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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE COTOPAXI

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y
RECURSOS NATURALES

CARRERA: INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

MATERIA: MICROBIOLOGÍA GENERAL E INDUSTRIAL.

TEMA: ELABORACIÓN Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
FERMENTADORES DEL TOMATE DE ÁRBOL.

INTEGRANTES
CRIOLLO VANESSA.
CHIMBA ROBERTO.
LEMA FANNY.
LEMA JHONY.
TIGSELEMA YADIRA.
ZAMBRANO IVAN.

CICLO

TERCERO
“B”

DOCENTE
QUIM. ORLANDO ROJAS.

PERIODO ACADÉMICO

ABRIL 2017 – JULIO 2017

ANTECEDENTES:

El tomate de árbol es una fruta exótica originaria de la vertiente oriental de los Andes de
Colombia, Ecuador y Perú (Imagen 1). En 1970, se le asignó el nombre “tamarillo”, designación
comercial generalizada para el tomate de árbol en el mercado mundial (MAG/IICA 2001).

El tomate de árbol perteneciente a la familia Solanaceae, corresponde al tipo biológico de arbusto
semileñoso con follaje grande y flores rosadas con exquisita fragancia, presenta ciclo vegetativo
perenne y su altura alcanza los 2 ó 3 metros (SICA 2001) (Imagen 2). Es una planta de climas
templados y fríos. Su temperatura está entre 13° a 24°C siendo la óptima entre 16° y 19°C. No
necesita gran humedad atmosférica, por lo que se cultiva frecuentemente en zonas altas de clima
seco. Se desarrolla en una amplia gama de suelos, siendo los mejores los de textura franca, ricos
en materia orgánica (PROEXANT 2007).

Los frutos son bayas aromáticas ovoides punteadas en su extremo inferior (Imagen 3), con un
cáliz cónico y recubiertos por una cáscara gruesa, lisa, brillante y cerácea, de sabor amargo en
tonos ladrillo, rojos, naranjas y amarillos según la variedad. El mesocarpio, única parte
comestible, es firme, suave, jugoso, agridulce y presenta colores amarillos, rosados o rojos. En el
centro de la fruta, rodeadas de pulpa más suave que la capa exterior, se encuentran entre 200 y
400 pequeñas semillas comestibles, de forma plana y circular (MAG/IICA 2001)

En América Latina, el tomate de árbol es cultivado en forma muy marginal en países como: Perú,
Chile, Bolivia, Argentina, Brasil, Venezuela, Costa Rica, Guatemala, Jamaica, Puerto Rico y
Haití; pero es en Colombia y Ecuador donde se produce más extensamente. En la actualidad
también es cultivado en Zambia, Nueva Zelanda, Sri Lanka, Kenia Zimbabwe e India
(PROEXANT 2007). La principal variedad comercial en Nueva Zelanda es la llamada “negra”,
obtenida como una variación entre los tipos amarillos y rojos oscuros. El resultado es una fruta
de tamaño grande, color rojo intenso, considerada de mejor calidad (MAG/IICA 2001).

En Ecuador, la fruta se cultiva en zonas de climas templados y frescos de la Sierra ecuatoriana,
en altitudes comprendidas entre 1.200 a 3.000 m.s.n.m. En estas zonas se cultiva alrededor de
5.000 ha, con rendimientos que oscilan entre 60 – 80 t /ha /año (SICA 2001). La producción

Empieza al año y medio o dos años después de la siembra, siendo intensa solamente por 4 ó 5
años (5 meses /año) pudiendo durar de 10 a 12 años (PROEXANT 2007). Las provincias más
representativas son: Imbabura, Tungurahua y Pichincha (SICA 2001). La variedad más difundida
es la tradicional anaranjada, habiéndose introducido últimamente el tomate “mora” de color
morado y pulpa más rojiza (MAG/IICA 2001).

En la actualidad el Ecuador presenta perspectivas favorables para la captación de divisas de
cultivos no tradicionales, por ello el país ha concentrado sus esfuerzos en atender al sector
agrícola hasta ahora descuidado (SICA 2001).

Según información proporcionada por el SIGAGRO (2006)*, a pesar de los problemas en la
producción, el tomate de árbol es uno de los cultivos no tradicionales más prometedores, su uso
ha tenido un incremento significativo en los últimos años; lo que ha traído como consecuencia,
un aumento sostenido de las áreas cultivadas de 2.017 ha en 1996 a 3.043 ha en el 2006.

El tamarillo ha demostrado tener un gran potencial de exportación para el Ecuador, debido al
importante crecimiento de sus rubros exportados y el constante incremento de la demanda
mundial. En Europa se la consume como fruta fresca, mientras que el consumidor estadounidense
la prefiere procesada. Los principales mercados de destino del tomate de árbol ecuatoriano son:
Holanda, Bélgica y Canadá (SICA 2001).

Respecto a la adicción de nutrientes (extracto de levadura y fosfato acido de amonio) garantiza
un aumento del porcentaje de alcohol en la bebida. Se recomienda la utilización de levadura de

0g/100g de pulpa). . tolera concentración final de etanol. 101). son parte de las variedades trabajadas ancestralmente por sociedades prehispánicas. en 2001. baja producción de sub productos metabólicos. es todavía deficiente. se han adaptado a los ecosistemas de alturas variadas. Estos cultivos como el tomate de árbol. rico en minerales como: calcio (9.0g/100g de pulpa). Los cultivos andinos de acuerdo con guerrero (2012). Se recomienda además trabajar a temperatura de 20°C. condiciones climáticas extremas y alta variabilidad climática. motivo por el cual la industria nacional muestra mayor interés en el procesamiento y manufacturación del producto (pág.vino (Saccharomyces cerevisiae) ya que fermenta más rápido que la levadura de pan. según Quinaluisa (2006). organolépticas y de salud del fruto.0ml/100g de pulpa). vitamina A (150.0mg/100de pulpa). en la última década aumento la producción de tomate de árbol de 1370 ha. que se pueden resaltar según Portilla (2013) son: reducción de colesterol. los que los convierte en frutos de gran interés investigativo. nivel de calorías (48. (pág. En la región interandina ecuatoriana la producción de tomate de árbol. teniendo como promedio de siembra 0. alto contenido de fibra (2. desconocido por gran parte de la población. Por cada productor. tolera alta concentración inicial de azúcar. Muchos de estos cultivos poseen un valor nutricional. en 1993 a 4062 ha. Vitamina C (29.0mg/100g de pulpa). constituyendo un gran repositorio de material vegetal con importancia única y trascendental.68 ha. siendo los principales productores los pequeños y medianos agricultores de la región. 5) Las cualidades nutritivas. calmar migrañas. (López y Paredes 1998).

