PRCTICA ICP-MS

1.- Fundamento terico

2.- Descripcin de las partes del equipo
3.- Encendido del plasma. Visualizacin de parmetros
4.- Optimizacin (tunning). Parmetros de optimizacin
5.- Anlisis semicuantitativo
6.- Anlisis cuantitativo
7.- Prctica:
7.1- Anlisis Semicuantitativo
7.2- Creacin de un mtodo
7.3- Preparacin de una recta de calibrado
7.4- Crear una secuencia
7.5- Generar un informe.
7.6- Anlisis de espectros

1.- FUNDAMENTO TERICO :

Los componentes de la muestra se ionizarn por efecto de un plasma de

argn (plasma: volumen de gas con parte de sus tomos o molculas
ionizados). Estos iones producidos sern separados en base a su relacin
masa/carga en un espectrmetro de masas y posteriormente cuantificados por
un detector multiplicador de electrones. Esta tcnica tiene una amplia
aplicacin en la determinacin de elementos de inters medioambiental,
pudiendo analizar ms de 70 elementos de forma simultnea.

1
2.-DESCRIPCIN DE LAS PARTES DEL EQUIPO

1.- Introduccin de la muestra:

- Nebulizador
- Spray chambers
2.- Fuente de ionizacin:
- Antorcha
3.-Interfase de extraccin
- Cono sampler
- Cono skimmer
4.- Celda de colisin/reaccin : Octapolo
5.- Lentes Inicas
6.- Espectrmetro de masas : Cuadrupolo
7.- Detector : Multiplicador de electrones

Nebulizador : La muestra lquida es introducida en la corriente de gas

en forma de aerosol. La funcin del nebulizador es crear un aerosol con gotitas
de tamao pequeo y uniforme, puesto que solo las gotitas pequeas se
transportan al plasma.

Existen diferentes tipos de nebulizadores en funcin de sus caractersticas:

1. - Eficacia segn caudal de la muestra
2. -Tolerancia a slidos suspendidos o disueltos
3. -Tolerancia a cidos y bases fuertes y a solventes orgnicos.
4. - Diferentes posibilidades de que las muestras puedan causar efecto
memoria.
5. - Capacidad de aspiracin.

Spray chambers: Separa y desecha las grandes gotas de disolucin

que se han formado, para que solo las pequeas se encuentren en suspensin
en el flujo de gas y alcancen el plasma.

2
 Antorcha: Consiste en tres tubos concntricos de cuarzo a travs de
los cuales fluyen corrientes de argon. La antorcha est rodeada por una espiral
de 2-4 vueltas, la cual genera una radiofrecuencia, un campo electromagntico.
En ella se genera el plasma y se produce la ionizacin de la muestra.

Un plasma es cualquier volumen de gas con parte de sus molculas o

tomos ionizados, es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que
contiene cationes y electrones. Se produce porque una chispa de alto voltaje
provoca iones de Ar+ y e- en las paredes del tubo ms externo de la antorcha
creando el plasma. La radiofrecuencia origina colisiones no elsticas entre Ar+
y e-, dando lugar a ms iones de Ar. La interaccin campo-iones-electrones
genera movimiento de las especies en juego. La resistencia al movimiento
genera calentamiento. En el ncleo del plasma se alcanzan temperaturas de
10.000K. El plasma de Ar excita los iones positivos de los tomos de la
muestra. Conociendo la temperatura en el canal central y los valores de las
primeras energas de ionizacin, se sabe que la mayora de los elementos se
ionizarn.

3
 Sistema de vaco : Los espectrmetros de masas trabajan a baja
presin (alto vaco). El mantenimiento de una alta presin en la regin del
analizador es esencial para reducir el fondo y los efectos de dispersin que
causaran altos niveles de molculas residuales de gas.

La configuracin preferida es la de tres etapas diferenciadas por

sistemas de bombas de vaco, que comprenden la zona de la interfase, la
inmediata anterior al analizador y la zona del analizador, en las que las
presiones son progresivamente ms bajas.

