hojas de bisturí, las agujas
de sutura y los estériles de catéter. El material de vidrio de laboratorio, que se
haya roto al momento de ser manipulado, se deberá desinfectar o esterilizar y
ya no se considerará como RPBI´s, por lo que se podrá disponer
posteriormente como residuo municipal.
La disposición general para el desecho de RPBI´s en el laboratorio queda de la
siguiente manera:
TIPO DE RESIDUO ESTADO FISICO ENVASADO COLOR
Recipientes
Sangre Líquidos Rojo
herméticos
Cultivos y cepas de
Sólidos Bolsas de polietileno Rojo
agentes infecciosos
Patológicos Sólidos Bolsas de polietileno Amarillo
Residuos no
Sólidos Bolsas de polietileno Rojo
anatómicos
Objetos Recipientes rígidos
Sólidos Rojo
punzocortantes polipropileno
III. Para que un material de curación se considere como RPBI´s, debe ser desechable y
estar goteando, chorreando o escurriendo sangre o cualquier líquido corporal
contemplado en la norma.
IV. Niveles de los Establecimientos Generadores
NIVEL I NIVEL II NIVEL III
Establecimientos de atención
médica hasta con 5 camas e
Unidades hospitalarias de 6 hasta Unidades hospitalarias de más de
instituciones de investigación con
60 camas. 60 camas.
excepción de los señalados en el
Nivel III.
Laboratorios clínicos y bancos de Laboratorios clínicos y bancos de Centros de producción e

sangre que realicen análisis de 1 a sangre que realicen análisis de 51 investigación experimental en
50 muestras al día. a 200 muestras al día. enfermedades infecciosas.
Bioterios que se dediquen a la Laboratorios clínicos y bancos de

Unidades hospitalarias
investigación con agentes sangre que realicen análisis a más
psiquiátricas.
biológico-infecciosos. de 200 muestras al día.
Establecimientos que generen de Establecimientos que generen

Centros de toma de muestras para
25 a 100 kilogramos al mes de más de 100 kilogramos al mes de
análisis clínicos.
RPBI´s. RPBI´s
V. Período de almacenamiento temporal de los RPBI´s en los establecimientos

generadores.
NIVEL I NIVEL II NIVEL III
30 días máximos de 15 días máximos de 7 días máximos de

almacenamiento temporal. almacenamiento temporal. almacenamiento temporal.
No requiere de área específica Si requiere de área específica Si requiere de área específica

para el almacenamiento temporal. para el almacenamiento temporal. para el almacenamiento temporal.
Se podrán ubicar los contenedores Deberá cumplir con las Deberá cumplir con las
específicos para los RPBI´s* en el especificaciones establecidas en especificaciones establecidas en
lugar más apropiado dentro de sus la NOM-087-SEMARNAT-SSA1- la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-
instalaciones, de manera tal que 2002, para el área de 2002, para el área de
no obstruyan las vías de acceso. almacenamiento temporal. almacenamiento temporal.
*Los contenedores pueden ser plásticos o metálicos, con señalamiento del símbolo universal de RPBI´s y no mezclarlos con la basura municipal.
VI. Atribución a la Secretaria de Salud. Corresponde a la Secretaria de salud regular y

vigilar el equipamiento, instalación y funcionamiento de los servicios médicos que son
los principales generadores de los RPBI´s, por ello participa complementariamente con
la SEMARNAT en la regulación y vigilancia de la norma, para lo cual se estableció en el
cuerpo de la misma, la disposición de crear las Bases de Colaboración que firmarán
ambas dependencias y que serán publicadas en el Diario Oficial de la Federación, en las
que se especificarán los puntos de la norma que vigilarán cada una de ellas.
NORMAS DE SEGURIDAD Y REGLAMENTO EN

EL LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA II
El alumno deberá:
1- Siempre presentarse con bata blanca, incluso si en la sesión sólo se llevan a
cabo seminarios y o exámenes.
2- Cumplir con las actividades y o tareas solicitadas por la profesora.
3- Asistir puntualmente a las sesiones, sólo tendrá 10 minutos de tolerancia, una
vez que se pase lista, si llega después, se considerará como falta.
4- Colocar fuera de las mesas de trabajo, mochilas, suéteres, chamarras u otros
objetos que no requiera para la realización de la práctica.
5- Traer el material biológico o de otro tipo solicitado por la profesora.
6- Siempre traer guantes, cubreboca y perilla para las pipetas.
7- Siempre traer jabón y papel sanitario para el aseo de las manos y para la
limpieza del material de vidrio y de las mesas de trabajo.
8- Solicitar el material que requiere para las prácticas por medio de un vale, ya sea
a la profesora o a la persona encargada del área del material y reactivos.
9- Manejar con mucho cuidado el material, las soluciones o reactivos.
10-Manejar con mucho cuidado las muestras fecales ya que son potencialmente
infectantes.
11-Siempre pipetear las soluciones, con la perilla correspondiente y nunca con la
boca.
12-Dejar los frascos de las soluciones en el lugar de donde los tomó, después de su
uso.
13-No desechar soluciones de colorantes, papeles, muestras biológicas sólidas, ni
material de vidrio roto (portaobjetos, cubreobjetos, tubos) en las tarjas.
14- No dejar pipetas contaminadas directamente sobre las mesas.
15-Colocar el material contaminado, así como las muestras fecales, en las bolsas o
recipientes correspondientes, de acuerdo a la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-
2002, Protección ambiental-Salud ambiental- Residuos peligrosos biológicos
infecciosos- Clasificación y especificaciones de manejo, y de acuerdo a lo
indicado por la profesora.
16-Manejar y cuidar los microscopios de acuerdo a la información proporcionada al
inicio del curso.
17-Anotarse en la libreta que está al lado del microscopio que utilice, y en su caso
reportar cualquier anomalía o desperfecto hallado en el microscopio antes o
durante su manejo.
18-Limpiar el aceite de inmersión de los objetivos del microscopio, de acuerdo a las
indicaciones dadas por la profesora.
19-Al término de la práctica, dejar desconectados los microscopios, cubrir el
microscopio con su correspondiente funda y dejar cerrada la caja con llave.
20-Al término de la práctica, dejar limpias y desinfectadas las mesas, libres de
papeles, material biológico o de otro tipo.
21- Al concluir la práctica, entregar el material que empleó según las indicaciones
de la profesora, así como solicitar la devolución del vale.
22- En caso de romper algún material, deberá reponerlo a la brevedad posible, para
lo cual se le retendrá el vale.
23- En caso de algún incidente o accidente, deberá informarle a la profesora, para
que se tomen las medidas pertinentes.
24-Antes de retirarse del laboratorio, checar que no se le olvide algo, ya que la
profesora no se hará responsable por manuales, celulares, libros, batas, etc,
olvidados.
PROGRAMA DE LA ASIGNATURA
LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA II
PRESENTACIÓN GENERAL DEL PROGRAMA

El Laboratorio de Parasitología II, proporciona al alumno los conocimientos prácticos de
la morfología parasitaria así como la metodología que se requiere para la búsqueda e
identificación de los parásitos de interés médico. Esto permitirá integrar el conocimiento
teórico con los métodos auxiliares para el diagnóstico, la prevención y el tratamiento
de las parasitosis.
La identificación de los parásitos por los métodos de laboratorio es una parte
fundamental del diagnóstico integral que realizan otros profesionales del área de la
salud, ya que el daño que producen los parásitos pueden manifestarse con una gran
gama de alteraciones anatómicas y fisiológicas, por lo que este laboratorio se relaciona
con las asignaturas de Química Clínica, Inmunología, Hematología e Histología y
Anatomía.
OBJETIVOS
Que el alumno:
1) Conozca los diferentes métodos que se utilizan para el diagnóstico de
enfermedades parasitarias por helmintos.
2) Aprenda a realizar los métodos mas frecuentemente utilizados en la práctica
profesional de los análisis clínicos.
3) Conozca el fundamento, la utilidad, las ventajas y las desventajas de las técnicas
de laboratorio.
4) Aprenda a buscar e identificar por sus características morfológicas a los
helmintos más frecuentes que afectan al humano.
5) Aprenda a diferenciar formas parasitarias de las estructuras no-parasitarias que
se pueden encontrar normalmente en las muestras biológicas.
6) Conozca a los artrópodos de interés médico más frecuentes en nuestro medio.
7) Conozca y aplique las medidas de seguridad e higiene así como las normas para
el desecho de material infecto contagioso, en el área de parasitología.
8) Desarrolle la habilidad y actitud del trabajo en equipo.
CRONOGRAMA
SEMANA PRACTICA NOMBRE PAGINA

1 SEMINARIO Métodos de diagnóstico directo para las
helmintiasis: coproparasitoscópicos,
métodos especiales, métodos de tinción.
Características generales de dichos
métodos, ventajas y desventajas de los
mismos y su importancia clínica
2 SEMINARIO Morfología, ciclo vital y métodos de
diagnóstico directo, de y para cada uno
de los helmintos a observar en las
prácticas del curso.
3 1 Observación de adultos y huevecillos de 11
nemátodos intestinales
4 2 Método coproparasitoscópico 14
cuantitativo por dilución de Stoll,
modificado.
cuantitativo de Kato-miura.
cuantitativo de Ferreira
7 5 Método especial de Graham. 30
8 6 Método especial de Harada –Mori 35
9 7 Observación de algunos nemátodos 40
tisulares
10 8 Observación de algunos adultos, 42
proglótidos y estadios larvarios de
cestodos.
11 9 Método especial del tamizado 45
12 10 observación de algunos tremátodos 49
13 11 Método coproparasitoscópico simple en 52
copas
14 12 Observación de algunos artrópodos de 56
interés médico
15 EXAMEN
BIBLIOGRAFIA
1) Atías Antonio. Parasitología médica. Edit.

