INCLUSIÓN

INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Es el conjunto de procedimientos que tienen como objetivo brindar una
mayor consistencia (dureza y homogeneidad) al tejido a fin de que
pueda ser seccionado.
Las muestras son procesadas de diversas maneras, en función de:
A) La naturaleza de la muestra.
B) El tipo de estudio a a realizar.
HISTOENZIMOLOGIA
INMUNOHISTOQUIMICA
IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA
MICROSCOPIA ELECTRÓNICA
HISTOQUÍMICA para LÍPIDOS
HISTOQUÍMICA para AMILOIDES
……………………………………………………
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
El proceso consta de 4 etapas:

Deshidratación Aclaramiento Infiltración Encastramiento

Alcohol Xilol Parafina

 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Las 4 etapas se encuentran divididas en 14 pasos:

Deshidratación Aclaramiento Infiltración Encastramiento

Alcohol Alcohol
Alcohol
Alcohol 90’%: 96’%:
100% I:
Alcohol 80’%: 1 hora 1 hora Alcohol
1 hora
70’%: 1 hora 100% II
1 hora 1 hora

H2O: Alcohol

1 hora 100% III

1 hora

Parafina Xilol
III Parafina Xilol I
1 hora II Parafina Xilol II 1 hora

1 hora I III 1 hora

1 hora 1 hora
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Enjuagar con Agua Corriente: 1 hora
No forma parte del proceso de Inclusión, pero es un procedimiento
importante ya que elimina el fijador del tejido, pues su presencia podría
interferir en la posterior observación microscópica. Por ejemplo:
Pigmento Formólico (precipitado parduzco por acidificación del Formol)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

HCH HCH HCH HCH
O O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O
NUCLEO

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH HCH

O O O O

CITOPLASMA AGUA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Enjuagar con Agua Corriente: 1 hora
No forma parte del proceso de Inclusión, pero es un procedimiento
importante ya que elimina el fijador del tejido, pues su presencia podría
interferir en la posterior observación microscópica. Por ejemplo:
Pigmento Formólico (precipitado parduzco por acidificación del Formol)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

HCH HCH HCH HCH
O O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O
NUCLEO

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH
O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH

O O O

HCH HCH HCH HCH

O O O O

CITOPLASMA AGUA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 1.- Alcohol 70%: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 70% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH

OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH

OH OH OH OH

OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL
AGUA 70%
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 2.- Alcohol 80%: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 80% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL 80%

70%
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 3.- Alcohol 90%: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 90% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL 80%

90%
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 4.- Alcohol 96%: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 96% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL 96%

90%
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 5.- Alcohol 100% I: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 100% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL
ALCOHOL100%
96% I
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 6.- Alcohol 100% II: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 100% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL 100% III

 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Deshidratación: 7.- Alcohol 100% III: 1 hora
Las moléculas de alcohol al ser miscibles con las moléculas de agua y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de agua y ocupan el 100% del volumen
celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH
NUCLEO

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH

OH OH OH OH OH OH OH OH

CITOPLASMA ALCOHOL 100% III

II
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Aclaramiento: 8.- Xilol I: 1 hora
Las moléculas de xilol al ser miscibles con las moléculas de alcohol y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de alcohol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol
NUCLEO

OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH OH OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

CITOPLASMA ALCOHOL
XILOL
100%
I III
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Aclaramiento: 9.- Xilol II: 1 hora
Las moléculas de xilol al ser miscibles con las moléculas de alcohol y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de alcohol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol
NUCLEO

OH OH Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

CITOPLASMA XILOL
XILOL II
I
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Aclaramiento: 10.- Xilol III: 1 hora
Las moléculas de xilol al ser miscibles con las moléculas de alcohol y al
encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de alcohol y ocupan gradualmente la
totalidad del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol
NUCLEO

Xilol Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

OH OH OH Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol OH

Xilol OH
Xilol OH
Xilol OH
Xilol

CITOPLASMA XILOL
XILOL III
II
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Infiltrado: 11.- Parafina I: 1 hora
Las moléculas de parafina al ser miscibles con las moléculas de xilol y
al encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de xilol y ocupan gradualmente la totalidad
del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina
NUCLEO

Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol Xilol

Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina

CITOPLASMA PARAFINA
XILOL III I
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Infiltrado: 12.- Parafina II: 1 hora
Las moléculas de parafina al ser miscibles con las moléculas de xilol y
al encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de xilol y ocupan gradualmente la totalidad
del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Parafina Parafina Parafina Parafina
Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASMA PARAFINA
PARAFINA II
I
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Infiltrado: 13.- Parafina III: 1 hora
Las moléculas de parafina al ser miscibles con las moléculas de xilol y
al encontrarse en mayor concentración, ingresan al interior de la célula,
desplazan a las moléculas de xilol y ocupan gradualmente la totalidad
del volumen celular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Parafina Parafina Parafina Parafina
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASMA PARAFINA
PARAFINA III
II
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
*Encastramiento: 14
Consiste en la confección de un bloque en cuyo interior se encuentre el
tejido procesado.
Este bloque debe ser del mismo material del Infiltrado y su morfología y
dimensiones deben ser hechas para que encaje en un dispositivo de un
equipo llamado Micrótomo.

Tejido
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: Es el proceso tiene por finalidad la completa
eliminación del agua del tejido y puede ser realizada por 2 mecanismos:
Físicos: Proceso en el que los líquidos cambian su estado a gaseosos.
Químicos: Proceso en el que un reactivo absorbe el agua de los tejidos.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

H2O H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

NUCLEO

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O
H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O

H2O H2O H2O H2O

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: Es el proceso tiene por finalidad la completa
eliminación del agua del tejido y puede ser realizada por 2 mecanismos:
Físicos: Proceso en el que los líquidos cambian su estado a gaseosos.
Químicos: Proceso en el que un reactivo absorbe el agua de los tejidos.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

NUCLEO

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.
c) Debe concluir rápidamente para evitar el endurecimiento del tejido

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.
c) Debe concluir rápidamente para evitar el endurecimiento del tejido.
d) Debe presentar baja toxicidad por ingesta, inhalación o contacto.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación: El Agente Deshidratante Ideal:
a) Debe ser gradual para no debe alterar la morfología celular ni tisular.
b) Debe emplear sustancias miscibles con los Reactivos Aclarantes.
c) Debe concluir rápidamente para evitar el endurecimiento del tejido.
d) Debe presentar baja toxicidad por ingesta, inhalación o contacto.
e) Debe presentar un mínimo riesgo de explosión y/o incendio.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Existen diferentes clases de Agentes Deshidratantes, cada uno con
ventajas y desventajas, que deben ser seleccionados dependiendo del
tipo de tejido y del tipo de estudio a realizar.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

•Acetona
•Dioxano
NUCLEO

•Alcohol
Etílico
•Alcohol
Metílico
•Alcohol
Butílico
CITOPLASMA •Tetrahidrofur
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: Acción deshidratante rápida.
ACETONA
Desventajas: Muy volátil y aumenta la fragilidad del tejido.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Acetona

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: Miscible con Parafina.
DIOXANO
Desventajas: Muy tóxico.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Dioxano

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: Es el mejor Agente Deshidratante
ALCOHOL ETÍLICO
Desventajas: Muy inflamable y de elevado costo.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Alcohol Etílico

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: Deshidratación completa.
ALCOHOL METÍLICO
Desventajas: Muy inflamable y tóxico.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Alcohol Metílico

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: Miscible con la Parafina.
ALCOHOL BUTÍLICO
Desventajas: De acción lenta.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Alcohol Butílico

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: De acción rápida.
TETRAHIDROFURANO
Desventajas: De elevado costo.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Tetrahidrofurano

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Deshidratación:
Ventajas: Deshidratación completa.
ALCOHOL ISOPROPÍLICO
Desventajas: No es miscible con todas las Sustancias Infiltrante.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Alcohol Isopropílico

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento: Es el proceso posterior a la Deshidratación por el cual
se sustituye el “Agente Deshidratante” por un “Reactivo Aclarante”:
Sustancia miscible con el Medio Infiltrante.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