hierro y fósforo. fortalece el sistema inmunológico y la visión. siendo así un preámbulo para posteriores investigaciones de aplicaciones en procesos de la industria alimenticia y producción vinícola. fruto originario de nuestro país. permitirá un significativo desarrollo en la industria local. altos niveles de proteína y caroteno. El tomate de árbol posee cualidades físicas.JUSTIFICACIÓN: El tomate de árbol. La capacidad microbiana ayuda a optimizar muchos procesos biotecnológicos. de abundante producción y rico en nutrientes. Resalta por sus propiedades de reducción de colesterol. funciona como antioxidante y es fuente de pectina (MAG/IICA 2001). disminuyendo la necesidad de comprar insumos en el exterior. nutritivas y organolépticas similares a las mejores frutas que actualmente se consume. alto contenido de fibra. aportando un potencial a la pequeña industria de nuestro país. además. . razón por la cual el trabajo de aislamiento. vitaminas A y C. que se canalizan en la colección de cepas. rico en minerales como: calcio. identificación y caracterización de especies. pero la realidad del comercio interno y externo está cada vez más caracterizada por la demanda de productos procesados con alta calidad. bajo nivel de calorías. ofrece la posibilidad de acceder a los mercados de frutas y hortalizas. en el laboratorio están destinadas a un fin productivo. La investigación microbiológica de frutos fermentables locales como el tomate de árbol. mediante el uso de cepas que presentan una mayor adaptabilidad a las condiciones ambientales y climáticas.

 Identificar una muestra para la siembra respectiva para el aislamiento de cepas producidas.OBJETIVOS.  Aislar y purificar los microorganismo fermentador del tomate . General:  Conocer las taxas presentes que se encuentren en un tomate de árbol mediante un análisis microbiológico Específicos:  Elaborar la fermentación del zumo de tomate de árbol.

. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. además de la entrega de cepas aisladas para fermentar esta fruta en particular así obtendremos un producto de calidad. se daría por el motivo de cultivar sepas que se produzcan al fermentar el mismo lo cual nos daría como resultado la obtención de microorganismos que mejoren la calidad del producto fermentado además de esto nos serviría a nivel comercial industrializar este producto andino con el fin de obtener un valor agregado. El aislamiento de microorganismos fermentadores del tomate de árbol.

y por su gran aporte nutricional este fruto contiene sustancias como el ácido gamma amino butírico que baja la tensión arterial. Se consume como fruta fresca. y contribuyen a curar migrañas y cefaleas severas.7 g Carbohidratos 11.0 mg Vitamina C 20 % . es considerado en fruto terapia como una de las frutas que fortalecen el cerebro. gelatina. mermelada y concentrados congelados. conservas dulces. rico en el hierro y el potasio. es materia prima en la industria para la preparación de jugos. Los datos de la composición nutricional deben interpretar por 100 g de la porción comestible.0 mg Hierro 2. Calorías 80 Ca Agua 87.9 g Grasa 0. B6.9 g Proteína 1. jaleas. Cuadro 1. Composición Nutricional del tomate. I. También bajo en calorías y alto en la fibra. MARCO TEORICO COMPOSICIÓN El tomate de árbol es una fuente de Vitaminas A.6 mg Fibra 1.0 mg Fosforo 36.1 g Calcio 2.16 g Cenizas 0. C y E. compotas.

de color verdee oscuro. . de color blanco – rosáceo dispuestas en pequeños racimos terminales. en los extremos de las ramas.  El limbo presenta de 15 a 30 cm de longitud.  Crece en clima de bosques húmedos montanos.  Las hojas finas tienen una fina pubescencia en ambas caras. con un largo pedúnculo en el que persiste el cáliz de la flor. con hojas alternas.  Es originaria de los Andes.  El fruto es una baya ovoide de 4 a 8 cm x3 a 4 cm.  Tienen 5 pétalos y 5 estambres amarillos. por lo general integra. con peciolo robusto de 4 a 8 cm de longitud. las flores son pequeñas.  La piel es lisa. con temperatura entre 13 y 24 °C. se encuentra en huertos familiares desde el norte de Argentina hasta el sureste de México y en las Antillas. un poco áspero al tacto. de color rojo o anaranjado en la madurez.3 a 1. CARACTERÍSTICAS Reino: Plantea División: Solanáceas Familia: Solanáceae Especie: Cyphornandra Retacea  Es un arbusto de 3 a 4 m de altura con hojas simples y aovadas o codadas. enteras. con forma ovalada. de 1.  Es una planta delicada al frio y a los vientos. la nerviación es marcada y sobresaliente. con estrías de color más claro.5 cm de diámetro. florecen en mayo – junio. acuminado.

Para la gripe. el cabello. Componentes. El componente mayoritario del tomate de árbol es el agua. destaca su contenido de provitamina A y C. previamente calentadas. de acción antioxidante. de color naranja. La vitamina C interviene en la formación de colágeno. Ambas vitaminas. Es un fruto de moderado valor calórico. cumplen además una función antioxidante. se aplican en forma tópica contra la inflamación de amígdalas o anginas especialmente. Es bajo en calorías y alto en fibra. El fruto o las hojas. dulces y postres. a expensas de su aporte de hidratos de carbono. 2001).  La pulpa es jugosa. y en menor proporción contiene otras vitaminas del grupo B. La vitamina A es esencial para la visión. necesaria para el buen funcionamiento del sistema nervioso. roja con semillas. Su contenido de fibra (soluble. el buen estado de la piel. algo acida. glóbulos rojos y favorecen la absorción del hierro de los alimentos y la resistencia a las infecciones. La provitamina A o beta caroteno se transforma en vitamina A en nuestro organismo conforme este lo necesita. como la B6 o piridoxina. . las mucosas. mejora el tránsito intestinal. se debe consumir el fruto fresco en ayunas. Se sabe que el fruto posee alto contenido de ácido ascórbico (Rodríguez. pectina) es alto. los huesos y para el buen funcionamiento del sistema inmunológico. huesos y dientes. Usos Los frutos se pueden utilizar en jugos.

Tratamientos previos de los frutos del tomate de árbol. . Diagrama 1.