Mediterráneo. Segunda reimpresión.
2) Becerril Flores – Romero Cabello. Parasitología médica, de las moléculas a la
enfermedad. Edit. Mc Graw Hill. Primera edición
3) Rodríguez Pérez Elba. Atlas de parasitología médica. Edit. Mc Graw Hill.
4) Salazar Schettino - Haro Arteaga - Cabrera Bravo. Diagnóstico morfológico de las
parasitosis. Edit. Francisco Méndez Cervantes. 2ª edición.
5) Shore García- Ash. Diagnóstico parasitológico, manual de laboratorio clínico.
Edit. Médica panamericana. Última edición
6) Tay-Lara-Velasco-Gutiérrez. Parasitología médica. Edit. Francisco Méndez
Cervantes. Última edición
7) Zaman Viqar. Atlas de Parasitología Médica. Edit. Médica panamericana. Última
edición.
8) W. Peters y H. M. Gilles. Atlas a color de medicina tropical y Parasitología. Edit.
Year Book Medical Publishers.
PRÁCTICA Nº 1
OBSERVACIÓN DE ADULTOS Y HUEVECILLOS

DE NEMÁTODOS INTESTINALES.
OBJETIVOS
a) Observar macro y microscópicamente e identificar adultos de Ascaris lumbricoides,
Trichuris trichiura, Enterobius vermicularis, Strongyloides stercoralis y de uncinarias
b) Observar e identificar huevecillos de los nematodos mencionados anteriormente.
c) Observar cortes histológicos transversales de un adulto de Ascaris lumbricoides, e
identificar sus estructuras internas.
d) Conocer algunos métodos de diagnóstico para los nematodos mencionados
anteriormente.
INTRODUCCIÓN
Los Nematodos son los animales multicelulares más numerosos que actualmente viven
en la Tierra. Existen desde los polos hasta los trópicos, en todos los ambientes,
incluyendo desiertos, altas montañas y profundidades oceánicas
El Phylum Nematoda incluye a 80,000 especies descritas en la bibliografía científica,
aunque algunos investigadores calculan que existen realmente alrededor de un millón
de especies.
Los hay de vida libre (marina y terrestre) los cuales son abundantes, y parásitos, tanto
de animales como de plantas.
La palabra "Nematodo" significa "similar a un hilo" (del griego nema, "hilo", eidés u
oidos, "con aspecto de"). Se les conoce también como lombrices o gusanos
filamentosos, cuando se observan en un corte transversal, éste es redondo, de ahí el
nombre de gusanos redondos .
Características generales de los nematodos parásitos del humano.
Los nematodos son de forma cilíndrica, tienen el cuerpo alargado y no segmentado,
los extremos pueden terminar en punta o estar redondeados. Pueden medir de largo
unos cuantos milímetros hasta un poco más de un metro. La mayoría son de color
blanquecino, presentan simetría bilateral y dimorfismo sexual (sexo separado). El
macho tiene un extremo posterior curvado con espículas copulatorias y, en algunas
especies, una bolsa caudal denominada bursa o bolsa copulatríz. Generalmente el
tamaño de la hembra es mayor que el del macho, llegando a ser el doble de largo en
algunos casos.
Los nematodos están cubiertos de una capa externa llamada cutícula, que puede ser
lisa o estriada y presenta ornamentos. Presentan sistema digestivo y aparato
reproductor completos, sistema excretor y nervioso, todos ellos incluidos en el
pseudoceloma (cavidad) y el líquido que contiene éste. Carecen de sistema circulatorio.
Los nematodos pueden infectar casi todos los órganos de la economía del humano,
ocasionando serias enfermedades, que pueden tener un desenlace fatal.
La OMS ha estimado que en el mundo existen 3,500 millones de personas afectadas
por helmintos (2004) y de los parásitos que más frecuentemente tienen repercusión
sobre el crecimiento y desarrollo físico y cognitivo en los niños, algunos son nematodos,
por ejemplo:
 Ascaris lumbricoides causa desnutrición y 60,000 muertes al año
 Necator americanus y Ancylostoma duodenale causan anemia a un cuarto de la
población mundial.
 Trichuris trichiura causa diarrea, anemia y apendicitis a 800 millones de
personas. Anualmente causa 65,000 muertes.
Requerimientos.
1-Microscopio óptico compuesto
2- Microscopio óptico estereoscópico o lupa
3-Colección de laminillas con ejemplares de nematodos intestinales, adultos y
huevecillos.
4- Ejemplares de adultos de nematodos intestinales.
Desarrollo de la práctica.
a) Observe con ayuda de una lupa o bien en el microscopio estereoscópico,y si es
necesario, también con el microscopio compuesto, los adultos de los nematodos,
recorra de extremo a extremo al gusano, identifique la parte anterior y la posterior,
estructuras presentes en ellas, el sexo y aparatos y sistemas.
b) Observe también la forma, el color y el tamaño (mida con ayuda de una regla).
c) En el caso de los ejemplares más grandes haga la observación sólo
macroscópicamente.
d) Compare las características entre las especies de los nematodos observados.
e) Las laminillas que contengan huevecillos de los nematodos, obsérvelas en el
microscopio compuesto a seco débil y fuerte, observe la forma, color, estructuras
internas y tamaño con respecto al área del campo en seco débil y/o en seco fuerte.
f) Reporte las observaciones de acuerdo al formato que le indique su maestro(a)
HOJA DE REGISTRO DE OBSERVACIONES MICROSCOPICAS
NOMBRE DEL PARASITO_____________

Grupo Taxonómico____________________
Fase infectante________________________
Fase Diagnóstica_______________________
Parasitosis____________________________
Localización Anatómica_________________
Signos y síntomas______________________
_____________________________________
Producto biológico______________________
Técnica Utilizada_______________________
Criterios Morfológicos:
- Tamaño______________________
- Forma_______________________
- Estructuras internas____________
- Estructuras externas____________
- Afinidad Tintorial_____________
NOTAS:
Bibliografía
1-Atías Antonio. Parasitología médica. Edit. Mediterráneo. Segunda reimpresión.
2-Tamayo H. Manuel. Nematodos. Disponible en

www.monografias.com/trabajos5/.../nemato2.shtml -
3-Tay-Lara-Velasco-Gutiérrez. Parasitología médica. Edit. Francisco Méndez

4-Uribarren Berrueta Teresa. Generalidades de nematodos. Departamento de

Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, UNAM. Disponible en
www.facmed.unam.mx
PRÁCTICA Nº 2
MÉTODO COPROPARASITOSCÓPICO CUANTITATIVO
POR DILUCIÓN DE STOLL, MODIFICADO
OBJETIVOS
a) Aprender a realizar un método coproparasitoscópico cuantitativo por dilución, por la

técnica de Stoll.
b) Buscar e identificar huevecillos y/o larvas de algunos helmintos intestinales
c) Cuantificar huevecillos de helmintos por mililitro de materia fecal
d) Conocer las ventajas y desventajas de dicho método.
I.- INTRODUCCIÓN
Este método fue descrito y publicado en 1923 por Stoll y colaboradores, para la
cuantificación de huevos de uncinarias al hacer una dilución 1:15 de las heces con
hidróxido de sodio 0.1 N
Debido a sus características es uno de los métodos coproparasitoscópicos más
utilizado, sobre todo en trabajo de campo para estudios epidemiológicos, no sólo para
uncinariosis, sino también para otras helmintiosis como ascariosis o tricocefalosis, en
las que se requiere hacer una evaluación de la intensidad.
Por ser un método de dilución sus cálculos son muy simples.
Una desventaja en el método original es el uso de probetas graduadas con tapón
esmerilado de 100 ml, lo que además requiere de mayor cantidad de la solución
diluyente, 56 ml hidróxido de sodio 0.1 N, y con las heces se afora hasta 60 ml..Razón
por la cual se ha hecho una modificación de la técnica que consiste en una reducción
de la cantidad de la solución diluyente y de la cantidad de la materia fecal a una cuarta
parte, utilizando tubos de ensaye y respetando la dilución de 1:15, así como los factores
de dilución de acuerdo a la consistencia de la materia fecal.
II.- FUNDAMENTO
Éste método se basa en los principios de dilución, saponificación, aclaramiento y
homogenización.
El hidróxido de sodio décimonormal al ponerse en contacto con las grasas de la
muestra fecal, las saponifica, hace que los huevos de los helmintos sean menos
pegajosos. Además el hidróxido desinfecta y desodoriza la muestra.
III.- MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO
 Muestra fecal adecuadamente recolectada, positiva a huevos de helmintos
 Tubos de ensaye de 150 mm X 15 mm, con marcas de aforo a 14 y 15 ml.
 Tapones de caucho para los tubos
 Pipetas de 1 ml graduadas en milésimas
 Pipetas graduadas de 10 ml o probetas graduadas de 10 ml
 Portaobjetos de 25 X 76 mm.
 Cubreobjetos de 22 X 40 mm.
 Perlas de vidrio de 5 mm de diámetro
 Aplicadores de madera
 Gradilla
 Sol’n de hidróxido de sodio 0.1 N
 Agua destilada
 Microscopio compuesto óptico.
IV.- TÉCNICA (PROCEDIMIENTO)
1) Determinar primero la consistencia de la muestra fecal.

2) En el tubo de ensayo agregar hidróxido de sodio 0.10 N hasta la marca de 14 ml.
3) Con un aplicador de madera agregar la muestra de heces poco a poco hasta que
llegue a la marca de 15 ml, dejándola caer en el centro de la solución, no debe
quedar embarrada en las paredes del tubo, ni rebasar la marca.
4) En el caso de que la muestra fecal sea dura, esperar unos 5 min a que se
reblandezca.
5) Agregar de 6-8 perlas de vidrio al tubo
6) Poner el tapón en el tubo cuidando que ajuste bien.
7) Agitar vigorosamente durante un minuto o hasta que la suspensión esté
homogénea, debe detenerse el tapón con un dedo para evitar que se bote la
suspensión.
8) Colocar el tubo en la gradilla y quitar el tapón con cuidado.
9) Tomar con una pipeta de 1 ml, inmediatamente, 0.15 ml o 0.075 ml del centro de
la suspensión, ya que los huevos empiezan a precipitar al momento de dejar de
agitar. Si la pipeta se lleva al centro del tubo, el error debido a la precipitación de
los huevos disminuye.
Se recomienda el volumen de 0.15 ml ya que por ser un volumen mayor, es
mejor para el recuento de los huevos.
10)Colocar en un portaobjetos los 0.15 ml o 0.075 ml de la suspensión y colocar el
cubreobjetos con cuidado e vitando que se formen burbujas.
11)Observar la preparación primero con el objetivo 10X y luego con más cuidado
con el objetivo 40-45X. Usando poca luz.
12)La observación debe hacerse de manera sistemática abarcando toda la
superficie del cubreobjetos, incluso los bordes del mismo.
13)Hacer los cálculos correspondientes
14)Reportar lo observado
V.- CÁLCULOS
Debido a que el método consiste en una dilución de las heces, el factor y los cálculos
son sencillos, aritméticos, pero la consistencia de la muestra modifica la dilución, por lo
que el factor está en función de la consistencia, además hay que considerar también la
cantidad de la suspensión para hacer el conteo. Para corregir dicho error de dilución
hay que consultar la siguiente tabla:
Consistencia de las Cantidad de la Factor
heces suspensión
Duras 0.075 ml 200
Blandas o pastosas 0.075 ml 400
Líquidas 0.075 ml 800
Duras 0.15 ml 100
Blandas o pastosas 0.15 ml 200
Líquidas 0.15 ml 400
El resultado luego de multiplicar por el factor correspondiente, se expresa en: número

de huevos o larvas por mililitro de heces (h.ml.h) por especie de helminto.
Ejemplos:
A) Se contaron 40 huevos de uncinarias en 0.15 ml de la suspensión, la consistencia de
las heces fue pastosa.
Cálculo: 40 X 200 = 8,000
Resultado: 8,000 h.ml.h. de uncinarias
B) Se contaron 50 huevos de Ascaris lumbricoides en 0.15 ml de la suspensión, la
consistencia de las heces fue dura.
Cálculo: 50 X 100 = 5,000
Resultado: 8,000 h.ml.h. de Ascaris lumbricoides
Para determinar si la helmintiasis es masiva se consulta la siguiente tabla:
Helminto Número de huevecillos por Número de huevecillos por
día que elimina la hembra gramo o ml de heces,
indicativo de parasitosis
masiva
Ascaris lumbricoides 200-250 mil > 50,000
Trichuris trichiura 5-7 mil > 5,000
Uncinarias 5-30 mil > 4,000
Necator americanus 5-10 mil > 4,000
Ancylostoma duodenale 5-30 mil > 4,000
Fuente: diversos autores; Tay Lara, Atías Antonio, Cruz lópez.

