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Seccin C
Marcadores moleculares:
una herramienta para explorar
la diversidad gentica
1 Introduccin
Los marcadores de ADN son tiles tanto en la
investigacin bsica (p. ej., anlisis filogentico
y bsqueda de genes tiles) como en la aplicada
(p. ej., seleccin asistida por marcador, pruebas de
paternidad y trazabilidad de los alimentos). Esta
seccin se centra sobre todo en su aplicacin a la
caracterizacin de la diversidad de los recursos
zoogenticos, y en la bsqueda de variantes
funcionales de determinados genes. Hay que
destacar que el ARN y las protenas tambin
contienen informacin clave, y que por tanto
merecen un estudio paralelo; su papel en la
bsqueda de variantes funcionales se explora
asimismo ms abajo.
La diversidad entre organismos es consecuencia
de las diferencias en las secuencias de ADN y de
los efectos ambientales. La variacin gentica
es notable, y cada individuo de una especie, a
excepcin de los gemelos monocigticos, posee
una secuencia de ADN nica. Las variaciones en el
ADN son mutaciones resultantes de la sustitucin
de un solo nucletido (polimorfismos de un
solo nucletido SNP), insercin o delecin de
fragmentos de ADN de diversas longitudes (desde
uno a varios miles de nucletidos), o duplicacin o
inversin de fragmentos de ADN. Las variaciones
del ADN se clasifican como neutras cuando no
originan cambios en los caracteres metablicos o
fenotpicos, y por consiguiente no estn sometidas
a seleccin positiva, negativa o de reequilibrio; en
caso contrario, se denominan funcionales. Las
mutaciones en nucletidos clave de una secuencia
codificadora pueden alterar la composicin de
393
Parte 4
Recuadro 70
ADN, ARN y protena
El ADN (cido desoxirribonucleico) est organizado en
pares de cromosomas, siendo cada uno heredado de
uno de los progenitores. Cada gen de un individuo, por
tanto, posee dos copias, llamadas alelos, uno en cada
cromosoma de un par. En los mamferos, los genes
estn diseminados a lo largo de los cromosomas, y
separados por secuencias de ADN largas y normalmente
repetitivas. Los genes estn formados por secuencias
codificadoras (exones) separadas por intrones. Estos
ltimos no llevan informacin para codificar protenas,
pero en ocasiones desempean un papel en la
regulacin de la expresin gnica. Las instrucciones
codificadas por los genes se activan mediante dos
procesos. El primero es la transcripcin (copia) de
informacin gentica a otro tipo de cido nucleico,
el ARN (cido ribonucleico). Tanto los exones como
los intrones se transcriben a una molcula de ARN
mensajero primario (mARN). A continuacin, dicha
molcula es modificada, en un proceso que conlleva la
eliminacin de los intrones, la unin de los exones, y
la adicin de caractersticas nicas a cada extremo del
mARN. Se crea as una molcula de ARN madura, que
se transporta entonces a estructuras conocidas como
ribosomas, localizadas en el citoplasma celular. Los
ribosomas estn formados por ARN ribosmico (rARN) y
protenas, y proporcionan sitios para el segundo proceso
moleculares en la caracterizacin
394
Recuadro 71
Las nuevas disciplinas cientficas,
las micas
La genmica cartografa los genes y las variaciones
genticas de distintos individuos y grupos. Nos
informa de la traduccin de la informacin gentica en
funciones metablicas y caracteres fenotpicos. Revela
procesos biolgicos y sus interacciones con factores
medioambientales. La genmica consiste en combinar
un conjunto de tecnologas ultrarrpidas, como la
protemica y la metabolmica, con las tcnicas de
bioinformtica que posibilitan el procesado, anlisis e
integracin de grandes volmenes de datos.
Recuadro 72
Avances recientes en biologa
molecular
Los actuales avances revolucionarios en el campo de
la biologa molecular con aplicaciones en la cra de
ganado y la conservacin de la diversidad gentica
incluyen:
1. establecimiento de la secuencia genmica
completa de las especies agropecuarias ms
importantes;
2. desarrollo de tecnologa para medir
polimorfismos en loci diseminados por todo el
genoma (p. ej., mtodos para detectar SNP); y
3. desarrollo de tecnologa de microarrays para
medir la transcripcin gnica a gran escala.