FERMENTACIÓN La fermentación alcohólica es un proceso biológico de fermentación en plena ausencia de aire (oxígeno . Pulpatado: se lo realiza en una licuadora en proporción de 1-1 con relación agua fruta. pH y °brix para poder realizar ajustes o corrección del mosto.1 kg de metasulfito de potasio. azúcares: por ejemplo. la fructosa.8%. Lavado: se lo realiza con agua y a mano esto con el fin de remover restos de tierra y materiales orgánicos. una hexosa) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol ELABORACIÓN. la sacarosa. es decir. Pesado: se pesa el valor de fruto que se desea obtener además nos sirve de guía para realizar los diferentes cálculos. originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono (por regla general. es decir. . cualquier sustancia que tenga la forma empírica de la glucosa. Sulfitado: se realiza para evitar la acción de microorganismos ajenos a la fermentación para lo cual se añade 0. La acidez se debe tener un valor de 0. Pelado: es necesario pelar la fruta ya que posee una capa amarga que altera el producto final. la glucosa. El pH de la acidez recomendada debe ser de 3. Corrección del mosto: se recomienda ajustar los grados brix a 21 que se determina mediante el brixometro esto se consigue mediante la adición de azúcar.5. Análisis del mosto: se mide la acidez.O2). Filtrado: se utiliza lienzo para evitar que pasen partículas pequeñas de materiales contaminantes.

SPL. Se lo debe realizar a temperatura ambiente se debe chequear periódicamente los grados brix y pH. Trasiego: consiste en separar el vino tierno del sedimento formado en las fermentaciones se lo realiza luego de dos semanas de haber iniciado la fermentación mediante una manguera higienizada y se lo pasteuriza a 60 °C por 20 minutos.02 ml/lt y 0.04ml/lt. Clarificación: se lo realiza mediante las enzimas 3XL. Dosificación de nutrientes: se recomienda la adición de fosfato de ácido amonio en una proporción de 1g/lt esto con el fin de acelerar la fermentación. . en una proporción recomendada por un experto.Tratamiento enzimático: el mosto obtenido se lo tratara con pectinas en dos concentraciones diferentes 0. Reposo: se deja reposar el mosto durante un lapso de tres horas esto con el fin de permitir la aireación del mismo para así lograr la completa disolución del anhídrido sulfuroso proveniente del metasulfito de sodio el cual al ser un reductor capta el oxígeno del aire que se ha disuelto en el mosto. Fermentación: se coloca el mosto en recipientes de fermentación plástica sulfatadas y equipadas de trampas de agua para evitar la entrada de agua y permitir la salida de dióxido de carbono. Inoculación: se usa saccharomices cereviciae previamente calentada con agua azucarada 12 °brix a 40 °C por 15 minutos en agua en una proporción de 7 gramos de levadura por cada 25 de mosto. después de esto se realiza un análisis de acidez y pH.

.Diagrama de flujo de la fermentación del tomate.

No conveniente en la industria cervecera. realiza su actividad fermentativa en el fondo de los recipientes. Saccharomyces cerevisiae. su presencia en cervezas causa turbidez. Especie cultivada. Desprenden olor a extractos de malta. ovales o alargadas. Se considera como la levadura autentica cervecera Saccharomyces pastorianus. su actividad fermentativa es de fondo. alto poder fermentativo. Es resistente a altas concentraciones de alcohol y anhídrido sulfuroso. seleccionada. Son células esféricas. No son saccharomyces.MICROORGANISMOS PRESENTES EN LA FERMENTACIÓN. comunes en flores. Se encuentran en gran cantidad en mostos de uvas atacadas por podredumbre. Tórulas. Brettanomyces. se conocen como levaduras falsas. Fermentación tardía. uvarum). Es la auténtica levadura del vino. Su actividad alcoholizante es escasa. de distintos colores. Produce fermentación superficial. Saccharomyces carisbergenis (s. Domina todo el proceso de fermentación. por lo que corresponde a una especie no cultivada. Se conoce como levadura silvestre. Saccharomyces elipsoideus. frutas y suelo. Son células ovalas en forma de salchicha. Son perjudiciales para los vinos en los que dan sabores anormales y producen acidez. Muy activas al inicio de la fermentación. Tiene gran resistencia al dióxido de azufre (SO2) Kloeckera apiculatis. se desarrollan lentamente formando cadenas de células Producen acidez. Se reproducen por gemación. Células en forma de limón. de forma esférica u oval. . Son asporògenas.

Esto es debido a dificultades intrínsecas en el cultivo (microorganismos parásitos de otros). y a la existencia de grupos de microorganismos que deben mantenerse en equilibrio para poder sobrevivir (casos de sintrofía por ejemplo). al desconocimiento de los requerimientos específicos de cultivo. mediante la producción de colonias aisladas en cultivos sólidos. DISEÑO DE UN MEDIO DE CULTIVO Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes. la variedad de medios de cultivo es también muy grande. Significa la eliminación de toda forma de vida de un medio o material. Esterilización. Puesto que la diversidad metabólica de los microorganismos es enorme. La mayoría de los medios de cultivo se comercializan en forma de liofilizados que es preciso rehidratar. factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.MÉTODOS DE AISLAMIENTO El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza. La preparación de un medio de cultivo se reduce en general a pesar la cantidad de medio y redisolverla en agua destilada (libre de inhibidores del crecimiento) siguiendo las instrucciones del fabricante. se produce una colonia observable a simple vista y formada por individuos iguales (un clon bacteriano). en la mayoría de los casos. por ejemplo. productos químicos u otra vía. El crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran número de ellas a partir de una única célula inicial de forma que. no todos los microorganismos presentes en las muestras ambientales son cultivables (microorganismos no cultivables). tras un periodo de incubación en las condiciones ambientales adecuadas.01 % de las bacterias marinas son cultivables. Existen procedimientos de enriquecimiento del número de bacterias de ambientes naturales para facilitar su aislamiento.1 . lo que se lleva a cabo generalmente por medios físicos. o por muerte de los organismos por calor. Se estima que en sólo en torno al 1% de las bacterias del suelo al 0.0. filtración. Las sustancias termolábiles se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los componentes previamente esterilizados en el autoclave. Sin embargo. Esta definición excluye por lo tanto cualquier técnica que .