VI.- VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Ventajas
a- Permite hacer un conteo de larvas y huevecillos de helmintos, para determinar la
intensidad de la helmintiasis.
b- Es sencillo y fácil de realizar.
c- No se invierte mucho tiempo para su realización.
d- Es relativamente económico por requerir de reactivos no costosos, material y
equipo con el que generalmente cuenta el laboratorio.
e- Por no requerir de centrifugación y las ventajas anteriores es ideal para trabajos de
campo
Desventajas
a. Debido a que no se usa ningún colorante para las formas parasitarias, los
quistes de protozoarios no pueden ser identificados, además de que se aclaran
demasiado con el hidróxido de sodio, por lo que éste método no es
recomendable para los mismos.
b. Como la cantidad de muestra es relativamente pequeña en comparación con la
cantidad del hidróxido de sodio 0.10 N, la posibilidad de evaluar parasitosis leves
o moderadas disminuye considerablemente.
VII.- PRECAUCIONES
 La sol’n de hidróxido de sodio debe manejarse con cuidado y nunca pipetear con
la boca.
 La toma de muestra de la suspensión en el tubo, después de la agitación, debe
tomarse como se indica, ya que los huevos de helmintos tienden a precipitar
inmediatamente después de cesar la agitación, y esto puede conducir a
resultados erróneos.
 El material biológico con el que se trabaja, es potencialmente infectante, por lo
que se recomienda utilizar guantes, cubre boca y abundante detergente para el
lavado de manos, material y área de trabajo (en éste caso usar desinfectantes
como el benzal).
FORMA DE REPORTAR.
 Nombre del médico que solicitó el estudio.
 Nombre del paciente.
 Sexo y edad del paciente.
 Fecha y hora de emisión de la muestra
 Fecha de realización del análisis de la muestra
 Nombre del método realizado, indicando si fue único o seriado (número de muestras)
 Resultado de los cálculos
 Estadio del parásito hallado.
 Género y especie del parásito.
 Otros hallazgos anormales.

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
_____________________________________
- Tamaño______________________
- Forma_______________________
NOTAS:
BIBLIOGRAFIA
1) Atías Antonio. Parasitología médica. Edit. Mediterráneo. Segunda reimpresión.
6)Tay-Lara-Velasco-Gutiérrez. Parasitología médica. Edit. Francisco Méndez
edición.
8) W. Peters y H. M. Gilles. Atlas a color de medicina tropical y Parasitología.
Edit. Year Book Medical Publishers.
PRÁCTICA Nº 3
DE KATO-MIURA.
OBJETIVOS
a) Aprender a realizar un método coproparasitoscópico cuantitativo, por la técnica de

Kato-Miura.
b)Cuantificar huevecillos de helmintos por gramo de heces
c) Buscar e identificar huevecillos de algunos helmintos intestinales

d)Conocer las ventajas y desventajas de dicho método, así como su importancia clínica.
I.-INTRODUCCIÓN
En 1954 Kato y Miura introdujeron la técnica de estudio de frotis grueso con buen
resultado para contar huevos de helmintos. Fue valorada por Komiya y Kobayashi en
1966 y Martin y Beaver en 1968 la reevaluaron, además introdujeron la innovación de
pasar las heces por una malla de alambre o de plástico para retirar fibras de la materia
fecal y restos de alimentos semidigeridos, para evitar la interferencia de las mismas en
la observación microscópica y permitir hacer una extensión uniforme del frotis que a su
vez evita la aclaración excesiva de la preparación. Estudios comparativos con otros
métodos coproparasitoscópicos han demostrado que la técnica de Kato es digna de
confiar, para el diagnóstico cuantitativo de helmintos, debido a sus características.
En 1972 Katz y colaboradores modificaron la técnica original de Kato-Miura, con el
diseño de un dispositivo de cartón o plástico con una perforación circular. Debido a ello
se considera como otro método llamado CPS cuantitativo de Kato-Katz.
II.-REQUERIMIENTOS
Reactivos y soluciones
Solución de Kato:
 Glicerina QP . . . . . . . 100 ml
 Agua destilada 100 ml . . . . . . 100 ml
 Solución acuosa de Verde de malaquita al 3% . . 1 ml
Mezclar bien todas las soluciones y/o reactivos, guardar en un frasco ámbar de vidrio,
de boca ancha, con tapa de baquelita. Es estable durante mucho tiempo.
Solución acuosa de Verde de malaquita al 3%
Disolver 3 gr del colorante en 50 ml de agua destilada y aforar a 100 ml, guardar en
frasco ámbar de vidrio con tapón esmerilado.
Material y equipo
 Muestra fecal adecuadamente recolectada, positiva a huevos de helmintos
 Papel celofán, de grosor medio, que pueda ser impregnado con la solución de
verde de malaquita, no resistente a la humedad, cortado en rectángulos de 22 X
40 mm.
 Portaobjetos de 25 X 76 mm.
 Aplicadores de madera
 Abatelenguas
 Pinzas
 Cajas de petri
 Malla de alambre de acero inoxidable cortada en cuadros de 4 cm de lado
 Balanza en la que se pueda pesar gramos y miligramos
 Microscopio compuesto óptico.
 Benzal
 Algodón o un trozo de franela para la limpieza de la mesa de trabajo
Importante
En el frasco que contiene la solución de Kato, se introducen los rectángulos de celofán.
Se depositan por un tiempo mínimo de 24 horas antes de ser usados.
III.- FUNDAMENTO
Este método se basa en la acción que tiene la glicerina como aclarador de los huevos
de helmintos, y el verde de malaquita como colorante de contraste.
IV.- PROCEDIMIENTO
1.-Revisar primero si la muestra fecal tiene fibras o restos gruesos de alimentos, en
ese caso tomar 2-3 gr de la muestra, colocarla en una caja de Petri desechable y sobre
las heces se superpone una malla de alambre, se presiona con un abatelengua para
tamizar la muestra. Se toma con un aplicador de madera una porción de heces, para
hacer el frotis como se indica a continuación:
2.-Tarar el portaobjetos, en la balanza.
3.-Colocar en el portaobjetos 50 mg de heces (± del tamaño de un grano de arroz).
4.-Tomar un rectángulo de papel celofán previamente humedecido en la solución de
verde de malaquita, y escurrir el exceso de la solución.
5.-Colocar el papel celofán sobre la muestra cuidando que no se presenten dobleces o
arrugas.
6.- Inmediatamente invertir la preparación sobre un papel filtro o absorbente y en una
superficie plana.
7.-Hacer presión uniforme con los dedos, haciendo que la muestra se extienda hasta
abarcar él área del rectángulo de celofán de 22 X 40 mm, evitando que no salga de los
bordes del papel celofán.
8.-Invertir nuevamente la preparación y dejar reposar 60 minutos a temperatura
ambiente o 30 minutos a 37ºC en estufa, ó con una lámpara de 50 Watts a una
distancia de 20 cm durante 15 minutos.
9.-Examinar al microscopio en objetivo seco débil y seco fuerte. Debe revisarse toda el
área del cubreobjetos de celofán, contando los huevos por especie de helminto, para
luego hacer los cálculos correspondientes y reportar sus resultados.
V.- CÁLCULOS
Debido a que el método consiste en pesar las heces, el factor y los cálculos son
aritméticos y sencillos, y se hacen de la siguiente manera.
Nº de huevos contados X 20 = Nº de de huevos por gramo de heces
20 es un factor constante que resulta del siguiente razonamiento:

Si en 50 mg de muestra se encuentra 1 huevo, como 1 gramo tiene 1000 mg, al hacer
una regla de tres:
Si en 50 mg ------ hay 1 huevo
En 1000 mg ------ cuántos huevos habrá
1000 dividido entre 50 = 20
El resultado luego de multiplicar por el factor correspondiente, se expresa en:

Número de huevos por gramo de heces (h.g.h) por especie de helminto.
Ejemplos:
A) Se contaron 50 huevos de Ascaris lumbricoides en la preparación
Cálculo: 150 X 20 = 3 000
Resultado: 3 000 h.g.h. de Ascaris lumbricoides
B) Se contaron 25 huevos de Trichuris trichiura en la misma preparación

Cálculo: 25 X 20 = 500
Resultado: 500 h.g.h. de Trichuris trichiura
Para determinar si la helmintiasis es masiva se consulta la misma tabla anota en el

método CPS de Stoll.
VI.- VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Ventajas del método:

a) Permite el diagnóstico (conteo) de varios parásitos en una misma muestra.
b) Puede ser aplicado con facilidad en el medio rural.
c) Es de bajo costo.
d) Facilita el conteo de huevos en infecciones moderadas por helmintos, debido al
contraste en la muestra por el verde de malaquita.
e) Debido a que la muestra no sufre mucho procesamiento, es más eficaz en la
detección de los huevos de helmintos, en comparación con otros CPS cuantitativos,
ya que el resultado es más cercano a la realidad, sobre todo si se hace el CPS
seriado.
Desventajas:
a) Está contraindicado en muestras verdaderamente diarreicas.
b) No es recomendable para la detección de larvas de Strongyloides stercoralis, ya
se tornan invisibles debido a la clarificación que hace la glicerina
VII.- PRECAUCIONES
 El material biológico con el que se trabaja, es potencialmente infectante, por lo
que se recomienda utilizar guantes, cubre boca y abundante detergente para el
lavado de manos, material y área de trabajo (en éste caso usar desinfectantes
como el benzal).
 Debe evitarse el exceder el tiempo de aclaramiento, ya que dificultaría la
identificación de los huevecillos de los helmintos, sobre todo los de uncinarias,
que ya de por sí presentan una membrana transparente.
 Si fuese necesario demorar la observación de la muestra, se puede detener el
proceso de aclaramiento, invirtiendo la preparación, es decir colocándola hacia
abajo hasta el momento en que se pueda analizar.
 Debe evitar el contacto directo de la solución de verde de malaquita con la piel,
recuerde que todos los colorantes son potencialmente carcinógenos.
FORMA DE REPORTAR.