La informacin obtenida mediante el secuenciado
del genoma entero (ya conseguido para gallinas y
casi terminado para cerdos y bovinos), integrada con
la tecnologa SNP, acelerar la bsqueda de genes.
El cartografiado de los loci de caracteres cuantitativos
(QTL) para identificar regiones cromosmicas que
influyen en un determinado carcter diana, la
presencia de genes candidatos localizados en la
misma regin, y la investigacin de sus patrones
de expresin (mediante los anlisis por microarrays
y protemicos), as como su funcin en distintas
especies, se combinarn para identificar genes clave
y desvelar la complejidad de la regulacin fisiolgica
de los caracteres diana.
Vase ms adelante una descripcin ms detallada de dichos
avances.
395
Parte 4
396
Microsatlites
Actualmente, los microsatlites (Recuadro 74)
son marcadores ms populares en los estudios de
caracterizacin gentica del ganado (Sunnucks,
2001). Su alta tasa de mutacin y naturaleza
codominante permiten la estimacin de la
diversidad gentica dentro y entre razas, as como
la mezcla gentica entre razas incluso si estn
estrechamente emparentadas.
Hay cierta polmica respecto a la eleccin de
un modelo de mutacin el modelo de alelo
continuo o infinito o el modelo de mutacin
discreto o por pasos (Goldstein etal., 1995)
para el anlisis de los datos de microsatlites.
De todos modos, los estudios de simulacin han
demostrado que el modelo de mutacin de alelo
infinito suele ser generalmente vlido para la
evaluacin de la diversidad dentro de una especie
(Takezaki y Nei, 1996).
El nmero medio de alelos (MNA) por poblacin,
y la heterocigosidad observada y esperada
(Ho y He), son los parmetros ms usuales en
la evaluacin de la diversidad intrarracial. Los
parmetros ms simples para evaluar la diversidad
Recuadro 73
Extraccin y multiplicacin del ADN
y ARN
El primer paso en el anlisis de ADN, ARN y protenas
es su extraccin y purificacin a partir de las muestras
biolgicas. Existen varios protocolos y equipamientos
comerciales. Las estrategias aplicadas dependen del
material fuente y de la molcula diana. Por ejemplo,
la extraccin de ADN de sangre entera o leucocitos
es relativamente fcil, en tanto que su extraccin de
alimentos procesados es ms difcil. La extraccin de
ARN de tejido pancretico es difcil debido a su rpida
degradacin en dicho rgano. La pureza del ADN, ARN y
protenas es a menudo un factor clave que no se cuida
lo suficiente en la obtencin de resultados fiables.
Tras aislar el ADN (o el ARN) de las clulas,
el siguiente paso es obtener miles o millones de
copias de un gen determinado o fragmento de
ADN. La multiplicacin de fragmentos de ADN se
puede encomendar a la accin de microorganismos,
generalmente E. coli, o puede realizarse in vitro
utilizando la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Esta tcnica, por la que su creador, Cary Mullis, obtuvo
el Premio Nobel, amplifica exponencialmente cualquier
segmento de ADN de secuencia conocida. El componente
clave de una reaccin PCR es la ADN polimerasa aislada
de Thermus aquaticus, un microorganismo adaptado
a vivir y multiplicarse a muy alta temperatura. Esta
polimerasa termoestable (llamada Taq- por Thermus
aquaticus) permite la replicacin de cadenas en ciclos
y produce un crecimiento geomtrico del nmero de
copias del ADN diana. Un ciclo PCR incluye tres pasos:
i) desnaturalizacin del ADN a 90-95 C para separar el
ADN en dos cadenas que servirn de plantilla; ii) hibridacin
de una pareja de oligonucletidos de cadena nica corta
(cebadores) complementarios de las regiones diana que
flanquean por ambos extremos el fragmento de inters,
a 45-65 C; iii) extensin o elongacin de las cadenas
recin sintetizadas de ADN iniciada por los cebadores y
facilitada por la Taq-polimerasa, a 72 C. Dicho ciclo se
puede repetir, normalmente unas 25 a 45 veces, para
permitir la amplificacin de suficientes amplicones (un
fragmento de un gen o de ADN sintetizado usando la
PCR) para que se puedan detectar.
