INCLUSIÓN

INCLUSIÓN D E T E J I D O S
E s el conjunto de procedimientos que tienen como objetivo brindar u n a
mayor consistencia (dureza y homogeneidad) al tejido a fin de que
pueda ser seccionado.
Las muestras son procesadas de diversas maneras, en funció n de:
A) La naturaleza de la muestra.
B) El tipo de estudio a a realizar.
HISTOENZIMOLOGIA
INMUNOHISTOQUIMICA
IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA
MICROSCOPIA E L EC T RÓ N I C A
HISTOQUÍMICA para LÍPIDOS
HISTOQUÍMICA para AMILOIDES
……………………………………………
………
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
El proceso consta de 4 etapas:

Deshidratación Aclaramiento Infiltración Encastramiento

Alcohol Xilo Parafina

l
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Las 4 etapas se encuentran divididas en 14 pasos:

Deshidratación Aclaramiento Infiltración Encastramiento

Alcohol Alcohol
Alcohol
Alcohol 90’%: 96’%:
100%
Alcohol 80’%: 1 hora 1 hora Alcohol
I:
70’%: 1 hora 100%
1 hora
1 hora II
1 hora
H2O: Alcohol
100% III
1 hora
1 hora

Parafina Xilo
l
III Parafina Xilo I
1 hora II Parafina Xilo l II 1 hora

1 hora I l III 1
1 hora 1 hora
hora
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Enjuagar con Agua Corriente: 1 hora
No forma parte del proceso de Inclusió n, pero es u n procedimiento
importante ya que elimina el fijador del tejido, pues s u presencia podría
interferir en la posterior observació n microscó pica. Por ejemplo:
Pigmento Formó lico (precipitado parduzco por acidificació n del Formol)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

HCH HCH HCH HCH
O O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O
NUCLEO

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH HCH

O O O O

CITOPLASM A AGUA
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Enjuagar con Agua Corriente: 1 hora
No forma parte del proceso de Inclusió n, pero es u n procedimiento
importante ya que elimina el fijador del tejido, pues s u presencia podría
interferir en la posterior observació n microscó pica. Por ejemplo:
Pigmento Formó lico (precipitado parduzco por acidificació n del Formol)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

HCH HCH HCH HCH
O O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O
NUCLEO

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH HCH

O O O O

CITOPLASM A AGUA
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 1.- Alcohol 70%: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 70% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH

OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH

OH OH OH OH

OH OH OH OH

CITOPLASM A ALCAOGHUOAL
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 2.- Alcohol 80%: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 80% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASM A A LCO H O L
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 3.- Alcohol 90%: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 90% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASM A A LCO H O L
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 4.- Alcohol 96%: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 96% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASM A A LCO H O L 96%

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 5.- Alcohol 100% I: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 100% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASM A AALCLCOOHHOOL
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 6.- Alcohol 100% II: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 100% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASM A A LCO H O L 100% III

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Deshidratación: 7.- Alcohol 100% III: 1 hora
Las molé culas de alcohol al ser miscibles con las molé culas de agua y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de agua y ocupan el 100% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASM A A LCO H O L 100% III

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Aclaramiento: 8.- Xilol I: 1 hora
Las molé culas de xilol al ser miscibles con las molé culas de alcohol y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de alcohol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH
XOil XOil XOil XOil

OH OH OH Hol Hol Hol Hol

XOil XOil XOil

OH OH OH Hol Hol Hol

XOil XOil XOil XOil
NUCLEO

OH OH Hol Hol Hol Hol

XOil XOil XOil

OH OH OH Hol Hol Hol

XOil XOil XOil XOil

OH OH Hol Hol Hol Hol

XOil XOil XOil

OH OH OH Hol Hol Hol

XOil XOil XOil XOil

OH OH OH Hol Hol Hol Hol

XOil XOil XOil

OH OH OH OH Hol Hol Hol

XOil XOilHol XOilHol XOil

CITOPLASM A Hol
ALCOHXOILLO1L0I0% III Hol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Aclaramiento: 9.- Xilol II: 1 hora
Las molé culas de xilol al ser miscibles con las molé culas de alcohol y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de alcohol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol
XOil XOil XOil XOil