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFIA
1) Atías Antonio. Parasitología médica. Edit. Mediterráneo. Segunda reimpresión.

6) Tay-Lara-Velasco-Gutiérrez. Parasitología médica. Edit. Francisco Méndez
edición.
8) W. Peters y H. M. Gilles. Atlas a color de medicina tropical y Parasitología.
Edit. Year Book Medical Publishers.
PRÁCTICA Nº 4
DE FERREIRA MODIFICADO
OBJETIVOS
a)Aprender a realizar un método coproparasitoscópico cuantitativo de concentración por
flotación.
b)Realizar la búsqueda, identificación y el conteo de formas parásitas en las heces.
c)Conocer la utilidad de este método en el diagnóstico del grado de parasitosis por
helmintos, así como para la concentración de quistes de protozoarios.
d)Conocer las ventajas y desventajas de este método.
I.- INTRODUCCIÓN
Este método fue ideado por Ferreira y Abreu, basados probablemente en el método de
Faust, se le conoce también con el nombre de técnica cuantitativa de Ferreira y Abreu.
Fue introducido por primera vez a México en 1942, por el Dr. Maximiliano Ruíz
Castañeda del Brasil, se empleó en el departamento de parasitología del Hospital
Infantil de México y posteriormente fue descrito por Biagi y Portilla en 1959.
Es un método que da buenos resultados debido al dispositivo que emplea, la campana
de Ferreira, sin embargo la técnica original presenta varios inconvenientes en cuanto al
tamaño del tubo y de la campana que son grandes y no se pueden emplear en
cualquier centrífuga, además, conseguir éste material en el comercio es difícil, y la
cantidad de soluciones que se emplean son grandes, incrementando el costo por
prueba.
Es por ello que en 1988 surge la idea de realizar una modificación cuantitativa que
permitiera tener la misma calidad y eficiencia de la técnica original, y que además se
pudiera adaptar a las necesidades de cualquier laboratorio.
Dicha modificación consiste en una reducción del tamaño del tubo y de la campana, así
como en la reducción a una cuarta parte de las cantidades de soluciones a emplear.
En la actualidad las campanas de Ferreira se pueden conseguir con menos dificultad en

el comercio, ya que se fabrican de plástico y con molde.
II.- FUNDAMENTO
Este método se basa en una diferencia de densidades entre la solución que se emplea
y la de las formas parasitarias, es decir, se basa en la utilización de una sol’n de sulfato
de zinc con densidad de 1.192º Baumé que por ser mayor a la densidad de las
estructuras parasitarias (1.05-1.15), ocasiona que éstas floten.
Además, la sol’n de sulfato de zinc no produce deformación de las formas parasitarias y
el proceso de flotación se agiliza con la centrifugación.
Aunado a lo anterior, el uso de la campana de Ferreira permite obtener una buena
concentración de las formas parasitarias.
Como método cuantitativo se basa en una dilución de 1:10 de las heces en formol al
10%.
III.- MATERIAL , REACTIVOS Y EQUIPO
 Muestra fecal recolectada adecuadamente
 Aplicadores de madera
 Portaobjetos de 25 X 76 mm.
 Cubreobjetos de 22 X 40 mm.
 Frasco de vidrio de 100 ml, de boca ancha
 Abatelenguas o varillas de vidrio
 Tubo de ensaye de vidrio de 13 X 100 mm
 Campana de Ferreira para el tubo anterior
 Embudo de 7.5 cm de diámetro
 Coladerita de 3.5 a 5 cm de diámetro
 Probeta graduada o pipeta graduada de 10 ml
 Gradilla
 Sol’n de sulfato de zinc con densidad de 1.192º Baumé (al 45% en agua)
 Sol’n de yodo o lugol parasitológico.
 Sol’n de formol al 10%
 Agua destilada
 Pinzas
 Microscopio compuesto óptico.
 Centrífuga
 Balanza granataria
IV.- PROCEDIMIENTO
1. Tarar el frasco junto con el abatelengua, en la balanza.
2. Pesar un gramo de muestra fecal en el frasco junto con el abatelengua.
3. Agregar 9 ml de formol al 10%, poco a poco y lavando el abatelengua.
4. Homogenizar muy bien
5. Filtrar toda la suspensión a través de la coladerita colocada en el embudo y éstas
a su vez colocadas en el tubo de ensayo, teniendo cuidado de no derramar la
suspensión.
6. Centrifugar el tubo a 2,000-2,500 rpm durante 1 minuto.
7. Decantar el sobrenadante en un frasco recolector ex profeso.
8. Re suspender el sedimento con 2-3 ml de agua destilada, ayudándose con un
aplicador de madera y se completa el volumen con más agua, dejando un cm del
tubo sin llenar, se mezcla nuevamente con el aplicador de madera.
9. Centrifugar nuevamente el tubo a 2,000-2,500 rpm durante 1 minuto.
10. Repetir los pasos 7-9, hasta que el sobrenadante se observe limpio, no más de
dos veces.
11. Decantar el sobrenadante en un frasco recolector ex profeso.
12. Re suspender el sedimento con 2 ml de sol’n de sulfato de zinc, ayudándose con
un aplicador de madera.
13. Introducir con cuidado en el tubo, la campana de Ferreira, cuidando que entre a
ella la suspensión.
14. Completar el volumen con más sol’n de sulfato de zinc, con ayuda de una pizeta
o de una pipeta, pero debe hacerse lentamente, cuidando que los niveles del
sulfato dentro y fuera de la campana vayan subiendo paralelamente, dejando un
cm del tubo sin llenar.
15. Centrifugar nuevamente el tubo con la campana a 2,000 rpm durante 2 minutos.
16. Sacar el tubo de la centrífuga con pinzas, cuidando de no presionar la manguera
de caucho, y colocarlo en la gradilla.
17. Observar el anillo que se formó en la parte angosta de la campana, que es en
donde se concentran las formas parasitarias (si las hay), y ése anillo es el que
hay que cuidar que no se pierda en los siguientes pasos.
18. Preparar el portaobjetos, el cubreobjetos y el frasco con el lugol.
19. Comprimir con fuerza y seguridad la manguera de la campana, usando los dedos
índice y pulgar, y no soltarla hasta que se le indique posteriormente.
20. Sacar la campana del tubo, con cuidado y girando el tubo, cuidando que no se
barra el anillo con las formas parasitarias.
21. Invertir la campana de manera vertical, poniendo en contacto la boca de la
manguera con la superficie del portaobjetos, se deja de presionar la manguera,
dejando salir la suspensión.
22. En la campana aún invertida, agregar de 1-2 gotas de lugol, cuidando que éstas
caigan en el centro, hacia la parte angosta de la campana, de tal manera que se
arrastre el anillo con las formas parasitarias.
23. Se presiona la manguera varias veces, colocando la boca de la manguera en la
superficie del portaobjetos, hasta que sale todo el contenido.
24. Mezclar con la punta del cubreobjetos y cubrir la preparación con el mismo,
cuidando que no se formen burbujas.
25. Observar la preparación primero con el objetivo 10X y luego con más cuidado
con el objetivo 40-45X.
26. La observación debe hacerse de manera sistemática abarcando toda la
superficie del cubreobjetos, incluso los bordes del mismo, contando los huevos o
larvas de helmintos, por especie.
27. Los quistes de protozoarios no se cuentan, sólo se reportan.
28. Reportar lo observado y hacer los cálculos correspondientes por especie de
helminto.
V.- VENTAJAS Y DESVENTAJAS

Ventajas
a) Reúne las características de un CPS de concentración por flotación y de un CPS
cuantitativo.
b) Hace una buena concentración de las estructuras parasitarias sobre todo de
quistes de protozoarios (mejor que la técnica de Faust), en la parte angosta de
la campana debido al proceso de flotación-centrifugación.
c) Permite hacer un recuento de huevos y larvas de helmintos, para la
determinación de la intensidad de la parasitosis.
d) Si se desea, puede utilizarse como CPS cualitativo sin necesidad de pesar la
muestra fecal, para aprovechar su bondad de hacer una buena concentración de
quistes de protozoarios.
Desventajas
a) La técnica es más laboriosa que la de Faust.
b) Se invierte más tiempo para su realización que en la técnica de Faust.
c) Es relativamente más caro que el método de Faust, por requerir de más
reactivos, así como de la campana y del tubo que es más caro que los que
generalmente se usan en laboratorio y aún no tan fácil de conseguir en el
mercado la campana.
d) Por el tamaño de los tubos y su diámetro, se requieren de centrífugas con
camisas adecuadas para ellos.
e) El factor 5 por el que se multiplica para obtener la cuenta final de huevos o larvas
por gramo de heces, no ha sido aclarado como se obtuvo, en la descripción de
la técnica original, y en la modificación el factor 21 se obtuvo buscando una
equivalencia con el factor 5.
f) Los huevos de helmintos como Taenia sp, Ascaris lumbricoides no fertilizados y
de trematodos como Fasciola hepatica y Paragonimus mexicanus, así como los
quistes de Balantidium coli, por ser pesados tienden a sedimentar, por lo que
éste método no los recupera.
g) No es posible recuperar trofozoítos de protozoarios, ya que se destruyen por la
concentración del sulfato y por el proceso de centrifugación.
VI.- PRECAUCIONES
 La sol’n de sulfato de zinc debe prepararse cada tercer día o bien checar
periódicamente la densidad, según el volumen de trabajo diario.
 Deben lavarse perfectamente bien las campanas, para eliminar residuos, sobre
todo de la parte angosta de la campana, por lo que se recomienda ponerlas en
mezcla crómica, por lo menos una vez al mes.
 Hay que checar la manguera de las campanas, que no tengan rupturas para que
cumplan con su función, y cambiarlas periódicamente.
 Se recomienda utilizar guantes sobre todo cuando se saca la campana de la
centrífuga y se invierte ésta, debido a que contiene materia fecal, que es
potencialmente infectante, también debe usarse cubre boca y abundante
detergente para el lavado de manos, material y área de trabajo (en éste caso
usar desinfectantes como el benzal).
VII.- CÁLCULOS
El total de huevos o larvas por especie de helminto se multiplica por el factor 21, y el
resultado se expresa en número de huevos o larvas de helmintos por gramo de heces
(h.g.h.).
Ejemplos:
Se contaron en toda la preparación 100 huevos de Ascaris lumbricoides, se hacen los
cálculos siguientes:
100 huevos X 21 = 2 100 h.g.h. de Ascaris lumbricoides.
Se contaron en toda la preparación 55 huevos de Trichuris trichiura, se hacen los

cálculos siguientes:
55 huevos X 21 = 1 155 h.g.h. de Trichuris trichiura
Estos resultados se comparan con las cifras establecidas para cada especie de
helminto, para determinar si la parasitosis es o no masiva.
Helminto Número de huevecillos por Número de huevecillos por gramo de

día que elimina la hembra heces indicativo de parasitosis
masiva
Ascaris 200-250 mil  50,000
lumbricoides
Trichuris trichiura 5-7 mil  5,000
VIII.- FORMA DE REPORTAR.
 Cantidad de los parásitos según el resultado de hacer los cálculos

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFÍA.
BROWN, Franklin A. Basic clinical Parasitology. 6 ed. United States of America., Ed.
Prentice Hall, 2004.
DE HARO ARTEAGA Irene. Diagnóstico morfológico de las parasitosis. 2 ed., México D.