397
Parte 4
Recuadro 74
Marcadores habituales de ADN
Los polimorfismos por restriccin de la longitud de los
fragmentos (RFLP) se identifican usando enzimas de
restriccin que parten el ADN nicamente en puntos
o sitios de restriccin precisos (p. ej., EcoRI corta
en el sitio definido por la secuencia palindrmica
GAATTC). Actualmente, el uso ms frecuente de los
RFLP es en combinacin con la PCR (PCR-RFLP),
para detectar alelos que difieren en secuencia en un
sitio de restriccin concreto. Primero se amplifica un
fragmento de gen con la PCR, y luego se expone a un
enzima de restriccin especfico que corta solamente
una de las formas allicas. Los amplicones digeridos
suelen resolverse mediante electroforesis.
Los microsatlites o SSR (Repeticiones de
Secuencia nica) o STR (Repeticiones Simples en
Tndem) consisten en un tramo de ADN de unos
cuantos nucletidos de longitud de 2 a 6 pares
de bases (bp) que se repiten varias veces en
tndem (p. ej., CACACACACACACACA). Estn
diseminados por todo el genoma de los eucariotas.
Los microsatlites son de un tamao relativamente
pequeo y, por consiguiente, pueden ser fcilmente
amplificados con la PCR usando ADN extrado de
fuentes diversas, como la sangre, el pelo, la piel,
e incluso las heces. Los polimorfismos se pueden
visualizar en un gel secuenciador, y la disponibilidad
de secuenciadores automticos de ADN permite un
anlisis ultrarrpido de un gran nmero de muestras
(Goldstein y Schltterer, 1999; Jarne y Lagoda, 1996).
Los microsatlites son hipervariables; muestran a
menudo decenas de alelos en un locus que difieren
entre s en el nmero de repeticiones. Siguen
siendo los marcadores de eleccin para estudios
de diversidad, para anlisis de parentesco y para el
cartografiado de Loci de Caracteres Cuantitativos
(QTL), pero esto podra cambiar en el futuro prximo
con el desarrollo de mtodos baratos para el anlisis
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Recuadro 75
Muestreo del material gentico
La recogida de muestras es el primer y ms
importante paso en cualquier estudio de
diversidad. A poder ser, las muestras no deberan
estar relacionadas y s ser representativas de las
poblaciones en estudio. Por lo general, la toma de
muestras de 30 a 50 individuos bien escogidos por
raza se considera suficiente para dar una pista sobre
los caracteres distintivos de la raza y la diversidad
intrarracial, siempre y cuando se analice un nmero
adecuado de marcadores independientes (unos
2030 microsatlites; Nei y Roychoudhury, 1974; Nei,
1978). Sin embargo, las cifras reales pueden variar
de un caso a otro, y pueden incluso ser inferiores en
el caso de una poblacin local muy endogmica, y
superiores en una poblacin muy diseminada dividida
en ecotipos distintos.
La eleccin de muestras no relacionadas es
bastante sencilla en una raza bien definida, ya que
puede basarse en el libro del rebao o en el registro
del pedigr. En cambio, puede ser ms difcil en una
poblacin semi-asilvestrada de la que no existen
registros escritos. En este caso, es muy recomendable
el uso de un criterio geogrfico, es decir, tomar
muestras de un nico o de muy pocos animales (no
relacionados) por rebao a partir de los rebaos
diseminados en una amplia rea geogrfica. El
registro de las coordenadas geogrficas, y la fotodocumentacin de los lugares de toma de muestras,
de animales y de rebaos resulta valiossimo para
documentar cruces en caso de valores atpicos
inesperados, o para identificar pautas geogrficas
interesantes de diversidad gentica. Un conjunto
bien escogido de muestras es un recurso valioso y
duradero, que se puede usar para producir resultados
significativos incluso con tecnologa bsica. Por el
contrario, una muestra sesgada producir resultados
distorsionados o difciles de entender aunque se
utilicen las herramientas moleculares ms avanzadas.
399
Parte 4
SNP
Los SNP (Recuadro 74) se utilizan como
alternativa a los microsatlites en los estudios de
diversidad gentica. Existen diversas tecnologas
para detectar y tipar los marcadores SNP (vase
la revisin de Syvnen, 2001). Al ser marcadores
biallicos, los SNP poseen un contenido de
informacin bastante bajo, y hay que usar
muchos para llegar al nivel de informacin
obtenido a partir de un panel estndar de 30 loci
400
AFLP
Los AFLP son marcadores biallicos dominantes
(Vos etal., 1995). Las variaciones en muchos
loci se pueden detectar simultneamente en
un microarray para detectar variaciones en
nucletidos nicos en regiones genmicas
desconocidas, en las que puede hallarse
frecuentemente una mutacin en genes
funcionales indeterminados. Un inconveniente,
sin embargo, es que muestra un modo dominante
de transmisin; ello reduce su capacidad en
anlisis genticos poblacionales de la diversidad
dentro de una raza, y en la endogamia. Por otra
parte, los perfiles AFLP dan mucha informacin
relativa a la relacin entre razas (Ajmone-Marsan
etal., 2002; Negrini etal., 2006; De Marchi
etal., 2006; SanCristobal etal., 2006b) y especies
emparentadas (Buntjer etal., 2002).
