Operacin ms utilizada a escala industrial.

Se utiliza para eliminar de forma individual los componentes de una mezcla

gaseosa o lquida.

Se efecta en columnas empacadas con adsorbente.

E
T
A
P
A
S

absorcin

Lavado de impurezas

Elucin de soluto

 Tratamiento de aguas
residuales
Industria
azucarera

Decoloracin
aceites
refinacin.

en

de
la

Dra. Ariana Huerta

Heredia

LPEZ VICENTE ALMA PATRICIA.

SNCHEZ RIVERA JAZMN.

INGENIERA EN ALIMENTOS
L-8

Pigmentos vegetales: clorofilas y

xantofilas.

Extracto de hojas

Las especies separadas aparecan

como bandas coloreadas.

CROMATOGRAFA

chroma que significa color

graphein que significa escribir).

Inventada por Mikhail Tswett a

principios del siglo XX.

Carbonato de
calcio,
Almina,
Sacarosa

CROMATOGRAFA

Cromatografa
puede ser

Plana

En
columna

CROMATOGRAFA LQUIDA PLANA

Eluyente: disolvente o mezcla de ellos, fcilmente evaporable.

En papel

En capa fina
Fase estacionaria= adsorbente, los ms usados
slica gel (SiO2 ) y almina (Al2O3), adherido a
un soporte de plstico, vidrio o aluminio.

En capa fina
La fase mvil asciende por
capilaridad a travs de la fase
estacionaria, compitiendo con
sta por los analitos.

Los compuestos ms polares quedarn ms adsorbidos por la fase

estacionaria mientras que los menos polares avanzarn ms con el eluyente.

Cromatografa
puede ser

Plana

En columna

Cromatografa

Fase
estacionaria

Slido

Fase mvil

Lquido

Gas

Lquido

Fluido
supercrtico

13

Cromatografa de gases
La muestra se vaporiza.
La fase mvil no interacta con las molculas del analito; su
funcin es transportarla travs de la columna.

Cromatografa gas-lquido (CGL)

FM: gaseosa
FE: Lquido, inmovilizada sobre la superficie de un relleno slido inerte.
APLICACIN: cidos grasos, aceites esenciales.
Cromatografa gas-slido (CGS)
Retencin de los analitos (por adsorcin)
Separacin de especies gaseosas de bajo PM.
Aire
Sulfuro de hidrgeno
Monxido de carbono

Disulfuro de carbono
Dixido de carbono

xidos de nitrgeno
Gases nobles.

Cromatografa de lquidos

TCNICA ANALTICA DE SEPARACIN

Sensibilidad
Fcil adaptacin
Exactitud
Capacidad de separar especies no voltiles o termolbiles.

Cromatografa de lquidos
puede ser

Segn mecanismo
separacin
Adsorcin

pueden ser

Particin

Intercambio
inico
Afinidad

Exclusin
molecular

Cromatografa particin
F.E UN LQUIDO ADSORBIDO O LIGADO
A UN SLIDO INERTE

Fundamento:
Separacin debida a la diferencia de
solubilidades entre ambas fases. Similar
al fenmeno de extraccin.

APLICACIONES:
Edulcorantes artificiales
Antioxidantes
Aflatoxinas
Aditivos

Cromatografa adsorcin
F.E SLIDO ACTIVO
Fundamento:
Diferencias de solubilidades en F. M. y
de retencin en F. E. de los
componentes de la mezcla
APLICACIONES:
Separar azcares- (azucares aminados y
glicoprotenas)

F.E: Slice y la almina.

Tiempo Retencin Polaridad del

analito.

Cromatografa exclusin
F.E MATERIAL POROSO
INERTE (GEL)

Fundamento:
Separacin del soluto segn su tamao
y estructura molecular
F.E: slice o de polmeros que contienen una red de poros
APLICACIN:
Separacin de cidos grasos
tiempo de residencia

Cromatografa afinidad
F.E SOPORTE SLIDO CON UNA
SUPERFICIE ACTIVADA AL QUE SE
ENLAZA UN LIGANDO DE AFINIDAD
Fundamento:
Adsorcin reversible y selectiva, basada
en el acoplamiento llave-cerradura,
entre el analito y ligando.
Ligando: Anticuerpos, Inhibidores de enzimas se enlazan
a las molculas del analito.
F.E: Agarosa o cuentas de vidrio poroso.
PURIFICACIN DE PROTENAS
Los analitos retenidos pueden ser arrastrados cambiando las condiciones de la fase mvil.

Cromatografa intercambio inico

F.E SLIDO CON CARGA
Fundamento:
La F. E. tiene grupos cargados que
interaccionan electroestticamente
con iones de signo contrario de la F. M.
F.E: resinas, arcillas, zeolitas, slice
APLICACIONES:
Sueros
Conservadores
Mezclas de vitaminas
Azucares
Separacin y deteccin de aminocidos

BIBLIOGRAFA

Skoog A. Douglas, West M. Donald. (1980)

Principles of instrumental analysis. Ed.
Saunders college. Second Edition.
Philadelphia.
Tejeda A., Montesinos R.M., Guzmn R.
(1955) Bioseparaciones. Ed. UNISON.
Mxico
22