OH OH OH Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol X ilol X ilol

XOil XOil XOil XOil
NUCLEO

OH OH Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol X ilol X ilol

XOil XOil XOil XOil

OH OH Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol X ilol X ilol

XOil XOil XOil XOil

OH OH OH Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol Xilol Xilol X ilol

XOil XOil XOilHol XOil

CITOPLASM A Hol Hol

XILOL Hol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Aclaramiento: 10.- Xilol III: 1 hora
Las molé culas de xilol al ser miscibles con las molé culas de alcohol y al
encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la cé lula,
desplazan a las molé culas de alcohol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol
XOil XOil XOil XOil

X ilol X ilol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol X ilol X ilol

XOil XOil XOil XOil
NUCLEO

X ilol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol X ilol X ilol

XOil XOil XOil XOil

OH OH Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol X ilol X ilol

XOil XOil XOil XOil

OH OH OH Hol X ilol Hol X ilol Hol X ilol Hol

X ilol Xilol Xilol X ilol

XOil XOil XOilHol XOil

CITOPLASM A Hol Hol

XILOL Hol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Infiltrado: 11.- Parafina I: 1 hora
Las molé culas de parafina al ser miscibles con las molé culas de xilol y
al encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la
cé lula, desplazan a las molé culas de xilol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina
NUCLEO

X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol X ilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

X ilol Xilol Xilol X ilol X ilol

Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina

CITOPLASM A PAXRILAOFL
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Infiltrado: 12.- Parafina II: 1 hora
Las molé culas de parafina al ser miscibles con las molé culas de xilol y
al encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la
cé lula, desplazan a las molé culas de xilol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Parafina Parafina Parafina Parafina
Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASM A PARAFINA
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Infiltrado: 13.- Parafina III: 1 hora
Las molé culas de parafina al ser miscibles con las molé culas de xilol y
al encontrarse en mayor concentració n, ingresan al interior de la
cé lula, desplazan a las molé culas de xilol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Parafina Parafina Parafina Parafina
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASM A PARAFINA
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
*Encastramiento: 14
Consiste en la confecció n de u n bloque en cuyo interior se encuentre el
tejido procesado.
Este bloque debe ser del mismo material del Infiltrado y s u morfología y
dimensiones deben ser hechas para que encaje en u n dispositivo de u n
equipo llamado Micró tomo.

Tejido
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: E s el proceso tiene por finalidad la completa
eliminació n del agua del tejido y puede ser realizada por 2 mecanismos:
Físicos: Proceso en el que los líquidos cambian s u estado a gaseosos.
Químicos: Proceso en el que u n reactivo absorbe el agua de los tejidos.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

H2O H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

NUCLEO

H2O H2O H2O

H2O
H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O H2O

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: E s el proceso tiene por finalidad la completa
eliminació n del agua del tejido y puede ser realizada por 2 mecanismos:
Físicos: Proceso en el que los líquidos cambian s u estado a gaseosos.
Químicos: Proceso en el que u n reactivo absorbe el agua de los tejidos.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

NUCLEO

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol Xilol X ilol

Xilol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.
c) Debe concluir rá pidamente para evitar el endurecimiento del tejido

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.
c) Debe concluir rá pidamente para evitar el endurecimiento del tejido.
d) Debe presentar baja toxicidad por ingesta, inhalació n o contacto.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.
c) Debe concluir rá pidamente para evitar el endurecimiento del tejido.
d) Debe presentar baja toxicidad por ingesta, inhalació n o contacto.
e) Debe presentar u n mínimo riesgo de explosió n y/o incendio.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Existen diferentes clases de Agentes Deshidratantes, cada uno con
ventajas y desventajas, que deben ser seleccionados dependiendo del
tipo de tejido y del tipo de estudio a realizar.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

• Acetona
• Dioxano
• Alcohol
NUCLEO

Etílico
•Alcohol
Metílico
• Alcohol
Butílico
CITOPLASM A • Tetrahi
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: Acció n deshidratante rá pida.
ACETONA
Desventajas: Muy volá til y aumenta la fragilidad del tejido.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Acetona

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: Miscible con Parafina.
D I OX A N O
Desventajas: Muy tó xico.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Dioxano