401
Parte 4
402
El resultado de un experimento de
cartografiado QTL es la identificacin de una
regin cromosmica, que a menudo ocupa
medio cromosoma, en la que se detecta un
efecto significativo para el carcter diana. La
investigacin moderna utiliza activamente el
cartografiado para identificar la influencia de QTL
en los caracteres adaptativos. En gallinas, ejemplos
de dichos caracteres incluyen la resistencia a la
colonizacin y excrecin de Salmonella (Tilquin
etal., 2005), y la susceptibilidad a presentar el
sndrome de hipertensin pulmonar (Rabie etal.,
2005); y en ganado bovino, la tripanotolerancia
(Hanotte etal., 2002).
La fase de cartografiado QTL va seguida
generalmente por un refinamiento de la posicin
del QTL en el mapa (cartografiado QTL preciso).
Para llevar a cabo esta tarea, se analizan otros
marcadores, y especialmente, todos los casos
de recombinacin adicional en el rea diana.
Recientemente se ha diseado y aplicado un
astuto enfoque al cartografiado preciso de una
regin cromosmica en BTA14, que presenta
un QTL significativo para el porcentaje de grasa
en leche y otros caracteres (Farnir etal., 2002).
Este enfoque explota la recombinacin histrica
en generaciones anteriores para restringir la
posicin en el mapa a una regin relativamente
pequea, de 3,8 cM (centimorgan), tamao
que ha permitido el clonaje posicional del gen
(DGAT1) (Grisart etal., 2002).
Concluido el cartografiado preciso, los genes
que determinan el carcter de inters se pueden
buscar entre los genes situados en las regiones
identificadas. Los genes candidatos se pueden
buscar en la misma especie (p. ej., cuando existe un
mapa rico en etiquetas de secuencia expresada, o
cuando el genoma est totalmente secuenciado),
o en regiones ortlogas de un organismo modelo
para el cual se dispone de informacin genmica
completa.
Ocasionalmente,
la
informacin
clave
relativa a una funcin gnica proviene de una
fuente inesperada. Esto ocurri con el gen
de la miostatina, cuya funcin se descubri
Recuadro 76
Cartografiado de QTL
Si existe un QTL para un carcter diana, el alelo
variante ms- y menos- del gen responsable
desconocido (Q y q) se co-segregar con los alelos en
un marcador M1 cercano (M1 y m1) que podremos
genotipar en el laboratorio. Supongamos que M1 se
co-segrega con Q, y m1 con q, es decir, que M1 y Q
estn cerca en el mismo cromosoma, y que m1 y q
estn en el cromosoma homlogo (M1Q y m1q).
Supongamos tambin que genotipamos una
poblacin F2 obtenida por apareamiento de individuos
heterocigotos F1. Tras el genotipaje, las progenies F2
se agrupan sobre la base de su genotipo marcador
(M1M1 y m1m1; M2M2 y m2m2; ... MnMn y mnmn),
y luego comparamos el fenotipo medio de los grupos.
Si no existe ningn QTL ligado a un marcador dado
(p. ej., M2), entonces no detectaremos una diferencia
significativa entre el valor fenotpico medio de las
progenies M2M2 y m2m2 para el carcter diana. Por
el contrario, cuando las progenies se agrupan por
genotipo en el marcador M1, entonces el grupo M1M1
ser en su mayor parte QQ en el QTL, en tanto que el
grupo m1m1 ser principalmente qq. En este caso, se
observa una diferencia significativa entre las medias
de la progenie, y por lo tanto, detectamos la presencia
de un QTL. En especies como aves y cerdos en las
que se suelen entrecruzar comercialmente lneas y
razas, el estudio puede emprenderse en poblaciones
experimentales (F2, BC), en tanto que en rumiantes
se suelen utilizar dos pedigres de generacin
(diseo hijas DD) o tres (diseo nietas GDD). En
DD la segregacin de marcadores heterocigticos
en un semental (generacin I) se sigue en las hijas
(generacin II) cuyos datos fenotpicos se estn
recogiendo. En GDD, la segregacin de marcadores
heterocigticos en un semental abuelo (generacin
I) se sigue en sus hijos medio-hermanos (generacin
II), cuyo fenotipo se infiere a partir del de las nietas
(generacin III).