F., Ed. Méndez editores, 1999.
PRÁCTICA Nº 5
MÉTODO ESPECIAL DE GRAHAM.
OBJETIVOS
a) Aprender a realizar un método especial para el diagnóstico de enterobiasis, por la
técnica de Graham.
b) Observar e identificar huevecillos de Enterobius vermicularis
d) Conocer las ventajas y desventajas de dicho método, así como su importancia
clínica.
I.- INTRODUCCIÓN
Es uno de los métodos clásicos que ha soportado el paso de los años y que sigue
siendo el método de elección para el diagnóstico de enterobiosis.
Según Beaver (1949) probablemente fue Vix en 1860 quien recomendó el uso de una
torunda o raspador para obtener material para el examen microscópico en busca de
huevos de Enterobius vermicularis. Según diversos autores fue Heller en 1876 quien
ideó el raspado anal, aunque no se señala con que. Pero en 1941, Graham introduce la
técnica de la cinta celulosa scotch o cinta de celofán adhesiva, la cual lleva su nombre.
Mazzotti en 1946, recomienda ésta técnica para la búsqueda de huevos de Taenia spp.
En la práctica ocasionalmente también se pueden encontrar huevos de Ascaris
lumbricoides, Trichuris trichiura y de Hymenolepis nana.
Actualmente existen otros aditamentos para la toma de muestra, llamados
comercialmente Pinworm collector o Pinworm paddle, que usan una paleta o remo de
acrílico con una cara adhesiva, y que después de tomar la muestra se puede observar
al microscopio.
II.- FUNDAMENTO
Este método se basa en la costumbre de la hembra de Enterobius vermicularis, de
depositar los huevecillos en los pliegues perianales, para ello migra durante la noche
desde el ciego, apéndice o colon ascendente, hasta las márgenes del ano del
hospedero.
Es por ello que la probabilidad de encontrar huevecillos de Enterobius vermicularis en
las heces es muy baja
III.- REQUERIMIENTOS
 Abatelenguas
 Cinta de celulosa adhesiva, transparente y de 12 mm de ancho
 Lugol parasitológico
 Guantes desechables
 Microscopio compuesto
IV.- PROCEDIMIENTO
Preparación del paciente
La persona debe recibir las instrucciones días antes de la toma de muestra.
Debe recomendársele que no defeque, ni se bañe o se haga aseo anal el día que se le
va a realizar el estudio, ya que se corre el riesgo de que los huevos de Enterobius
vermicularis, sean arrastrados mecánicamente.
La muestra debe tomarse lo más temprano posible y de preferencia en el laboratorio.
Debe explicársele al padre del paciente o al paciente, en que consiste la toma de
muestra, y si se trata de un menor de edad, deb estar presente el padre de familia.
Toma de la muestra
1.- Colocar al paciente en posición genupectoral.
2.- Medir y cortar la cinta adhesiva, aproximadamente 9 cm de largo
3.- Colocar la cinta extendida, sobre un extremo del abatelengua, con la parte adhesiva
hacia afuera, cuidando que quede la cinta del mismo largo en las dos caras del
abatelengua.
4.- Sujetar firmemente los extremos con el pulgar y el índice.
5.- Con la otra mano, con los dedos pulgar e índice separar las nalgas del paciente
exponiendo el esfínter anal y el periné.
6.- Aplicar presionando, la cinta de celofán-abatelengua a los pliegues anales,
moviéndolo hacia delante y hacia atrás, hacia arriba y hacia abajo, para cubrir la mayor
área perianal posible.
7.- Quitar del abatelengua la cinta de celofán y pegarla a un portaobjetos, con la capa
adhesiva sobre el portaobjetos, procurando que quede en el centro la parte que
contiene la muestra. Una vez así presionar fuertemente y extender la cinta de celofán,
procurando que no se formen burbujas.
8.- Observar al microscopio y buscar los huevos con el objetivo seco débil y con el
objetivo seco fuerte.
9.- Si lo desea puede despegar con cuidado la cinta de celofán y agregar una gota de
lugol en el centro del portaobjetos, luego vuelva a pegar la cinta, extendiéndola y
procurando que no se formen burbujas. Y vuelva a observar al microscopio.

Ventajas
 Es un método fácil de realizar
 Es de bajo costo
 Permite de manera eficaz recuperar los huevecillos de Enterobius vermicularis
 Se pueden recuperar huevecillos de otros helmintos, pero sólo en los casos de
higiene anal deficiente, lo cual es más común en las zonas rurales.
 Se puede emplear para estudios de campo.
Desventajas
 Si no se explica claramente a los padres de los menores, en que consiste la toma
de muestra, se pueden presentar problemas serios incluso legales.
VI.- PRECAUCIONES
a) Debe insistirse al paciente, en la importancia de seguir las instrucciones previas
a la toma de muestra.
b) Debe usarse guantes para la toma de muestra, y el manejo de la preparación ya
que los huevecillos de Enterobius vermicularis, depositados en la región perianal
del hospedero son infectantes.
c) Al observar al microscopio la muestra, debe usarse poca luz, recordando que los
huevecillos de Enterobius vermicularis tienen una membrana transparente.
VII.- FORMA DE REPORTAR.

 Fecha y hora de toma de la muestra

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
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PRÁCTICA Nº 6
MÉTODO ESPECIAL DE HARADA –MORI.
OBJETIVOS
a) Aprender a realizar un método especial para el desarrollo y recuperación de larvas
de uncinarias y de estrongiloides, por la técnica de Harada-Mori
b) Identificar larvas filariformes de uncinarias y/o de Strongyloides stercoralis
c) Conocer las ventajas y desventajas de dicho método así como su importancia clínica.
I.- INTRODUCCIÓN
Este método fue ideado por Harada y Mori en 1951 y modificado por Hsieh en 1962. A
pesar de que se dice que es un cultivo, no lo es en toda la extensión de la palabra, ya
que sólo permite el desarrollo de huevos a larvas filariformes en el caso de las
uncinarias (Necator americanus y Ancylostoma duodenale), y de larvas rabditoides a
filariformes en el caso de Strongyloides stercoralis.
Las larvas filariformes presentan características que permiten diferenciar las especies
de uncinarias y a éstas de Strongyloides stercoralis.
II.- FUNDAMENTO
Este método se basa en proporcionar las condiciones de húmedad, temperatura y

materia orgánica, necesarias para el desarrollo a larvas filariformes de Necator
americanus , Ancylostoma duodenale y Strongyloides stercoralis.
También se basa en un hidrotropismo de las larvas de los nematodos mencionados
anteriormente, por lo que éstas caen al agua en el fondo del tubo de ensaye,
permitiendo su posterior concentrado y recuperación, para la identificación
microscópica.
Material , reactivos y equipo
 Abatelenguas
 Tubo de ensaye de vidrio de 25 X 175 mm
 Probeta graduada o pipeta graduada de 10 ml
 Pipetas Pasteur con perilla
 Cuadros de papel celofán de grosor medio, de 6 X 6 cm de lado
 Tiras de papel filtro de 2 cm de ancho X 17.5 cm de largo
 Ligas
 Gradilla
 Pinzas
 Microscopio compuesto óptico
 Microscopio estereoscópico
 Baño María
 Termómetro
 Sol’n de yodo o lugol parasitológico.
 Agua destilada
IV.- PROCEDIMIENTO
Recolección de la muestra
Es particularmente importante para éste método, que la muestra fecal sea recolectada
adecuadamente, libre de contaminantes, sobre todo de tierra o suelo, así mismo el
recipiente debe estar limpio y seco. Debe conservarse la muestra entre 15º-30ºC, desde
el momento de la evacuación hasta la hora en que se va ha iniciar el cultivo. La
exposición de la muestra al sol, el calor intenso o temperaturas muy bajas, acaban con
la viabilidad de los huevos.
Es importante entonces no dejar transcurrir más de 24 horas posteriores a la emisión de
las heces fecales.
Si la consistencia de las heces tiende a ser dura, se recomienda ablandarlas con un
poco de agua destilada, para facilitar su extensión en el papel filtro.
Preparación del cultivo

1.-En una gradilla colocar 4 o 5 tubos de ensaye, por muestra.
2.-Agregar a cada tubo 5 ml de agua destilada.
3.-En una tira de papel de filtro untar en la región central de 0.5 a 1.0 g de heces,
dejando libres los extremos en aproximadamente 5 cm.
4.-Insertar en cada tubo con mucho cuidado, la tira de papel filtro con las heces,
checando que el largo de la tira del papel filtro no rebase el largo del tubo, y que la
muestra fecal no quede en contacto directo con el agua.
5.-Tapar los tubos con el papel celofán y asegurarlo con la liga.
6.- Dejar incubar los tubos a temperatura ambiente (24º- 30ºC)., de 3-10 días
Revisión de los cultivos

1.. Si se sospecha de estrongiloidosis, la revisión se hace a partir del 2º o 3er día, en el
caso de sospecha de uncinariasis, la revisión se hace a partir del 5º día.
2.. La revisión se hace colocando el tubo en el microscopio estereoscópico (o se puede
usar una lupa) y se observa el fondo del tubo para confirmar la presencia de las larvas
(miden de 0.5 a 0.7 mm de largo).
3..Si hay larvas, se calientan los tubos en baño maría a 50ºC, durante 10 seg, para
inactivar a las larvas, ya que en estadio filiforme son infectantes.
4..Se introduce en el tubo una pipeta Pasteur por detrás de la parte del papel filtro que
contiene la muestra fecal, y con cuidado se extrae agua del fondo del tubo.
5..Se coloca una gota de dicha agua en un portaobjetos, y luego una gota de lugol, se
mezcla con la punta del cubreobjetos, y se coloca éste con cuidado evitando la
formación de burbujas.
6. Se puede centrifugar el agua para hacer un concentrado de las larvas.
7. Se observa al microscopio a seco débil y seco fuerte.
8. Si se cuenta con ocular micrométrico, hay que medir las larvas.
9. Con apoyo de algún esquema o atlas, identifique cada una de las características de
las larvas, para saber de que especie de uncinaria se trata o si es estrongyloides.