Son indicadores ácido-base que se añaden para detectar cambios de pH en el medio. que a determinadas concentraciones en el medio actúan como agentes selectivos frente a determinados microorganismos. Sustancias como el cristal violeta. 9. Sangre completa. Las bacterias no son capaces de degradarlo. Fluidos corporales. Ej. 4. la lactosa y la sacarosa. Los más empleados son la glucosa. Sustancias que se añaden al medio para crear las condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerófilos o anaerobios. sangre desfibrinada. Peptonas. Son proteínas hidrolizadas. 5.: fosfatos bisódicos o bipotásicos. Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son: 1. Agar. las sales biliares etc.resulte solamente en un daño a los microorganismos o atenuación de la actividad de cualquier tipo. se obtienen por digestión química o enzimática de proteínas animales o vegetales. 3. Agentes selectivos. Indicadores de pH. Sistemas amortiguadores. 6. Extractos. 2. Es un polisacárido que se obtiene de ciertas algas marinas. Se utiliza como agente solidificante. . Azúcares. 7. Son una fuente de carbono para los microorganismos. 8. Agentes reductores. plasma o suero sanguíneo son añadidos a los medios empleados para el cultivo de algunos microorganismos patógenos. Son preparados de ciertos órganos o tejidos animales o vegetales obtenidos con agua y calor. Son sales que se añaden al medio para mantener el pH dentro del rango óptimo del crecimiento bacteriano.

se le añaden organismos) y a continuación incubado en condiciones que favorezcan el crecimiento microbiano. así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el cultivo.Medios de cultivo Es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para el desarrollo de los microorganismos. El crecimiento de los microorganismos es el cultivo. Uno de los sistemas más importante para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales parpadas en el laboratorio. Para que el las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura. Un cultivo puro contiene un único tipo de microorganismos.  Mesófilos: 35-37°C  Psicrófilos: 15-20°C  Termófilos: 50-60°C . grados de humedad y presión de oxigeno adecuadas. Condiciones físicas de un medio de cultivo Las condiciones químicas del medio de cultivo estén cubiertas. Los medios de cultivo deben contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y deben estar exentos de cualquier microorganismo contaminante. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de criamiento necesarios y debe estar exento de todos microorganismos contaminantes. el crecimiento y desarrollo de los microorganismos no tendrá lugar si se desconocen las siguientes condiciones físicas: Temperatura. un medio de cultivo puede ser inoculado (es decir. Cada especie tiene su temperatura óptima de crecimiento. Una vez que ha sido preparado.

Para que el las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura. Prepara el agar. Luz.Presión osmótica. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de criamiento necesarios y debe estar exento de todos microorganismos contaminantes. lo cual ayuda a promover un crecimiento bacteriano más sólido. Las halófilas requieren concentraciones superiores. En condiciones ambientales adversas. así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Algunos tipos de agar contienen nutrientes añadidos (como la sangre de oveja).  El tipo de agar más fácil de usar para este experimento es el agar nutritivo que viene en forma de polvo.6) Cultivar Bacterias en una placa Petri 1. La mayoría de las bacterias crece en 0. Todas bacterias necesitan un ambiente mucho más húmedo para su desarrollo que los hongos. Necesitarás 1.1 a 1% NaCl. El agar es una sustancia gelatinosa que se usa para cultivar bacterias. La mayoría de las bacterias crece en medio neutro o ligeramente alcalino (7 – 7.2 g (aproximadamente 1/2 cucharadita) de polvo de agar para cada placa de Petri de 10 cm (4 pulgadas) que deseas usar. Humedad. Es importante para los microorganismos fotosintéticos. algunas especies producen estructuras de resistencia a la desecación llamadas esporas que permanecen viables durante tiempo prolongado hasta que el ambiente sea propicio para la germinación. grados de humedad y presión de oxigeno adecuadas. Ph. Está hecho de un tipo de alga roja que proporciona una superficie de crecimiento ideal para muchos tipos distintos de bacterias. .

 Vuelve a colocar rápido la mitad superior de la placa de Petri para evitar que las bacterias transmitidas por el aire contaminen el experimento.  Coloca el bol o plato en el microondas y ponlo a hervir durante 1 minuto. mezcla 1/2 cucharadita de agar nutritivo en polvo con 60 ml (aproximadamente 1/4 taza) de agua caliente. vierte la solución de agar caliente en la mitad inferior de la placa de Petri. Esto protege el contenido del aire contaminado indeseable.  En un plato o bol resistente al calor. las cuales encajan entre sí. el polvo de agar debe estar disuelto por completo y el líquido debe ser claro.  Una vez que la solución esté lista. Deja enfriar la solución de agar durante varios minutos antes de proseguir. Multiplica estas cantidades por la cantidad de placas de Petri que planeas usar. Reserva la placa de Petri durante 30 . de otro modo. 2. Prepara las placas de Petri. vigilándolo para asegurarte de que la solución de agar no hierva en exceso. solo lo suficiente para formar una capa por encima del fondo de la placa. pero también permite que escapen los gases que producen las bacterias.  Saca la placa de Petri de su paquete y separa las dos mitades. Con mucho cuidado. los resultados del experimento podrían verse afectados. Están constituidas de dos mitades: una tapa y una base.  Las placas de Petri son recipientes pequeños de base plana que están hechos de plástico o vidrio transparente. Las placas de Petri recién compradas deben venir esterilizadas y selladas en empaques de plástico.  Las placas de Petri deben estar bien esterilizadas antes de usarlas para cultivar bacterias.

3. . Cuando estés listo para usarlas. Si no planeas usar de inmediato las placas de Petri llenas de agar. También permite que la superficie del agar se endurezca ligeramente. se parecerá a gelatina cuajada). hasta que la solución de agar se enfríe y se endurezca (cuando esté lista. debes almacenarlas en el refrigerador hasta que estés listo para continuar con el experimento. Esto ayudará a evitar que cualquier condensación de agua en la tapa gotee sobre el agar e interrumpa la superficie en crecimiento. 4. Introduce las bacterias en las placas de Petri.  Al momento de guardar las placas de Petri en el refrigerador. tocando el agar. retíralas del refrigerador y deja que alcancen la temperatura ambiente antes de introducir tus muestras.  Las placas de Petri llenas de agar se conservarán el refrigerador hasta un par de meses. minutos a 2 horas. Refrigera las placas de Petri hasta que estén listas para su uso. debes colocarlas boca abajo. lo cual evita que la rasgues o le hagas hueco al momento de trasladar tus muestras de bacterias.  Guardar las placas de Petri en el refrigerador evita que se evapore el agua al interior de ellas (las bacterias necesitan un ambiente húmedo para crecer).  Contacto directo: es el traslado de las bacterias a la placa de Petri usando el contacto directo. Una vez que la solución de agar se haya endurecido y las placas de Petri estén a temperatura ambiente. ya estás listo para la parte divertida: introducir las bacterias. por ejemplo. Hay un par de métodos para hacerlo: el contacto directo o la recolección de muestras. Una de las formas más comunes de hacerlo es simplemente presionar ligeramente la yema de tu dedo (ya sea antes o después de lavarte las manos) sobre la superficie del agar.