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: E s el mejor Agente Deshidratante
A LC O H O L ETÍ LICO
Desventajas: Muy inflamable y de elevado costo.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Alcohol Etílico

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: Deshidratació n completa.
A LC O H O L METÍ LICO
Desventajas: Muy inflamable y tó xico.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Alcohol Metílico

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: Miscible con la Parafina.
A LC O H O L BUTÍ LICO
Desventajas: De acció n lenta.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Alcohol Butílico

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: De acció n rá pida.
TETRAHIDROFURANO
Desventajas: De elevado costo.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Tetrahidrofurano

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Deshidratación:
Ventajas: Deshidratació n completa.
A LC O H O L ISOPROPÍ LICO
Desventajas: No es miscible con todas las Sustancias Infiltrante.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Alcohol Isopropílico

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento: E s el proceso posterior a la Deshidratació n por el cual
se sustituye el “Agente Deshidratante” por u n “Reactivo Aclarante”:
Sustancia miscible con el Medio Infiltrante.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

NUCLEO

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol Xilol X ilol

Xilol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rá pidamente el Agente Deshidratante

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

NUCLEO

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol Xilol X ilol

Xilol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rá pidamente el Agente Deshidratante
b) No debe ocasionar retracció n ni endurecimiento en el tejido

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

NUCLEO

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol Xilol X ilol

Xilol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rá pidamente el Agente Deshidratante
b) No debe ocasionar retracció n ni endurecimiento en el tejido
c) Debe ser miscible con el Agente Deshidratante y el Medio Infiltrante

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Parafina Parafina Parafina Parafina
X ilol X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

X ilol X ilol
Parafina X ilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol
Parafina X ilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

X ilol X ilol
Parafina X ilol X ilol Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rá pidamente el Agente Deshidratante
b) No debe ocasionar retracció n ni endurecimiento en el tejido
c) Debe ser miscible con el Agente Deshidratante y el Medio Infiltrante
d) Debe presentar baja toxicidad por ingesta, inhalació n y/o contacto

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

NUCLEO

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol X ilol X ilol

X ilol Xilol X ilol

Xilol
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Existen diferentes clases de Reactivos Aclarantes, cada uno con
ventajas y desventajas, que deben ser seleccionados dependiendo del
tipo de tejido y del tipo de estudio a realizar.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

• Xilol
• Dioxano
NUCLEO

• Tolueno
• Benceno
• Cloroformo
•Tetracloruro de
Carbono
CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Ventajas: Muy rá pido y endurece poco los tejidos.
XILOL
Desventajas: Muy tó xico y solo aclara desde Alcohol Absoluto.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• X ilol

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Ventajas: Miscible con Parafina ( es deshidratante y aclarante ).
D I OX A N O
Desventajas: Muy tó xico.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Dioxano

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Ventajas: Rá pido y endurece poco los tejidos.
TO LU E N O
Desventajas: Tó xico y solo aclara desde Alcohol Absoluto.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Tolueno

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Ventajas: Rá pido y de retracció n mínima.
BENCENO
Desventajas: Muy tó xico y altamente inflamable.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Benceno

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Ventajas: No endurece ni retrae el tejido.
C L O RO F O R M O
Desventajas: Hace flotar al tejido y es de difícil eliminació n.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Cloroformo

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Aclaramiento:
Ventajas: No endurece el tejido, econó mico, no inflamable.
TETRACLORURO D E C A R B O N O
Desventajas: Muy toxico y es de difícil eliminació n.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Tetracloruro de Carbono

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración: E s el proceso posterior al Aclaramiento por el cual se
sustituye el “Reactivo Aclarante” por u n “Medio Infiltrante”:
Sustancia que brindará dureza y homogeneidad al tejido, en los
espacios intracelulares y extracelulares.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

X ilol
Parafina X ilol
Parafina X ilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

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NUCLEO

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CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración: El Medio Infiltrante Ideal:
a) Debe proporcionar mayor dureza al tejido (para secciones uniformes)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

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NUCLEO

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CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración: El Medio Infiltrante Ideal:
a) Debe proporcionar mayor dureza al tejido (para secciones uniformes)
b) Debe proporcionar mayor viscosidad (para secciones continuas)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