403
Parte 4
404
Perfiles de transcriptos
En esta seccin se describen brevemente las
tcnicas SAGE y de microarrays. Se pueden hallar
descripciones de otras tcnicas en revisiones
recientes (p. ej. Donson etal., 2002). SAGE genera
perfiles completos de expresin de tejidos o
lneas celulares. Comprende la construccin de
bibliotecas de mARN total que permiten un
anlisis cuantitativo de todos los transcriptos
expresados o inactivados en determinados
pasos de una activacin celular. Se basa en tres
principios: i) una etiqueta de secuencia corta
(914 pares de bases) obtenida de una regin
definida dentro de cada transcripto de mARN que
contiene suficiente informacin para identificar
de manera inequvoca un transcripto especfico;
ii) las etiquetas de secuencia se pueden unir
entre s para formar largas molculas de ADN
(concatmeros), que se pueden clonar y secuenciar
el secuenciado de los clones de concatmeros
conduce a una rpida identificacin de numerosas
etiquetas individuales; iii) el nivel de expresin
se cuantifica en base al nmero de veces que se
observa una etiqueta determinada.
Los microarrays pueden utilizarse para
comparar, en un nico experimento, los niveles de
expresin de mARN de varios millares de genes
entre dos sistemas biolgicos, por ejemplo, entre
animales en un ambiente normal y animales en un
ambiente desfavorable. Las tcnicas de microarray
pueden contribuir a una mejor comprensin de
las pautas temporales y espaciales de expresin
gnica en respuesta a una amplia gama de
factores a los que el organismo est expuesto.
Se depositan volmenes muy pequeos de
una solucin de ADN sobre un portaobjetos de
un material no poroso como el vidrio, creando
manchitas de unas 100 a 150 m de dimetro.
Actualmente se pueden depositar mediante
un robot unos 50 000 ADN complementarios
(cADN) en un portaobjetos de microscopio. Los
Perfiles proteicos
El estudio sistemtico de las estructuras proteicas,
las modificaciones post-traslacionales, los perfiles
proteicos, las interacciones entre protena
protena, protenacido nucleico, y protena
molcula pequea, as como la expresin
espacial y temporal de las protenas en las
clulas eucariotas, son cruciales para comprender
fenmenos biolgicos complejos. Las protenas
son esenciales para la estructura de las clulas
vivas y sus funciones.
La estructura de una protena se puede
revelar mediante difraccin de rayos X o por
espectroscopa de resonancia magntica nuclear.
La primera requiere una gran cantidad de
protena cristalina, y esto suele ser restrictivo.
Para comprender la funcin proteica y las
interacciones protenaprotena a nivel molecular,
sera til determinar la estructura de todas las
protenas en una clula u organismo. Hasta la
fecha, sin embargo, esto no se ha conseguido. Es
interesante observar que el nmero de variantes
proteicas diferentes surgidas de la sntesis
proteica (empalme alternativo y/o modificaciones
post-traslacionales) es significativamente mayor
que el nmero de genes en un genoma.
La espectrometra de masas (una tcnica
analtica para determinar la masa molecular)
en combinacin con tcnicas de separacin
cromatogrficas
o
electroforticas,
es
actualmente el mtodo de eleccin para
identificar protenas endgenas en las clulas,
para caracterizar las modificaciones posttraslacionales y determinar la abundancia
proteica (Zhu etal., 2003). La electroforesis
bidimensional en gel es nica con respecto al
gran nmero de protenas (>10000) que pueden
separarse y visualizarse en un solo experimento.
Las manchas de las protenas se recortan del
gel, se someten a digestin proteoltica, y se
identifican las protenas usando la espectrometra
de masas (Aebersold y Mann, 2003). Sin embargo,
405
Parte 4
406
4 El papel de la bioinformtica
El desarrollo de tecnologas ultrarrpidas sera
intil sin la capacidad de analizar el volumen de
datos biolgicos, que crece exponencialmente.