puedes colocar más de una muestra de bacterias en cada placa de Petri.  Recolección de muestras: con este método.  Asegúrate de etiquetar cada placa de Petri con el nombre de la fuente de las bacterias que contiene. Puedes hacerlo usando un poco de cinta adhesiva y un marcador. puedes colocar cada placa de Petri en una bolsa con cierre hermético. luego pásalo por la superficie del agar (sin rasgarla). puedes recolectar bacterias de casi cualquier superficie y trasladarlas a la placa de Petri. pero aún te permitirá ver el contenido de la placa de Petri. de modo que las gotas de agua no interrumpan el crecimiento de las bacterias. Simplemente toma un hisopo y pásalo sobre cualquier superficie que se te ocurra (el interior de tu boca.  Coloca las placas de Petri en un lugar oscuro y cálido. debes volver a colocar la tapa en la placa de Petri y sellarla con un poco de cinta adhesiva. durante varios días. de otro modo no sabrás cuál es cuál. 5. Una vez que hayas introducido las bacterias.  Como una medida de precaución adicional. Lo único que necesitas hacer es dividir la placa en cuadrantes (cuartos) y colocar una muestra distinta de bacterias en cada uno de ellos. . Etiqueta y sella las placas de Petri. las teclas del teclado de tu computadora o los botones de tu control remoto). Estos lugares albergan muchas bacterias y deben proporcionar algunos resultados interesantes (y desagradables) en un par de días. un picaporte.  Si deseas. No olvides almacenarlas boca abajo. Deja las placas de Petri en un lugar oscuro y cálido donde las bacterias puedan desarrollarse sin perturbaciones. lo único que necesitas son algunos hisopos. Esto proporcionará una capa adicional de protección contra las colonias de bacterias peligrosas que podrían desarrollarse.

Una vez que las bacterias empiecen a crecer.  Cocineta.  Guantes de látex  Algodón  Mascarilla  Gaza. SIEMBRAS DE CEPAS Materiales  Mandil  Pipeta de 10 ml. Si es necesario.  Autoclave.  Papel empaque  Matraz Erlenmeyer de 250 o  Saburadestroza 300ml. purificar del higo METODOLOGÍA MÉTODOS Y TÉCNICAS DE ESTERILIZACIÓN Esterilización es el proceso mediante el cual se matan o eliminan todas las formas de vida microbiana.  Caja Petri. podrías notar un olor particular que proviene de las placas. pero las bacterias crecerán con mayor lentitud. . puedes colocar las placas de Petri en un lugar frío.  Deja que las bacterias se desarrollen durante 4 a 6 días.  Agua de peptona.  Cofia  Mecheros.  Alcohol antiséptico.  Papel aluminio.  Caja Petri con el cultivo a  Probeta de 100 o 250 ml.  La temperatura ideal para el crecimiento de las bacterias es entre 20 y 37 °C (70 y 98 °F).  Agua destilada. ya que eso les dará a los cultivos suficiente tiempo para crecer.

Métodos físicos Calor La utilización de este método y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposición y la temperatura. para una válvula de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte. Autoclave Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. procurando que su nivel no alcance a los objetos que se disponen sobre una rejilla de metal. Funcionamiento: Se coloca agua en la caldera. uno para el manómetro. sostenida por una camisa externa metálica. Esta tapa posee tres orificios. Equipo Consta de una caldera de cobre. en distinto grado. . Todos los microorganismos son susceptibles. otro para el escape de vapor en forma de robinete y el tercero. que en la parte inferior recibe calor por combustión de gas o por una resistencia eléctrica.  El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. Este efecto se debe principalmente a dos razones:  El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. a la acción del calor Calor Húmedo El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Se cierra asegurando la tapa. Esteriliza a 120º a una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante 20 a 30 minutos. esta se cierra en la parte superior por una tapa de bronce. dejando abierta la válvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la solidificación de vapor en forma de chorro continuo y abundante. sin ajustar los bulones y se da calor.

hecha en determinadas condiciones. y luego un enjuague de 10 minutos. que son cajas de doble fondo. el aire caliente generado por una resistencia. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. se basa en el principio de TyndalÑ Las bacterias que resisten una sesión de calefacción. metal. circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cámaras. La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja.Tyndalización Esterilización por acción discontinua del vapor de agua. dejando abierta la válvula de escape. goma. o sea funcionando a la presión normal. Glutaraldehído Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos. También pueden ser usadas en Estufas de Formol. Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío. fusión de membranas. etc. Métodos Químicos Con aldehídos Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas. en donde se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60° . Estufas Es una doble cámara. vidrio. Puede esterilizar plástico. Estos compuestos destruyen las esporas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de metal. provocando una modificación irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática. Formaldehído Se utilizan las pastillas de para formaldehido. Rápido calentamiento y penetración Calor seco Produce desecación de la célula. pueden ser destruidas cuando la misma operación se repite con intervalos separados y en varias sesiones. que al dilatarse por el calor. a temperatura de 170º C para el instrumental metálico y a 140º C para el contenido de los tambores. Se efectúa por medio de la autoclave de Chamberland. cortan el circuito eléctrico. las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodón. que después pueden ser expuesta al calor para un rápida esterilización (acción del gas formaldehído).