El vaco en la interfase se consigue mediante una bomba rotatoria, que

se desconecta cuando el equipo est en standby, lo cual permite el fcil acceso
a esta zona para su mantenimiento.

El vaco en las otras dos zonas se obtiene gracias al bombeo de dos

bombas turbomoleculares separadas o por una sola bomba dual.

Espectrmetro
1.0 E-05 bar

Plasma
1 bar
1 mm 0.4 mm Haz de iones

Vaco
1.0 E-02 bar

Interfase Plasma/Vaco: La interfase comprende una etapa de bajo

vaco localizada entre dos placas cnicas de metal conocidas como Cono
Sampler (cono de muestreo) y Cono Skimmer (cono de separacin) que
llevan perforados un pequeo orificio. El trmino interfase es aplicado a estos
conos y al espacio formado entre ellos.

El papel de la interfase es extraer una porcin representativa de la

poblacin de iones del plasma y transferirla eficientemente a las regiones de

4
 alto vaco, donde se encuentran las lentes de enfoque, el espectrmetro de
masas y el detector.

Cono Sampler: o cono de muestreo, es un cono de nquel con un

pequeo orificio central (1 mm), a travs del cual pasa el plasma a una cmara
con una presin de 10 mbar, all se produce una expansin rpida del gas que
provoca su enfriamiento. Una fraccin del gas pasar al Cono Skimmer : o
cono separador que es tambin de nquel y a travs del cual el plasma pasar
a una cmara mantenida a la presin del espectrmetro de masas. En ella el
gas es separado de los iones + y bombeado hacia fuera. Los cationes son
enfocados al MS a travs de las lentes inicas.

Lentes Inicas : Las lentes inicas son placas electrostticas situadas

en la zona intermedia, que enfocan el haz de iones que proviene del skimmer,
se les aplica un voltaje que har que los iones positivos del plasma sean
atraidos y puedan ser manipulados en la trayectoria requerida. Adems de
dirigir y enfocar los iones, el sistema de lentes inicas es responsable de
separar los iones de las especies neutras y de los fotones gracias a los campos
electrostticos creados.

Celda de Colisin Reaccin : La celda de colisin/reaccin consiste en

un octopolo (ORS) en el que se eliminarn las interferencias poliatmicas por el
efecto de :

Hidrgeno : gas reactivo, que reacciona con las interferencias

Helio: gas inerte que colisiona con los interferentes.

La principal fuente de interferencias espectrales en ICP-MS son:

1.- Superposicin directa de un elemento diferente con un

istopo de la misma masa nominal, es una interferencia
isobrica. Sn-114 con Cd-114.

2.- Superposicin de un in poliatmico formado por la

combinacin de especies derivadas del gas del plasma,
disolvente de la muestra y/o matriz de la muestra. Ca 40O16 con
Fe56 .

3.- Especies dobles cargadas formadas por la prdida de dos

electrones en vez de uno. El cuadrupolo separa los iones en
base a su relacin m/c, as un in doble cargado tendr la
masa M/2. As 136Ba2+ se solapa con 68Zn+ .

Modos de trabajo celda de colisin/reaccin

Modo Hidrgeno reaccin :

Utiliza un gas reactivo el hidrgeno.
Mecanismo de reaccin.

5
 Especfico para la eliminacin de interferencias poliatmicas de
Argn.
Especfico para determinaciones de Ca ; Fe y Se.

Modo Helio Colisin :

Utiliza un gas inerte el helio, que no reacciona con la matriz de la
muestra y por ello no se producen nuevas interferencias.
General, elimina mltiples interferencias. Puede ser aplicado a todas
las matrices y a todas las muestras utilizando las mismas
condiciones analticas.

Modo Normal :
Se opera sin gas aadido en la celda de colisin.
El oct Apolo solo acta como gua del haz de iones.
Este modo se utiliza para el anlisis de elementos de masas bajas no
interferidos, como Li, Be y B. Tambin para elementos que no
requieren eliminar interferencias tales como Pb, Tl y U.