Los datos se almacenan en bases de datos
electrnicas (Recuadro 78) asociadas a aplicaciones
informticas especficas diseadas para permitir
la actualizacin de los datos, su interrogacin y
recuperacin. La informacin debe ser fcilmente
accesible, flexible a la interrogacin, para permitir
la recuperacin de informacin que se utilizar
para desentraar las vas metablicas y el papel
de los genes y protenas implicadas.
La bioinformtica es crucial para combinar
informacin de diversas fuentes y generar nuevo
conocimiento a partir de los datos existentes.
Tiene, adems, el potencial de simular la
estructura, funcin y dinmica de los sistemas
moleculares, y es por tanto til en la formulacin
de hiptesis que orienten el trabajo experimental.
5 Conclusiones
La caracterizacin molecular puede desempear
un papel en dilucidar la historia, y estimar la
diversidad, caracteres distintivos y estructura
poblacional de los recursos zoogenticos. Puede
tambin servir de ayuda en el manejo gentico
de pequeas poblaciones, para evitar una
endogamia excesiva. Se han descrito diversas
investigaciones sobre diversidad entre y dentro de
poblaciones algunas a escala bastante grande.
Sin embargo, estos estudios estn fragmentados
y son difciles de comparar e integrar. Adems,
an est por hacer una encuesta mundial
completa de las especies relevantes. Por tanto, es
de importancia estratgica desarrollar mtodos
para combinar los conjuntos de datos existentes,
que se solapan parcialmente, y garantizar el
Recuadro 77
El enfoque de la genmica poblacional
Recientemente se ha propuesto un enfoque alternativo
a la identificacin de regiones genmicas portadoras de
genes de inters. Consiste en la deteccin de rbricas
de seleccin mediante un enfoque de genmica
poblacional (Black et al., 2001; Luikart et al., 2003).
Los tres principios bsicos de la genmica poblacional
aplicada al cartografiado QTL son:
1. que los loci neutros de todo el genoma se vern
similarmente afectados por la deriva gentica,
la demografa, y la historia evolutiva de las
poblaciones;
2. que los loci bajo seleccin se comportan a
menudo de manera distinta, y, por tanto, revelan
pautas de variacin con valores atpicos, prdida
de diversidad (habra aumento de la misma si los
loci se hallaran bajo una seleccin equilibrada),
desequilibrio de ligamiento, y aumentos/
disminuciones de los ndices Gst/Fst; y
3. que merced a los efectos de ligamientos
oportunistas, la seleccin afecta tambin a los
marcadores ligados, permitiendo la deteccin
de una rbrica de seleccin (efectos de
valores atpicos), que a menudo puede
detectarse genotipando un gran nmero de
marcadores en un cromosoma e identificando
bloques de valores atpicos. Este enfoque
utiliza datos fenotpicos a nivel de raza (o de
subpoblaciones dentro de una raza) ms que
a nivel individual, y por lo tanto complementa
bien el cartografiado QTL clsico dentro de los
pedigres.
El enfoque de la genmica poblacional permite
asimismo identificar genes sometidos a una fuerte
407
Parte 4
408
Recuadro 78
Bases de datos de molculas biolgicas
Existen diversas bases de datos que recogen
informacin sobre molculas biolgicas:
Bases de datos de secuencias de ADN:
European Molecular Biology Lab (EMBL): http://
www.ebi.ac.uk/embl/index.html
GenBank: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
DNA Data Bank of Japan (DDBJ): http://www.
ddbj.nig.ac.jp
Bases de datos de protenas:
SWISS-PROT: http://www.expasy.ch/sprot/sprottop.html
Protein Information Resource (PIR): http://pir.
georgetown.edu/pirwww/
Protein Data Bank (PDB): http://www.rcsb.org/pdb/
Sitios de identificacin gnica o Bio-Portal
GenomeWeb: http://www.hgmp.mrc.ac.uk/
GenomeWeb/nuc-geneid.html
BCM Search Launcher: http://searchlauncher.
bcm.tmc.edu/
MOLBIOL: http://www.molbiol.net/
Pedros BioMolecular Research tools: http://
www.biophys.uni-duesseldorf.de/BioNet/Pedro/
research_tools.html
ExPASy Molecular Biology Server: http://www.