La siembra se realiza con el asa. las poblaciones se encuentran suspendidas y es fácil homogenizarlas. que ejerce la acción biocida. a estos agregados se les denominan colonias. Una de las ventajas que presenta este tipo de cultivo se refiere a la posibilidad de agitarlos acelerando la velocidad de microorganismos anaerobios. Dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas: Los utensilios utilizados para la transferencia de muestras son los siguientes: Hisopo. En la transferencia de microorganismos se emplean agujas. los microorganismos al multiplicarse forman agregados que se hacen visibles a simple vista. Un cultivo líquido puede ser transferido mediante un asa microbiológica. pipetas o pipetas pasteur que deberán esterilizarse previamente. asa. asas de inoculación. hisopos. Los medios sólidos se preparan en tubos o matraces dependiendo de la cantidad o de las necesidades. así como de los diferentes medios de cultivo tienen aplicaciones específicas. en este tipo de cultivos. se inoculan con aguja de siembra (asa recta) o pipeta pasteur. lo que permite estandarizar la concentración del inóculo. un hisopo. pipeta o pipeta pasteur. por otra parte. La desventaja que presentan es que en ellos es difícil detectar contaminación a simple vista. Los medios semisólidos se preparan en tubos. Estos medios se emplean para estudiar la movilidad de los microorganismos y para favorecer la separación de microorganismos con diferentes requerimientos de oxígeno. las que presentan características que varían con el tipo de microorganismo cultivado y el medio .Esterilización por gas-plasma de Peróxido de Hidrógeno Es proceso de esterilización a baja temperatura la cual consta en la transmisión de peróxido de hidrógeno en fase plasma (estado entre líquido y gas). pipeta pasteur. en este último caso es necesario calentar el medio y cuando se encuentra en estado líquido y a una temperatura de aproximadamente 42ºC se agrega el inóculo. pipeta (para uso microbiológico son terminales y la parte superior o boquilla debe estar protegida con filtro de algodón). se homogeniza y se deja solidificar. estos se inclinan o vierten en cajas de Petri. En este tipo de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se manifiesta en la superficie o a través de todo el líquido. espátula y/o gancho. La utilización de estos dispositivos. después de esterilizarlos. el inóculo se deposita dentro del caldo o medio líquido. inoculando la superficie del agar con mucha suavidad. cable de Kolle o portasa con alambre de platino dispuesto en forma de: aguja. en estos medios. Por ejemplo: Los medios líquidos se preparan en tubos o matraces que se cubren con tapones de algodón o tapones especiales.

se desarrollan en un rango muy amplio de temperatura. lo que determina la deshidratación de los medios de cultivo. el crecimiento de cualquier cultivo experimental que se realice en incubadora no debe prolongare por más de nueve días. a estos se les llama microaerofílicos. El crecimiento óptimo de los microorganismos se presenta a temperaturas que la mayoría de las veces están relacionadas con la de su hábitat natural. ya que aun cuando la mayoría de los microorganismos crecen mejor en pH neutro. forma de agrupación. hay bacterias móviles e inmóviles fotosintéticas y quimio tróficas. Las bacterias son organismos procarióticos. Fisiológicamente este grupo presenta características muy variables. Existe una cuarta categoría que comprende bacterias que requieren oxígeno.de cultivo empleado. el suelo. algunos requieren de pH alcalino o ácido. por lo que al proporcionar un pH adecuado se favorecerá el crecimiento del microorganismo de interés y la obtención del cultivo. Con este mismo propósito durante la incubación se deben proporcionar las condiciones adecuadas para el microorganismo en estudio. ya sea como parásitos. Por lo tanto. un tercer grupo se adapta a las dos condiciones y se le conoce como facultativos. En general las incubadoras microbiológicas satisfacen las necesidades en cuanto a los rangos de temperatura requeridas por los microorganismos. pero sólo lo utilizan cuando éste existe en concentraciones reducidas. no todos los microorganismos crecen en presencia de oxígeno atmosférico. en tanto que para los microorganismos que presentan su crecimiento óptimo a temperaturas entre 20 y 25ºC se pueden incubar en la gaveta o cajón del laboratorio. otros requieren temperaturas más elevadas (30 a 45ºC) y algunos hasta 80ºC. En cualquier medio de cultivo es de primordial importancia ajustar el pH. Para alcanzar y mantener estas temperaturas se puede usar una incubadora microbiológica o un baño de agua a temperatura constante. reacción . Algunos microorganismos crecen por debajo de 15ºC. en la superficie o en el interior de plantas y animales incluyendo al hombre. En el estudio de cultivos bacterianos algunos de los criterios que se emplean para caracterizarlas incluyen: tamaño. La desventaja que tienen es que estos aparatos funcionan con aíre seco. a temperatura ambiente. autótrofas y heterótrofas. los que sólo crecen en presencia de aíre se llaman aerobios obligados. habitan en el agua. los que sólo crecen en ausencia de oxígeno se denominan anaerobios obligados o estrictos. Pueden vivir en forma libre o en simbiosis con otros organismos. pH y condiciones gaseosas. El desarrollo de estos diferentes grupos se favorece mediante la agitación de los cultivos o mediante la exclusión de oxígeno para lo que se emplean sustancias reductoras o equipos especiales. se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza. morfología celular. comensales o mutualistas. Con relación a las necesidades gaseosas.

Por ejemplo. Se agita vigorosamente para diluir las células y el proceso se repite cuantas veces sea necesario. igualmente estéril. Métodos de vertido en placa y extensión en placa En estos métodos. Por tanto. se flamea el asa. Se siguen estas técnicas cuando la muestra contiene tantos microorganismos. Conforme se van haciendo estrías en zigzag con el asa. dos células quedaron depositadas tan juntas que han originado una única colonia mixta. cultivos axénicos. Algunas . las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten en placa. cada vez se van depositando en la superficie del medio menos microorganismos. Para realizar diluciones de diez en diez. En el método de vertido en placa. Por tanto. formación de esporas. Quizás. elevación y color de las colonias. A continuación. casi con toda seguridad. tamaño. Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales. se toca en la región donde se han realizado las últimas estrías y se continúa la siembra con la misma técnica. las suspensiones de células microbianas se diluyen antes de su siembra en placa. conviene repetir el procedimiento a partir de una colonia bien aislada en la primera placa. presencia de inclusiones de reserva y características culturales en medios líquidos y sólidos en los que presentan patrones de desarrollo en cuanto a la forma. para asegurarnos de que hemos obtenido un cultivo axénico.a la tinción de Gram. una suspensión con mil millones de células por mililitro debe ser diluida 10 veces para obtener una suspensión con un centenar de células por mililitro. permitiendo que las células aisladas experimenten un número suficiente de divisiones para formar colonias visibles. Técnicas de siembra Método de siembra por estría en placa Es el método más fácil y el más usado para obtener cultivos axénicos. Para ello. se puede proceder de dos maneras diferentes. en la superficie de medio sin sembrar aún. se realizan diluciones seriadas (en varias etapas). no podemos asegurarlo. normalmente de diez en diez. movilidad. Aunque cada colonia posiblemente representa un clon derivado de una sola célula. Las colonias que se desarrollen la segunda vez serán. se añade 1 ml de la suspensión bacteriana a 9 ml (de medio estéril o solución salina. que la dilución no se puede realizar en una sola etapa. pero a veces de cien en cien. A continuación. las placas se incuban en un lugar adecuado. A continuación. con un asa de siembra se toma una muestra de la población mixta y a continuación se hacen estrías sobre la superficie de un medio sólido preparado en una placa Petri (a las placas Petri también se les denomina simplemente placas).