Ventajas
a) Permite el desarrollo a larvas filariformes de uncinarias y de estrongyloides.
b) Permite hacer la diferenciación de larvas filariformes entre las uncinarias y
Strongyloides stercoralis.
c) Permite hacer la diferenciación de larvas filariformes entre Ancylostoma duodenale
y Necator americanus
d) Desde el punto de vista epidemiológico, permite establecer que especie de
uncinaria es la que predomina en determinada zona geográfica, y si están
presentes tanto Strongyloides stercoralis como las uncinarias, en la misma zona
geográfica.
e) Es un método sencillo y económico.
Desventajas
Prácticamente no presenta ninguna.
VI.- PRECAUCIONES
a) Debe usarse guantes desechables, teniendo en cuenta el carácter altamente
infectante de las larvas filariformes ya que éstas pueden penetrar por la piel.
b) Por ello debe manipularse con mucho cuidado la muestra fecal, así como el papel
filtro untado con las heces, y sobre todo el agua en donde se depositaron las larvas
durante el periodo de incubación de los tubos.
c) Precisamente por lo anterior, no debe omitirse el calentamiento de los tubos en baño
María, ni usar temperatura menor a 50ºC.
d) No debe exceder la temperatura del baño María de los 50ºC, ni el tiempo de
calentamiento, ya que las larvas se deforman y así no es posible identificarlas .
VII.- FORMA DE REPORTAR
 Fecha y hora de toma de la muestra

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
_____________________________________
- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFÍA
2-Tamayo H. Manuel . Nematodos. Disponible en



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PRÁCTICA Nº 7
OBSERVACIÓN DE ALGUNOS NEMÁTODOS TISULARES
OBJETIVOS
a)Observar y conocer la morfología de algunos nematodos tisulares: Trichinella spiralis
y Onchocerca volvulus.
b)Conocer los métodos que generalmente se emplean para el diagnóstico de dichos
nematodos.
c)Observar y conocer estadios de algunos nematodos de localización ectópica: Ascaris
lumbricoides, Trichuris trichiura y Enterobius vermicularis
I.- INTRODUCCIÓN: Los nematodos parásitos de sangre y tejidos pueden ser las Filarias. los
adultos son largos y delgados, miden varios centímetros de longitud y su hábitat es en casi
todos los tejidos. Algunas especies migran a través de los tejidos, mientras que otros
permanecen estacionarios ya sea en su hábitat habitual o en tejidos en los cuales no se les
encuentra habitualmente y son encapsulados por una reacción hística fibrosa nodular. Ambos
gusanos, macho y hembra se encuentran juntos en estos tejidos. La progenie son microfilarias,
embriones esbeltos móviles que se encuentra en la sangre circulante o se desplazan por los
tejidos subcutáneos, según la especie. Las microfilarias no son infectivas para los vertebrados,
sino que deben ingerirse por un artrópodo succionador, generalmente una mosca ó mosquito,
en los cuales maduran hasta alcanzar la fase infectiva. Estas larvas infectantes son transmitidas
a nuevos hospederos cuando el artrópodo vuelve a alimentarse. Después de penetrar la piel,
las larvas se dirigen a su localización habitual y se convertirán en adultos. La maduración
precisa es de algunos meses hasta un año.
La hembra de doble tamaño que el macho, es vivípara y pone microfilarias, cuya morfología y
localización en el hospedero son útiles para identificar la especie del parásito, la presencia o no
de columnas de células, cuyos núcleos se tiñen intensamente, en la punta de la cola de
aquellos, permiten dichas diferenciaciones. Las microfilarias aparecen en la sangre y tejidos,
unos meses después de la infección.
DIAGNÓSTICO: la localización geográfica, el tipo de enfermedad y el momento de obtener el

parasito puede contribuir al diagnóstico, el diagnóstico real se basa en la identificación de las
microfilarias en sangre o material obtenidos de la piel. Empleando películas de sangre gruesas
teñidas con tinción de Giemsa ó Hematoxilina
II.- REQUERIMIENTOS.
3-Colección de laminillas con ejemplares de nematodos tisulares habituales y ectópicos
1. Observe en el microscopio compuesto, a 10X y 40X, las laminillas positivas con
Trichinella spiralis.
2. Identifique las estructuras presentes en ellas
3. Observe también la forma, el color y el tamaño con respecto al área del campo
en seco débil y/o en seco fuerte.
4. Observe en el microscopio compuesto, a 10X y 40X, las laminillas positivas con
Onchocerca volvulus .
5. Compare las características entre las especies de los nematodos observados.
6. Las laminillas que contengan huevecillos, larvas o cortes de nematodos de
localización ectópica, obsérvelas en el microscopio compuesto a seco débil y
fuerte, observe la forma, color, estructuras internas y tamaño con respecto al
área del campo del objetivo empleado.
7. Reporte las observaciones de acuerdo al formato que le indique su maestro(a)

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFÍA
2-Tamayo H. Manuel . Nematodos. Disponible en



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PRÁCTICA Nº 8
OBSERVACIÓN DE ALGUNOS ADULTOS, PROGLÓTIDOS Y ESTADIOS
LARVARIOS DE CESTODOS.
OBJETIVOS:
a)Observar y conocer la morfología de algunos cestodos: Taenia solium y Taenia
saginata.
b)Observar y conocer la morfología de algunos estadios de los cestodos Taenia solium
Taenia saginata y Echinococcus granulosus: adultos, huevecillos, quiste hidatídico
(arenilla), cisticercos (Cysticercus cellulosae), proglótidos en sus diferentes grados de
desarrollo (inmaduros, maduros y grávidos).
c)Conocer los métodos que generalmente se emplean para el diagnóstico de los
diferentes estadios de los cestodos mencionados anteriormente.
d)Comparar la morfología de los adultos, escólices y proglótidos de Taenia solium y
Taenia saginata.
I.-INTRODUCCIÓN
Los cestodos son gusanos alargados en forma de cinta, aplanados en sentido dorsoventral,
carecen de vías digestivas y vasculares, están divididos en segmentos o proglótides, que al
madurar contienen órganos reproductores de ambos sexos. La extremidad anterior está
diferenciada como órgano de presión, el escólex, armado con ventosas y a menudo con
ganchos. La oncosfera, forma embrionaria tiene 6 ganchos. Las especies patógenas
importantes son: Diphyllobothrium latum, Hymenolepis nana, Taenia saginata, T, solium,
Echinococcus granulosus, caninum Los adultos habitan las vías intestinales de los vertebrados
y las larvas los tejidos de vertebrados e invertebrados
El gusano plano adulto consta de: 1) un escólex equipado para la fijación; 2) un cuello cuya
porción posterior es la zona de crecimiento y 3) el estróbilo una cadena de segmentos en
desarrollo progresivo o proglótides.
El escólex globular o periforme tiene tres tipos de órganos, con los cuales el gusano se fija a la
pared intestinal del huesped; 1) hendiduras de succión, alargadas; 2) discos de succión con
aspecto de copas ( T. saginata) y 3)rostelo armado con ganchos quinosos ( T. solium).
Cada proglótide es un individuo, se originan en la parte posterior del cuello y va madurando. La
mayoría de los cestodos son hermafroditas, cada proglotide madura contiene por lo menos un
equipo completo de órganos sexuales masculino y femenino.
Estos gusanos se encuentran en la luz del intestino delgado del huesped, con el escólex unido
a la mucosa, el sitio más frecuente es el íleón pero pueden estar en yeyuno y colon, se han
encontrado en la vesícula biliar.
poseen forma de metabolismo anaerobio. Con excepción de Hymenolepis nana en la que solo
basta un solo huésped para larvas y adultos, los cestodos comunes del hombre requieren uno o
más huéspedes intermediarios, en los que se desarrollan larvas después de la ingestión de
huevos. El huésped definitivo desarrolla la forma adulta después de ingerir carne que contenga
larvas enquistadas.
Debido a su gran tamaño producen una irritación intestinal mínima y pocos o ningún efecto
sistémico definitivo, los síntomas gastrointestinales vagos y nerviosos se atribuyen a los
productos tóxicos del gusano y privación de alimentos del huésped.
II.- REQUERIMIENTOS.
3-Colección de laminillas con ejemplares de cestodos
4-Ejemplares adultos de cestodos
1. Observe en el microscopio compuesto, a 10X y 40X, las laminillas con
proglótidos de Taenia solium y Taenia saginata.
2. Observe con ayuda de una lupa o bien en el microscopio estereoscópico, los
adultos de las taenias, recorra de extremo a extremo al gusano, identifique la
parte anterior y la posterior,
3. Observe también la forma, el color y el tamaño (calcúlelo macroscópicamente).
4. Compare las características entre las especies de los cestodos observados.
5. Las laminillas que contengan huevecillos de cestodos, obsérvelas en el
internas y tamaño con respecto al área del campo del objetivo empleado.
6. Observe en el microscopio compuesto, a 10X y 40X, las laminillas con
Cysticercus cellulosae, en sus diferentes formas; invaginados, evaginados,
completos, en corte histológico de cerebro, etc.
7. Observe también la forma, el color, estructuras internas y el tamaño con respecto
al área del campo del objetivo empleado.
8. Observe la laminilla positiva con la arenilla hidatídica (escólices formados dentro
del quiste hidatídico)
9. Observe también la forma, el color, estructuras internas y el tamaño con respecto
al área del campo del objetivo empleado.
10. Compare las características entre los estadios larvarios de las dos especies de
los cestodos observados.

Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFÍA

4-Uribarren Berrueta Teresa. Generalidades de cestodos. Departamento de

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PRÁCTICA Nº 9
MÉTODO ESPECIAL DEL TAMIZADO
OBJETIVOS
a) Aprender a realizar un método especial para la recuperación de proglótidos grávidos
y escólices de Taenia solium y Taenia saginata.
b) Conocer las ventajas y desventajas de dicho método así como su importancia clínica.
clínica.
I.-INTRODUCCIÓN
Este método se ha utilizado desde hace muchos años, para separar partículas de
diferentes tamaños que forman parte de mezclas de diversos componentes. Este
proceso usado en muchas áreas de la sociedad, es un método mecánico de separación
que se introdujo en el laboratorio de parasitología para la búsqueda y separación de
parásitos macroscópicos, a partir de la materia fecal, para su posterior identificación con
el apoyo de otros métodos.
Se desconoce quién lo introdujo.
II.- FUNDAMENTO
Este método se basa simplemente en los fenómenos de filtración y de separación
mecánica de segmentos, larvas o adultos de parásitos macroscópicos, a partir de la
materia fecal, por medio de mallas de diverso calibre o diámetros.
Lo que permite la posterior identificación de los parásitos, con el apoyo de otros
métodos de tinción o aclaramiento.
III.- MATERIAL , REACTIVOS Y EQUIPO

 Tres tamices de malla de diferente número o colador de malla fina de plástico, de 20
cm de diámetro
 Pinzas de disección sin dientes
 Cristalizadores de 15 cm de diámetro
 Cajas de Petri
 Cubreobjetos de 22 X 40 mm o de 22 X 50 mm
 Microscopio estereoscópico o lupa
 Agua de la llave
 Solución salina isotónica
 Alcohol etílico al 70%
IV.- PROCEDIMIENTO
La muestra fecal debe ser la evacuada en 24 hr y recolectada adecuadamente.
1.- Se colocan los tamices, uno sobre otro, en orden decreciente de grosor de la malla
(la más gruesa arriba y al final la más fina).
2.- Se coloca la materia fecal en el tamiz de arriba, y se llevan los tamices a la tarja del
laboratorio.
3.- Se abre la llave en forma tal que salga un chorro suave para que no salpique a quien
realiza la técnica.
4.-Con el abatelengua, se mueve la materia fecal para que vaya pasando con facilidad
por el tamiz superior y por los inferiores.
5.- Después se vacían los restos gruesos en un cristalizador, se agrega un poco de
agua y se buscan con mucho cuidado con ayuda de una lupa, parásitos completos o
fracciones de ellos.
6.- Enseguida se hace los mismo con los otros 2 tamices.
7.-Los parásitos hallados en los tamices, se toman con las pinzas de disección, y se
pasan a cajas de Petri que contengan solución salina isotónica.
8.- Si se encuentran fragmentos muy finos sospechosos de ser escólices, se
recomienda llevar la caja de Petri con solución salina isotónica, a la observación con el
microscopio estereoscópico.
9.- Los parásitos así recolectados pueden posteriormente, someterse a técnicas de
tinción o de aclaramiento, de acuerdo a lo que se requiera.
Identificación de tenias a partir de recuperación por tamizado de heces
a) Si se encuentran proglótidos de taenias, se lavan bien en la solución salina isotónica
b) Se colocan entre 2 portaobjetos y se hace su aplastamiento, presionando con los

dedos
c) Las ramas uterinas se ven por transparencia bajo lupa o en microscopio

estereoscópico.
d) Se mejora el contraste con inyección de tinta china a través del orificio genital. (Este
procedimiento funciona mejor en proglótidos frescos que en los fijados.)
Ventajas
a) Es un método indicado para la colección e identificación de proglótidos y de
escólices de Taenia spp.
b) Una vez recuperados los proglótidos y o los escólices, con el apoyo de las técnicas
de tinción, se puede identificar la especie de taenia, en nuestro medio es muy
importante, diferenciar a Taenia solium de Taenia saginata.
c) Se puede evaluar la eficacia del tratamiento de teniosis, por el hallazgo y
recuperación del escólex de la taenia involucrada.
d) Se pueden recuperar adultos de otros parásitos, tales como; Ascaris lumbricoides,
Trichuris trichiura y uncinarias.
e) Es un método sencillo y relativamente rápido de realizar.
f) Es relativamente económico
Desventajas
Prácticamente no presenta ninguna
VI.- PRECAUCIONES
1. Debe usarse guantes y cubreboca, recordando que en el caso de hallar

proglótidos grávidos de Taenia solium, se corre el riesgo de infectarse con los
huevecillos y por lo tanto de adquirir cisticercosis.
2. Deben tomarse los proglótidos con las pinzas y con mucho cuidado para evitar la
ruptura de los mismos y que se liberen los huevecillos.
3. Por lo anterior debe lavarse todo el material con detergente y usando guantes.

 Nombre del método realizado
 Estadio del parásito macroscópico hallado.
 Cantidad de los parásitos hallados

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Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFÍA.
BROWN, Franklin A. Basic clinical Parasitology. 6 ed. United States of America., Ed.
DE HARO ARTEAGA Irene. Diagnóstico morfológico de las parasitosis. 2 ed., México D.

PRÁCTICA Nº 10
OBSERVACIÓN DE ALGUNOS TREMÁTODOS
OBJETIVOS
a)Observar y conocer la morfología de algunos trematodos: principalmente Fasciola

hepatica
b)Conocer los métodos que generalmente se emplean para el diagnóstico de dichos
trematodos.
c)Observar y conocer estadios de algunos trematodos : principalmente de Fasciola
hepatica
I.- INTRODUCCIÓN
Los trematodos son gusanos planos alargados, en forma de hoja, pero pueden ser ovoides,
cónicos o cilíndricos. Su tamaño varía de menos de un milímetro a varios centímetros. El verme
está envuelto en una cutícula homogénea, parcial ó totalmente cubierta de espinas, tubérculos
ó acanaladuras. Se adhieren al huésped mediante ventosas musculares, que algunas veces
tienen espinas ó ganchos. La ventosa bucal está ubicada en el extremo anterior del parásito; en
la mayor parte de las especies una ventosa ventral más voluminosa ó acetábulo se localiza en
la superficie ventral posterior. De la boca, en la ventosa oral, parte una faringe globulosa y
muscular que desemboca en un esófago angosto y corto. el intestino se bifurca en dos ciegos,
rectos ó ramificados con extremos cerrados. La corriente linfática es mantenida por las
contracciones del cuerpo.
El sistema excretor incluye células en flama, diseminadas, capilares, tubos colectores, vejiga y
un poro excretor.
El sistema nervioso primitivo comprende dos ganglios laterales; de cada ganglio parten troncos
nerviosos longitudinales, anteriores y posteriores.
Excepto los vermes de la sangre, todos los tremátodos parásitos del hombre son hermafroditas.
Los testículos visibles, generalmente dos, excepto en los esquistosomas se localizan con mayor
frecuencia en la mitad posterior del cuerpo. Los órganos reproductores femeninos incluyen un
ovario único, redondo, lobulado ó dendrítico, generalmente es más pequeño que los testículos.
Los huevecillos no fecundados constan del óvulo fecundado, células vitelinas y una membrana
vitelina con una cubierta. Su forma, aspecto y tamaño son bastante constantes y sirven para el
diagnóstico de especie. La cubierta del huevo, de la mayoría de las especies, tiene un opérculo
polar como una tapa, pero los huevos de Schistosoma no son operculados.
El trematodo adulto se mueve por contracción, elongación y flexión. Su longevidad varía según
la especie, pero generalmente es de varios años (hasta 30 en los esquistosomas)
Se alimenta de tejidos, secreciones o del contenido intestinal del huésped, según su hábitat y la
especie del parásito. La respiración es anaerobia, sin embargo, las formas larvarias requieren
oxígeno.
PATOLOGÍA: las lesiones producidas por las duelas dependen de su localización en el

huésped, su número, y el efecto de sus productos en el tejido en que se alojan.
REQUERIMIENTOS.
2- Microscopio óptico estereoscópico o lupa
3-Colección de laminillas con ejemplares de trematodos; adultos , huevecillos y larvas
4- Ejemplares del hospedero intermediario de Fasciola hepatica
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
1. Observe con ayuda de una lupa o bien en el microscopio estereoscópico,y si es

necesario, también con el microscopio compuesto, los adultos de Fasciola
hepatica
2. Recorra de extremo a extremo al gusano, identifique la parte anterior y la
posterior, estructuras presentes en ellas, aparatos y sistemas.
3. Observe también la forma, el color y el tamaño (mida con ayuda de una regla).
4. Compare las características entre las especies de los trematodos observados (si
es que hay dos o más especies).
5. Las laminillas que contengan huevecillos de los trematodos, obsérvelas en el
internas y tamaño con respecto al área del campo del objetivo empleado.
6. Observe la laminilla positiva con cercarías de Fasciola hepática, observe la
forma, color, estructuras internas y tamaño con respecto al área del campo del
objetivo empleado.
7. Observe con lupa o al microscopio estereoscópico, los hospederos
intermediarios de Fasciola hepática, observe la forma, color y tamaño
8. Observe el corte histológico de conductos biliares que contienen adultos de
Fasciola hepatica. Observe la forma, color, estructuras internas y tamaño con
respecto al área del campo del objetivo empleado.


Fase infectante________________________
Parasitosis____________________________
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- Tamaño______________________
- Forma_______________________
BIBLIOGRAFÍA

3-Uribarren Berrueta Teresa. Generalidades de trematodos. Departamento de

microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, UNAM. Disponible en
www.facmed.unam.mx
PRÁCTICA Nº 11
MÉTODO COPROPARASITOSCÓPICO SIMPLE EN COPAS
OBJETIVOS
a) Aprender a realizar un método coproparasitoscópico de concentración por
sedimentación para el diagnóstico de algunos trematodos, en particular de Fasciola
hepatica.
b) Conocer las ventajas y desventajas de dicho método así como su importancia clínica.
I.- INTRODUCCIÓN
El procedimiento de decantación en copas es una técnica farmacéutica conocida desde
hace muchos años, en el cual se utiliza un procedimiento físico para la separación de
mezclas.
Debido al tamaño y peso de los huevos de trematodos, la sedimentación es uno de los
métodos más recomendables para su recuperación.
II.- FUNDAMENTO
Esta técnica se basa en que el tiempo de caída de los huevos de Fasciola hepatica en
el agua es de 100 mm/minuto, más rápido que el de la caída de detritos de la materia
fecal. El tiempo de sedimentación debe de ser de 3 a 4 minutos (no mas).
La sedimentación de los huevos puede ser auxiliada con el uso de soluciones
jabonosas que ayudan a desprender los huevos de la materia fecal.
Material y equipo
 Muestra fecal recolectada adecuadamente
 Copas de plástico o de vidrio de aproximadamente 15 cm de largo por 7 a 8 cm de
diámetro en la boca.
 Abatelenguas
 Embudo de 7.5 cm de diámetro
 Coladerita de 3.5 a 5 cm de diámetro
 Probetas graduadas o pipetas graduadas de 10 ml
 Pipetas Pasteur largas, con bulbo
 Microscopio compuesto óptico
Reactivos y soluciones
 Agua destilada
 Solución de detergente al 5%
 Solución de verde de malaquita al 1%
Solución de detergente al 5%
Pesar 5 g de detergente de cualquier marca y disolver en 100 ml de agua de la llave. El
detergente que no se disuelva no interfiere en el proceso, pero es mejor decantar el
sobrenadante.
Solución de verde de malaquita al 1%