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NUCLEO

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CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración: El Medio Infiltrante Ideal:
a) Debe proporcionar mayor dureza al tejido (para secciones uniformes)
b) Debe proporcionar mayor viscosidad (para secciones continuas)
c) Debe presentar menor fragilidad (para evitar microcristales)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

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NUCLEO

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CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración:
Existen diferentes clases de Medios Infiltrantes, cada uno con
ventajas y desventajas, que deben ser seleccionados dependiendo del
tipo de
tejido y del tipo de estudio a realizar.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

• Resina
• Plástico
NUCLEO

• Parafina
• Gelatina
• C eloidina

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración:
Ventajas: Para tejidos de gran dureza: hueso y dientes.
RESINA (metil metacrilato)
Desventajas: Polimerizació n exoté rmica que dañ a los tejidos.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• R esina

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración:
Ventajas: Son ideales para Microscopia Electró nica.
PLÁ STICO (epoxi resinas)
Desventajas: Requiere complementos (acelerador, endurecedor, etc)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Plástico

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración:
Ventajas: Son ideales para Microscopia Ó ptica.
PARAFINA
Desventajas: Se oxidan con el tiempo, amarillando y ablandá ndose

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Parafina

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración:
Ventajas: Soluble en H 2 O (no requiere deshidratació n ni aclaramiento)
GELATINA
Desventajas: Fijadores desnaturalizan las proteínas que la componen

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• Gelatina

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Infiltración:
Ventajas: Soluble en alcohol é ter 50%, no requiere altas temperaturas
CELOIDINA
Desventajas: Demasiado lenta (semanas) y secciones >=15 micras

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

• C eloidina

CITOPLASM A
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Consiste en la confecció n de u n bloque en cuyo interior se encuentre el
tejido procesado.
Este bloque debe ser del mismo material del Infiltrado y s u morfología y
dimensiones deben ser hechas para que encaje en u n dispositivo de u n
equipo llamado Micró tomo.

Tejido
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Este bloque debe ser de dureza homogé nea y de plasticidad-elasticidad
adecuada, que permita realizar secciones de calidad sin ocasionar
distorsió n del tejido.
Para ello el enfriamiento del Medio de Infiltració n debe ser lento: a 10-
15ºC, ya que cambios bruscos de temperatura originarían contracció n
excesiva del tejido y fractura del bloque.

Tejido
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Para la obtenció n de los bloques se emplean 3 estaciones llamadas:
a) Plancha Caliente: Permite la ubicació n y orientació n del tejido en el bloque
b) Dispensador: Proporciona el Medio de Infiltració n en estado líquido
c) Plancha Fría: Solidifica el Medio de Infiltració n
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Para la forma y dimensió n de los bloques se emplean Moldes, de
diferentes tamañ os, hechos de u n a aleació n de aluminio que permiten
la rá pida transmisió n de temperatura de manera homogé nea, lo que
finalmente solidifica el bloque.
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
1.- Se llena el Molde de Aluminio con Parafina líquida proveniente del
dispensador sobre la Plancha Caliente.
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
2.- Se ubica y orienta el tejido procesado en la posició n mas profunda
del Molde para luego trasladarlo a la Plancha Fría para s u
solidificació n.
 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
3.- La orientació n de la muestra depende de la forma del fragmento y
del tipo de tejido.
E n general los tejidos deberá n estar centrados en el fondo del bloque.

Vista inferior del Bloque

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Los tejidos con formas geomé tricas deberá n presentar la base mas
angosta en direcció n inferior.

Vista lateral del Bloque

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Los tejidos con formas geomé tricas deberá n presentar la base mas
angosta en direcció n inferior.

Vista lateral del Bloque

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Las estructuras tubulares (p.e.: vasos sanguíneos) deben ser verticales
al eje del bloque.

Vista inferior del Bloque

 INCLUSIÓN D E T E J I D O S
Encastramiento:
Los tejidos con densidades diferentes (p.e.: piel) se deben orientar de tal
manera que el á rea ma s blanda (hipodermis) se seccione primero y la
mas dura (epidermis) al final.

Vista inferior del Bloque

angello2001@ hotmail.com
991083044