no existe la seguridad de que las colonias que aparecen en las placas sembradas por extensión o en el agar solidificado sembrado por el método del vertido en placas sean cultivos axénicos hasta que se repita el proceso. Se deberá Esperar hasta que la temperatura mencionada se reduzca hasta la temperatura ambiente y continuamos a abrir el autoclave y sacar el material ya esterilizado. Colocamos en el autoclave los materiales de vidrio correctamente envueltos hasta que alcance la temperatura adecuada de 121 ºC y un tiempo de 30 min ya que serán esterilizados totalmente los materiales. En ambas técnicas las placas se incuban hasta la aparición de las colonias. 6. 5. 3. extendiéndolas con ayuda de un asa de Diralsky de cristal estéril. La suspensión se absorbe en el agar. Contar la cantidad necesaria de papel aluminio que se utilizara para realizar la esterilización de los materiales de vidrio. . las muestras diluidas se siembran directamente en la superficie de la placa de agar. dejando las células microbianas sobre la superficie. 4. realizamos esto para que no exista contaminación hacia la pipeta que no utilizaremos.colonias quedarán embebidas en el agar y otras crecerán en la superficie. PROCEDIMIENTO a) Preparación y esterilización de materiales de vidrio. Las colonias superficiales se extenderán y serán más grandes. por tanto. 2. Procedemos a colocar agua en el autoclave. Las dos técnicas de siembra por dilución presentan la ventaja de que permiten obtener un mayor número de colonias aisladas que el método de siembra por estría. Las pipetas las colocamos horizontalmente sobre el papel aluminio y continuamos a envolver. Como en el método de siembra por estría. Las cajas Petri las colocamos una sobre otra siempre con la tapa arriba ya que si la colocamos a lo contrario al momento de utilizarlas se pueden romper y lo cubrimos con el papel aluminio totalmente. En el segundo método (extensión en placa). 1. se eligen cuando se ha de seleccionar una cepa a partir de una mezcla con varios tipos de microorganismos.

Continuamos a esterilizar el medio de cultivo en la autoclave a temperatura de 121 ° C y de presión durante 30 minutos (dependiendo de la cantidad de material). 2. 3. Realizar los diferentes cálculos de la cantidad necesaria para la preparación. Observar y leer determinadamente el instructivo del envase para preparar el medio de cultivo deshidratado de saburadestroza. c) Purificación de las cepas. se desarrollan colonias aisladas.b) Medio de cultivo sólido. Volver a esterilizar el asa. 3. para ello tomar una colonia aislada y sembrar por estrías una segunda placa. Transportamos las cajas Petri ya esterilizadas en la cámara de rayos UV y procedemos a colocar el medio de cultivo esterilizado en las cajas Petri en una poca cantidad.6 gr de agar nutritivo de saburadestroza en un matraz de 200ml y procedemos a disolver agitando bien el matraz. tocar en la zona de la placa ya sembrada y hacer un segundo grupo de estrías en una región nueva de la placa. 5. Después de la incubación. repetir el proceso entero. Esta operación debe ser rápida para evitar que la humedad del ambiente afecte al resto del contenido del frasco. 5. Colocamos 4. 4. Esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama de un mechero. Introducirla en la suspensión bacteriana para recoger una muestra. . 1. Repetir el proceso una tercera y una cuarta vez. 6. 2. Esperamos a que el medio de cultivo se solidifique en la biomasa. 1. a 9 °C para ello debemos agitar consecutivamente. Sembrar haciendo estrías sobre la superficie de un medio sólido en una placa Petri. 4. 7. 8. Debemos tapar el matraz y calentar hasta que haya una disolución total. Pesar la cantidad calculada del medio deshidratado de saburadestroza en una balanza. hasta conseguir que los grupos de células se diluyan y se separen células aisladas. Para estar seguro de que el cultivo es puro.

2009) MATERIALES  Cajas de petri  agar nutritivo(sabouraud dextrosa)  Mechero  Asas de inoculación  1 incubadora  1 refrigerador  Compañía de flujo laminar  Toallas de papel  Autoclaves  Balanzas analíticas  Alcohol antiséptico  Muestra del mosto de tomate de árbol. (Luque. PROCEDIMIENTO Y METODOLOGIA MÉTODOS DE AISLAMIENTO El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza. tras muchos ciclos reproductivos. El crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran número de ellas a partir de una única célula inicial de forma que. en la mayoría de los casos. se siembra en un medio de cultivo sólido donde las células que se multiplican no cambian de localización. mediante la producción de colonias aisladas en cultivos sólidos. tras un periodo de incubación en las condiciones ambientales adecuadas. . cada bacteria individual genera por escisión binaria una colonia macroscópica compuesta por decenas de millones de células similares a la original.PURIFICACION DE CEPAS Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por muchos tipos de bacterias. se produce una colonia observable a simple vista y formada por individuos iguales (un clon bacteriano). Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio crecerá como cultivo puro de un solo tipo de bacteria.

Por tanto. PROCEDEIMIENTO:  Dividir cada una de las cajas Petri por la parte de atrás en cuatro cuadrantes  Esterilizar el asa con el calor del mechero  Dejar enfriar el asa y tomar la muestra de la colonia  Inocular la muestra haciendo 4 o 5 estrias simples muy juntas de lado a lado por primer cuadrante de la caja  Flamear el asa de inoculación y hacer girar la caja un cuarto de vuelta  Abrir la caja y con el asa esterilizarla y fría tocar la superficie recién hechas en un punto alejado del inicio. A continuación. permitiendo que las células Aisladas experimenten un número suficiente de divisiones para formar colonias visibles. en la superficie de medio sin sembrar aún. las placas se incuban en un lugar adecuado. Realizar el mismo paso en el tercer cuadrante y en el cuarto cuadrante sin flamear el asa de siembra hará una estría más abierta. Quizás. se flamea el asa. Las colonias que se desarrollen la segunda vez. dos células quedaron depositadas tan juntas que han originado una única colonia mixta. Conforme se van haciendo estrías en zigzag con el asa. para asegurarnos de que hemos obtenido un cultivo axénico.  Las cajas con la base hacia arriba se incuban a 35 grados centígrados durante 24-48 horas. . con un asa de siembra se toma una muestra de la población mixta y a continuación se hacen estrías sobre la superficie de un medio sólido preparado en una placa Petri (a las placas Petri también se les denomina simplemente placas). cada vez se van depositando en la superficie del medio menos microorganismos. A continuación.MÉTODO DE SIEMBRA POR ESTRÍA EN PLACA Es el método más fácil y el más usado para obtener cultivos axénicos. cultivos axénicos. Aunque cada colonia posiblemente representa un clon derivado de una sola célula. serán. se toca en la región donde se han realizado las últimas estrías y se continúa la siembra con la misma técnica. casi con toda seguridad. conviene repetir el procedimiento a partir de una colonia bien aislada en la primera placa. Para ello. no podemos asegurarlo. Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales.