Pesar 1 g de colorante verde de malaquita y disolver en 50 ml de agua destilada, aforar a
100ml. Guardar la solución en frasco ámbar de vidrio con tapón esmerilado.
IV.- PROCEDIMIENTO
1. Agregar agua de la llave al frasco en donde se recolectó la muestra fecal (3-5 g,

aproximadamente del tamaño de una nuez de papel), cubriendo la muestra y
homogenizar con un abatelengua.
2. Colar la suspensión a través de la coladerita colocada en el embudo, directamente
en la copa.
3. Agregar 5 ml de solución de verde de malaquita al 1 % y mezclar con un aplicador
de madera.
4. Agregar 5 ml de solución de detergente al 5 % y mezclar con el aplicador de
madera.
5. Se añade agua corriente hasta completar el volumen de la copa y se mezcla
nuevamente.
6. Se deja sedimentar durante 15 min.
7. Se decanta el sobrenadante, se agrega más agua y se mezcla
8. Se deja sedimentar nuevamente durante 15 min.
9. Se decanta nuevamente el sobrenadante cuidadosamente dejando el sedimento con
el mínimo volumen de 1 a 2 ml.
10. Se homogeniza el sedimento con el aplicador de madera.
11. Tomar una porción del sedimento con la pipeta Pasteur
12. Colocar varias gotas del sedimento en un portaobjetos y colocar el cubreobjetos
evitando la formación de burbujas.
13. Se recomienda hacer tres preparados del mismo sedimento, para asegurar el
hallazgo de los huevecillos.
14. Examinar al microscopio con los objetivos 10X y 40X.
Ventajas
a. La técnica resulta útil para concentrar huevecillos de trematodos como Fasciola
hepatica y de esquistosomas.
b. También resulta útil para concentrar quistes de protozoarios y larvas de
helmintos.
c. El uso del detergente favorece la separación de los huevecillos, de las grasas y
demás componentes de la materia fecal.
d. La solución de verde de malaquita permite hacer una coloración de contraste en
el campo del microscopio, facilitando la búsqueda e identificación de los
huevecillos.
e. Por su simplicidad y bajo costo, ésta técnica se ha empleado en estudios
epidemiológicos, principalmente en áreas de esquistosomiosis y fasciolosis.
Desventajas
La única desventaja es el tiempo que se requiere para su realización.
VI.- PRECAUCIONES
Debe usarse guantes recordando que toda muestra fecal es potencialmente infectante.

 Nombre del método realizado
 Estadio del parásito identificado.
 Cantidad de los parásitos hallados indicada con cruces

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BIBLIOGRAFÍA.
1. BROWN, Franklin A. Basic clinical Parasitology. 6 ed. United States of America., Ed.
2. DE HARO ARTEAGA Irene. Diagnóstico morfológico de las parasitosis. 3 ed., México D.

PRÁCTICA Nº 12
OBSERVACIÓN DE ALGUNOS ARTRÓPODOS DE INTERÉS MÉDICO
OBJETIVOS
a) Observar y conocer la morfología de algunos artrópodos de interés médico , así
como de algunos estadios de los mismos.
b) Comprender la importancia médica de los artrópodos, por ser causantes de
enfermedad y/o ser vectores de muchos agentes patógenos.
I.- Introducción: Un buen número de especies de artrópodos, son parásitas. los ácaros
son parásitos mamíferos. Existe un gran número de especies que parasitan al hombre y
a otros vertebrados.
Demodex follicolorum pequeño ácaro de cuerpo alargado y vermiforme, Viven el las
glándulas sebáceas y en los folículos pilosos del hombre, en donde produce foliculosis
y favorece el desarrollo del acné. La búsqueda del parásito se realiza al raspar
suavemente la piel con el borde de un portaobjetos, el cual se pasa en ángulo de 90 º;
el material colectado se pasa a otro portaobjetos para su observación microscópica.
La sarna o escabiasis es uno de los padecimientos parasitarios más descritos y esta
ligado a las condiciones de higiene personal y habitacional.
El retorno de la sarna esta relacionado con : a) explosión demográfica no acompañada
en grandes masas de población y b) cierta liberación sexual que parece estarse
operando con el advenimiento de los anovulatorios.
Es una enfermedad contagiosa y su transmisión es intradomiciliaria, habitan en túneles
abiertos de la epidermis. Las lesiones se diseminan por todo el cuerpo siendo más
abundantes en los pliegues, desde la nuca hasta las rodillas.
Las pulgas transmiten la peste (Pasteurella pestis), el tifo murino (Rickettsia mooseri), la
dipilidiasis (Dipylidium caninum) y la Himenolepiasis (Hymenolepis nana e H.
diminuta).Tunga penetrans, pequeña pulga, que pasa la mayor parte de su vida
enclavada en la dermis o tejido celular subcutáneo. Inicialmente la lesión es una
pequeña pápula, crece hasta convertirse en pústula y se abre permitiendo la salida de
material purulento. El reservorio natural es el cerdo. El tratamiento es quirúrgico.
CHINCHES, Son insectos chupadores de sangre que son vectores de la
tripanosomiasis sudamericana. La chinche de la cama Cimex lectularius, las chinches
viven en los colchones, armaduras de la cama, ranuras de paredes, muebles y por la
noche salen a picar a la víctima dormida.
Las moscas tienen importancia como vectores de enfermedades infecciosas y como
productoras de miasis
LOS ESCORPIONES, Se hallan en regiones cálidas del mundo, poseen punzón en la
punta del extremo caudal que inyecta una neurotoxina. Las picaduras pueden producir
debilidad y adormecimiento local así como parálisis sistémica y dolor abdominal. En los
niños puede provocar la muerte como resultado de una parálisis respiratoria.
La araña viuda negra, Latrodectus mactans, muerde en defensa propia. Produce al instante
dolor en el lugar de la mordedura. La hembra se identifica por el reloj de arena rojo brillante en
la superficie ventral media de su cuerpo.
II.- REQUERIMIENTOS
 Preparaciones fijas
 Ejemplares preservados.
 Microscopio
III.- DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
 Observar al microscopio las preparaciones fijas.
 Hacer esquemas de los ejemplares observados, ayúdese de la

bibliografía adecuada

Fase infectante________________________
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IV.- BIBLIOGRAFÍA
1. BROWN, Franklin A. Basic clinical Parasitology. 6 ed. United States of America., Ed.
2. DE HARO ARTEAGA Irene. Diagnóstico morfológico de las parasitosis. 2 ed., México D.

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BENÉMERITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

LICENCIATURA EN QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

AREA: ANÁLISIS CLÍNICOS

FECHA: MAYO 2009

CARGA HORARIA DEL ESTUDIANTE

MC Alma Delia Ramírez Guarneros, MC

PERFIL DESEABLE DEL PROFESOR (A) PARA IMPARTIR LA ASIGNATURA:

DISCIPLINA PROFESIONAL: Químico Farmacobiólogo

Elaborada en forma conjunta por la Secretaria de Salud y de Medio Ambiente y

II. En la Nueva clasificación, los RPBI´s son:

IV. Niveles de los Establecimientos Generadores

NIVEL I NIVEL II NIVEL III

Laboratorios clínicos y bancos de Laboratorios clínicos y bancos de Centros de producción e

Bioterios que se dediquen a la Laboratorios clínicos y bancos de

Establecimientos que generen de Establecimientos que generen

V. Período de almacenamiento temporal de los RPBI´s en los establecimientos

NIVEL I NIVEL II NIVEL III

30 días máximos de 15 días máximos de 7 días máximos de

No requiere de área específica Si requiere de área específica Si requiere de área específica

VI. Atribución a la Secretaria de Salud. Corresponde a la Secretaria de salud regular y

NORMAS DE SEGURIDAD Y REGLAMENTO EN

PRESENTACIÓN GENERAL DEL PROGRAMA

SEMANA PRACTICA NOMBRE PAGINA

1) Atías Antonio. Parasitología médica. Edit.

OBSERVACIÓN DE ADULTOS Y HUEVECILLOS

NOMBRE DEL PARASITO_____________

2-Tamayo H. Manuel. Nematodos. Disponible en

3-Tay-Lara-Velasco-Gutiérrez. Parasitología médica. Edit. Francisco Méndez

4-Uribarren Berrueta Teresa. Generalidades de nematodos. Departamento de

a) Aprender a realizar un método coproparasitoscópico cuantitativo por dilución, por la

IV.- TÉCNICA (PROCEDIMIENTO)

1) Determinar primero la consistencia de la muestra fecal.

El resultado luego de multiplicar por el factor correspondiente, se expresa en: número

Para determinar si la helmintiasis es masiva se consulta la siguiente tabla:

Helminto Número de huevecillos por Número de huevecillos por

día que elimina la hembra gramo o ml de heces,

Ascaris lumbricoides 200-250 mil > 50,000

Trichuris trichiura 5-7 mil > 5,000

Uncinarias 5-30 mil > 4,000

Necator americanus 5-10 mil > 4,000

Ancylostoma duodenale 5-30 mil > 4,000

Fuente: diversos autores; Tay Lara, Atías Antonio, Cruz lópez.

NOMBRE DEL PARASITO_____________

a) Aprender a realizar un método coproparasitoscópico cuantitativo, por la técnica de

b)Cuantificar huevecillos de helmintos por gramo de heces

c) Buscar e identificar huevecillos de algunos helmintos intestinales

Nº de huevos contados X 20 = Nº de de huevos por gramo de heces

20 es un factor constante que resulta del siguiente razonamiento:

El resultado luego de multiplicar por el factor correspondiente, se expresa en:

B) Se contaron 25 huevos de Trichuris trichiura en la misma preparación

Para determinar si la helmintiasis es masiva se consulta la misma tabla anota en el

VI.- VENTAJAS Y DESVENTAJAS

Ventajas del método:

NOMBRE DEL PARASITO_____________

1) Atías Antonio. Parasitología médica. Edit. Mediterráneo. Segunda reimpresión.

En la actualidad las campanas de Ferreira se pueden conseguir con menos dificultad en

V.- VENTAJAS Y DESVENTAJAS

Se contaron en toda la preparación 55 huevos de Trichuris trichiura, se hacen los

Helminto Número de huevecillos por Número de huevecillos por gramo de

HOJA DE REGISTRO DE OBSERVACIONES MICROSCOPICAS

NOMBRE DEL PARASITO_____________

DE HARO ARTEAGA Irene. Diagnóstico morfológico de las parasitosis. 2 ed., México D.

V.- VENTAJAS Y DESVENTAJAS