expasy.ch/
Bases de datos de inters particular sobre
animales domsticos:
http://locus.jouy.inra.fr/cgi-bin/bovmap/intro.pl
http://www.cgd.csiro.au/cgd.html
http://www.ri.bbsrc.ac.uk/cgi-bin/arkdb/browsers/
http://www.marc.usda.gov/genome/genome.html
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genome/guide/pig/
http://www.ensembl.org/index.html
http://www.tigr.org/
http://omia.angis.org.au/
http://www.livestockgenomics.csiro.au/ibiss/
http://www.thearkdb.org/
http://www.hgsc.bcm.tmc.edu/projects/bovine/
409
Parte 4
Recuadro 79
Glosario: marcadores moleculares
Para el material de esta seccin se utilizan las
siguientes definiciones:
ADN: la informacin gentica de un genoma est
codificada en el cido desoxirribonucleico (ADN),
que se conserva en el ncleo celular. El ADN tiene
dos cadenas estructuradas en una doble hlice,
formada por un glcido (desoxirribosa), fosfato y
cuatro bases qumicas los nucletidos: adenina
(A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). Una A en
una cadena se empareja siempre con una T en la otra
mediante dos enlaces de hidrgeno, en tanto que
una C siempre se empareja con una G mediante tres
enlaces de hidrgeno. Las dos cadenas son, pues,
complementarias entre s.
ADN complementario (cADN): secuencias de
ADN generadas por la transcripcin inversa de las
secuencias de mARN. Este tipo de ADN incluye exones
y regiones no traducidas en los extremos 5 y 3 de los
genes, pero no incluye el ADN del intrn.
ARN: el cido ribonucleico es un cido nucleico
de una cadena formado por tres de las cuatro bases
presentes en el ADN (A, C y G). T, sin embargo, es
sustituida por uracilo (U).
Cebador: una secuencia corta (de una cadena) de
oligonucletidos utilizados en la reaccin en cadena
de la polimerasa (PCR).
Desequilibrio de ligamiento (LD): es un trmino
utilizado en el estudio de gentica poblacional para
la asociacin no aleatoria de alelos en dos o ms
loci, no necesariamente en el mismo cromosoma.
No es lo mismo que el ligamiento, que describe la
asociacin de dos o ms loci en un cromosoma con
un grado limitado de recombinacin. LD describe una
situacin en la que algunas combinaciones de alelos
o marcadores genticos se dan en una poblacin ms
o menos frecuentemente de lo que sera de esperar
de una formacin aleatoria de haplotipos de alelos
sobre la base de sus frecuencias. El desequilibrio de
ligamiento es causado interacciones adaptativas
entre genes o por procesos no adaptativos como son
la estructura de la poblacin, endogamia, y efectos
410
Recuadro 79 cont.
Glosario: marcadores moleculares
de herencia de un gen que an no se ha identificado,
pero cuya localizacin aproximada s es conocida.
Tecnologa de microarray: una nueva forma
de estudiar cuntos genes interaccionan entre s y
cmo las redes reguladoras de la clula controlan
simultneamente vastas bateras de genes. El mtodo
utiliza un robot que aplica con precisin pequeas
gotitas de ADN funcional sobre portaobjetos de
Referencias
Aebersold, R. y Mann, M. 2003. Mass spectrometrybased proteomics. Nature, 422 (6928): 198207.
Review.
Ajmone-Marsan, P., Negrini, R., Milanesi, E., Bozzi,
R., Nijman, I.J., Buntjer, J.B., Valentini, A. y
Lenstra, J.A. 2002. Genetic distances within and
across cattle breeds as indicated by biallelic AFLP
markers. Animal Genetics, 33: 280286.
Akey, J.M., Zhang, G., Zhang, K., Jin, L. y Shriver,
M.D. 2002. Interrogating a high-density SNP
map for signatures of natural selection. Genome
Research, 12(12): 180514.
Aravin, A. y Tuschl, T. 2005. Identification and
characterization of small RNAs involved in RNA
silencing. Febs Letters, 579(26): 583040.
Bachem, C.W.B., Van der Hoeven, R.S., De Bruijn,
S.M., Vreugdenhil, D., Zabeau, M. y Visser, R.G.F.
1996. Visualization of differential gene expression
using a novel method of RNA fingerprinting based
on AFLP: analyses of gene expression during potato
tuber development. The Plant Journal, 9: 745753.
Bamshad, M. y Wooding, S.P. 2003. Signatures of
natural selection in the human genome. Nature
Reviews Genetics, 4(2): 99111. Review.
411
Parte 4
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