es un coco en cadena que a veces se observa en parejas.  Moraxella catarrhalis: Diplococo Gram negativo. En estos casos se produce la meiosis en la célula formándose un asca que contiene cuatro ascosporas haploides. Durante la fermentación del tomate de árbol los microorganismos que están presentes y que actúan como fermentadores son levaduras como Sacharomyces sp. Lactobacillus sp: son un género de bacterias Gram positivas anaerobias aerotolerantes. es gram(+). una haploide y otra diploide. Diplococos: Los diplococos son un conjunto de bacterias que se caracterizan por ser cocos tienen forma esferica asociados formando parejas de esferas. un tipo de levadura utilizado industrialmente en la fabricación de pan. como Pediococcus sp. Entre los diplococos patógenos más característicos encontramos a:  Streptococcus pneumoniae: Neumococo o diplococo Gram positivo. dando lugar a la fermentación láctica. estando presentes. bacterias acido lácticas Lactobacillus sp y diplococos Gram positivos. en el tracto gastrointestinal y en la vagina. En su ciclo de vida alternan dos formas. Muchas especies son importantes en la descomposición de la materia vegetal. En condiciones muy determinadas la forma diploide es capaz de reproducirse sexualmente. Los diplococos. cerveza y vino. son todos gram (-)  Neisseria gonorrhoeae: Diplococo Gram negativo. Sacharomyces sp : es un hongo unicelular. como tal. clásicamente. Actualmente está agrupado dentro de los streptococcus y. habitan en el cuerpo humano y en el de otros animales.  Streptococcus pneunoniae NO es estrictamente un diplococo. Lo que no pudimos es saber que tipo de microorganismos contenía cada cepa por lo cual a continuación tenemos los posibles microorganismos que se pudieran obtener en los cultivos microbiológicos. denominadas así debido a que la mayoría de sus miembros convierten la lactosa y algunos monosacáridos en ácido láctico.RESULTADOS Y DISCUCIONES Las purificaciones realizadas fueron correctamente pues obtuvimos los resultados esperados en nuestras 6 cajas Petri en donde realizamos la siembra por estriado después de haber seleccionado nuestras sepas las cuales se las escogió por su color su forma y su tamaño. Ambas formas se reproducen de forma asexual por gemación. por ejemplo. . Habitualmente son benignas e incluso necesarias.

 Contar con todos los materiales necesarios para acceder a un resultado óptimo  Aplicar las técnicas de aislamiento más adecuado para tener resultados óptimos y seguir los pasos para poder purificar las cepas y tener colonas exactas de las mismas morfologías. Se recomienda la utilización de levadura de vino (Saccharomyces cerevisiae) ya que fermenta más rápido. CONCLUSIÓN  El tomate tiene sus propias microorganismos presentes y que es de mucho uso industrial como el de Saccharomyces elipsoideus que sirve para la elaboración de vino en fin tiene mucgas características mismo del fruto el tomate de árbol tiene vitamina c y nutrientes (extracto de levadura y fosfato acido de amonio) garantiza un aumento del porcentaje de alcohol en la bebida. Son bacterias puramente homofermentativas.: es un género de bacterias del ácido láctico Gram-positivas de la familia Lactobacillaceae. Sp propio del tomate de árbol. Ciertos Pediococcus producen diacetil. Observamos la misma morfología que las cepas tomadas mayor crecimiento en los resultados de la levadura Saccharomyces. RECOMENDACIONES  Para un mejor resultado se recomienda tener al agar nutritivo apropiado para la determinación de levaduras. lo que proporciona un aroma a mantequilla o butterscotch a algunos vinos (tales como Chardonnay) y unos pocos tipos de cerveza. Normalmente se presentan en pares o tétradas. siendo las únicas bacterias del ácido láctico con forma de coco que se dividen a lo largo de dos planos de simetría. Las especies de Pediococcus a menudo se utilizan en el proceso de conservación del forraje denominado ensilado. Pediococcus sp.  Neisseria meningitidis. usualmente consideradas contaminantes de la cerveza y vino aunque en algunas cervezas tales como la de tipo Lambic es deseable su presencia. .

pdf?sequence=1 ANEXOS Imagen 1 imagen 2 La muestra que se va analizar Desinsectación de la muestra .uco.gov.co/bitstream/11348/6381/1/20061127162055_Interaccion%2 0microorganismo%20antracnosis%20tomate%20de%20arbol.disponible en http://bibliotecadigital.unne. Disponible en http://www.victoriananursery.gov.ar/unnevieja/Web/cyt/cyt/2001/5-Agrarias/A-077.pdf  Microbiología del tomate (en línea).co.ve/ceniaphoy3/articulos/n9/arti/arnal_e2/arti/arnal_e 2.pdf  Microorganismos presentes en el tomate de árbol ( en línea).es/xmlui/bitstream/handle/10396/9925/2013000000724.ceniap.htm http://www.uk/vegetable_seeds_and_plants/vegetable _plants/tamarillo_tree_tomato_plant/l/tamarillo.BIBLIOGRAFIA  Tomate de Árbol o Tamarillo (en línea).edu. Disponible en http://www.jpg  Planta de Tomate de Árbol (en línea). Disponible en http://helvia.agronet.

Imagen 3 imagen 4 Coger la 1 ml de la muestra colocar en agua de pentona Imagen 5 imagen 6 Mezclamos bien la muestra con el agua de pentona colocamos 1 ml de la muestra con agua de pentona en las cajas petri Imagen 7 imagen 8 Listo para poner en incubación resultados obtenidos levaduras .