Analizador de masas : Cuadrupolo: Son cuatro barras de

metal que se encuentran paralelas y equidistantes, a las cuales se les aplica un
potencial de corriente continua y un potencial de radiofrecuencia. La
combinacin de estos campos hace que solo aquellos iones de una
determinada relacin m/z tengan una trayectoria estable y lleguen al detector .
Por lo tanto, el cuadrupolo separa los iones en base a su relacin m/z.

Detector : Multiplicador de electrones : Cuando los iones chocan

con su superficie se originan electrones secundarios que se movern ,debido
al cambio de potencial, hacia otras zonas donde originarn ms electrones
secundarios, los cuales provocarn una seal elctrica.

3.- ENCENDIDO DEL PLASMA. VISUALIZACIN DE

PARMETROS

De forma habitual el equipo se mantiene en modo Standbye, es decir

con el vaco conectado. Al comenzar una sesin de trabajo debemos conectar
el plasma, pero antes debe estar encendido el sistema de refrigeracin y el
extractor. Una vez encendida la antorcha el equipo pasar al modo anlisis y ya
podemos empezar a trabajar. Es importante comprobar el estado de todos los
parmetros en el panel de control :

- vaco : presin en la interfase y en el analizador

- agua de refrigeracin : flujo, temperatura
- presin y flujo del plasma gas y del carrier gas.

6
4.- OPTIMIZACIN (TUNING). PARMETROS DE OPTIMIZACIN

La sintona es una operacin bsica que se realiza antes de una sesin

analtica. El objetivo es conseguir una seal estable y sensible usando una
solucin de sintona de 1 ppb de Li, Y, Ce y Tl.
Los parmetros de sintona a tener en cuenta son sobre todo la posicin de la
antorcha, flujo de gas y posicin de las lentes extractoras e inicas.

- Sensibilidad : Con Li-7 ; Y-89 y Tl-205 cubriremos

prcticamente todo el rango de masas y podremos ver la seal
obtenida ( cps: cuentas por segundo). La RSD% no puede ser
mayor del 15%.

- Formacin de xidos : El nivel de xidos (MO+) se mide a

partir de la relacin CeO/Ce , puesto que el CeO es muy
estable en el plasma y tiene un fuerte enlace. Es deseable un
bajo nivel de xidos en un ICP-MS y la medida del cociente
CeO/Ce da una referencia sobre la robustez del equipo

Formacin de especies dobles cargadas : Aquellos elementos

con una segunda energa de ionizacin ms baja que la
primera de Ar alcanzar un grado significativo de formacin de
carga 2+. Estos elementos son los alcalino-trreos, metales de
transicin y REE.

Forma de los picos espectrales.

5.- ADQUISICIN E INTERPRETACIN DE DATOS

El ICP-MS proporciona dos tipos de medidas:

1.- Scanning : Realiza una exploracin de un rango de
masas definido y el cuadrupolo camina secuencialmente a
travs de todo el rango de masas definido. Es el mtodo de

7
 adquisicin ms adecuado para la investigacin de
muestras desconocidas, donde la matriz es desconocida y
se precisa conocer la posible presencia de analitos que
puedan originar interferencias en la medida de las
muestras.

2.- Peak jumping : Donde el operador selecciona los

istopos a ser medidos y las masas no seleccionadas son
saltadas. Es el mtodo de medida utilizado cuando los
analitos objeto de estudio son conocidos y no se requiere
otra informacin adicional ( por ejemplo, la presencia o no
de otros analitos).

5.- ANLISIS SEMICUANTITATIVO

En un anlisis semicuantitativo, el equipo da unos valores de concentracin

para cada masa en base a una curva de respuesta molar.

RM = (Seal x Potencial ionizacin) / (Abundancia x Concentracin)

m/z = masa/carga

Originariamente, los fabricantes del equipo con una solucin

multielemental de concentraciones conocidas elaboraron una curva de
respuesta molar que es la que dispone el software del equipo. Al hacer un
anlisis semicuantitativo, el cuadrupolo ir barriendo todo el espectro y para
cada masa obtendremos una seal, es decir un nmero de cuentas o de
cuentas por segundo, que aplicada a la curva nos dar una respuesta molar.
Conociendo todos los trminos de la frmula despejar la concentracin. Pero
debemos tener en cuenta que el estado del equipo vara cada da, por lo que
las seales obtenidas sern diferentes y por lo tanto tambin lo ser la curva de
respuesta molar. Una forma de obtener una curva real en cada momento es
hacer un ajuste de la misma con patrones de concentracin conocida e
inmediatamente despus realizar el anlisis de la muestra.

8
 En la prctica, este mtodo sirve para conocer la matriz y para
investigar en qu rango de concentraciones nos encontramos y nos da un
error del 5 al 30%.

6.- ANLISIS CUANTITATIVO

La cuantificacin se obtiene a travs de la comparacin de las cuentas

medidas de la muestra desconocida con aquellas de una sustancia que
contiene una cantidad conocida del elemento o istopo de inters. Existen
diversos mtodos para realizar un anlisis cuantitativo, utilizaremos el mtodo
de calibracin externa con el uso de soluciones standards que cubran todo el
rango de concentraciones esperado. Tambin emplearemos patrones internos
que nos permitirn compensar la deriva de la seal y algunos efectos de la
matriz. Como norma general, el patrn interno no debe estar presente en la
muestra y debe poseer una masa y un potencial de ionizacin similar al
elemento a determinar.

7.- PRCTICA : Determinacin de Mn, Cu, As, Cd, y Pb en una muestra

de suelo y de agua de riego.

7.1- Anlisis Semicuantitativo :

7.2- Creacin de un mtodo : En la tabla peridica marcaremos los

istopos de los elementos a determinar y el modo de medida (normal,
hidrgeno o helio) y haremos tres repeticiones de cada anlisis. El programa
nos da la opcin de analizar todos los istopos de cada uno de los elementos,
como norma general, marcaremos el istopo recomendado por el equipo que
es el que menos interferencias presenta, aunque cuando sospechemos que el
analito pueda estar interferido por iones poliatmicos procedentes de la matriz
o del propio plasma, seleccionaremos varios istopos y analizaremos los
espectros.

7.3- Preparacin de una recta de calibrado : A partir de soluciones patrn

comerciales de 1000 ppm preparamos una solucin intermedia de 5 ppm.

Elemento Peso acumulado Peso real Concent. ppm

Mn
Cu
As
Cd
Pb

Peso volumen total

Conc. ppm = ( peso real * 1000 ) / Peso volumen total

9
 Conc. Ideal ppb Peso Peso vol.total
P0 0
P1 2
P2 5
P3 10
P4 25
P5 50
P6 100
P7 200

Calcularemos la concentracin real de cada patrn :

Conc ppb = (Peso patrn * ppm sol.interm. * 1000 ) / Peso vol.total

P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7
Mn
Cu
As
Cd
Pb

Metemos los datos y despus de analizar los patrones preparados mediante

una secuencia, ajustamos las rectas hasta obtener una buena regresin.
Los estndares internos sern aadidos tanto a muestras como a patrones en
igual concentracin.

7.4 Anlisis de las muestras : Creamos una secuencia y analizamos

las muestras con el mtodo y la calibracin que se cre anteriormente. El
equipo lo hemos programado para que haga 3 anlisis de cada muestra y para
que nos de cmo resultado final el promedio de las tres medidas.

7.5 Anlisis de espectros : El espectro de masas es la representacin

de la seal obtenida frente a la masa. Se puede analizar el espectro obtenido
en un anlisis, mediante el acceso a la informacin contenida en la base de
datos de los elementos que dispone el equipo.

7.6 Generacin de un informe : Todos los datos del anlisis.

10