NUCLEO

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rápidamente el Agente Deshidratante

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

NUCLEO

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rápidamente el Agente Deshidratante
b) No debe ocasionar retracción ni endurecimiento en el tejido

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

NUCLEO

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rápidamente el Agente Deshidratante
b) No debe ocasionar retracción ni endurecimiento en el tejido
c) Debe ser miscible con el Agente Deshidratante y el Medio Infiltrante

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Parafina Parafina Parafina Parafina
Xilol Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

Xilol Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol Xilol Xilol Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento: El Reactivo Aclarante Ideal:
a) Debe eliminar rápidamente el Agente Deshidratante
b) No debe ocasionar retracción ni endurecimiento en el tejido
c) Debe ser miscible con el Agente Deshidratante y el Medio Infiltrante
d) Debe presentar baja toxicidad por ingesta, inhalación y/o contacto

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

NUCLEO

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol

Xilol Xilol Xilol Xilol

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Existen diferentes clases de Reactivos Aclarantes, cada uno con
ventajas y desventajas, que deben ser seleccionados dependiendo del
tipo de tejido y del tipo de estudio a realizar.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

•Xilol
•Dioxano
NUCLEO

•Tolueno
•Benceno
•Cloroformo
•Tetracloruro de
Carbono
CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Ventajas: Muy rápido y endurece poco los tejidos.
XILOL
Desventajas: Muy tóxico y solo aclara desde Alcohol Absoluto.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Xilol

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Ventajas: Miscible con Parafina ( es deshidratante y aclarante ).
DIOXANO
Desventajas: Muy tóxico.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Dioxano

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Ventajas: Rápido y endurece poco los tejidos.
TOLUENO
Desventajas: Tóxico y solo aclara desde Alcohol Absoluto.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Tolueno

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Ventajas: Rápido y de retracción mínima.
BENCENO
Desventajas: Muy tóxico y altamente inflamable.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Benceno

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Ventajas: No endurece ni retrae el tejido.
CLOROFORMO
Desventajas: Hace flotar al tejido y es de difícil eliminación.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Cloroformo

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Aclaramiento:
Ventajas: No endurece el tejido, económico, no inflamable.
TETRACLORURO DE CARBONO
Desventajas: Muy toxico y es de difícil eliminación.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Tetracloruro de Carbono

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración: Es el proceso posterior al Aclaramiento por el cual se
sustituye el “Reactivo Aclarante” por un “Medio Infiltrante”: Sustancia
que brindará dureza y homogeneidad al tejido, en los espacios
intracelulares y extracelulares.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina
NUCLEO

Xilol Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Parafina Parafina Parafina Parafina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración: El Medio Infiltrante Ideal:
a) Debe proporcionar mayor dureza al tejido (para secciones uniformes)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
Parafina Xilol
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NUCLEO

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CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración: El Medio Infiltrante Ideal:
a) Debe proporcionar mayor dureza al tejido (para secciones uniformes)
b) Debe proporcionar mayor viscosidad (para secciones continuas)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

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CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración: El Medio Infiltrante Ideal:
a) Debe proporcionar mayor dureza al tejido (para secciones uniformes)
b) Debe proporcionar mayor viscosidad (para secciones continuas)
c) Debe presentar menor fragilidad (para evitar microcristales)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

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CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración:
Existen diferentes clases de Medios Infiltrantes, cada uno con ventajas
y desventajas, que deben ser seleccionados dependiendo del tipo de
tejido y del tipo de estudio a realizar.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

•Resina
NUCLEO

•Plástico
•Parafina
•Gelatina
•Celoidina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración:
Ventajas: Para tejidos de gran dureza: hueso y dientes.
RESINA (metil metacrilato)
Desventajas: Polimerización exotérmica que daña los tejidos.

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Resina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración:
Ventajas: Son ideales para Microscopia Electrónica.
PLÁSTICO (epoxi resinas)
Desventajas: Requiere complementos (acelerador, endurecedor, etc)

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Plástico

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración:
Ventajas: Son ideales para Microscopia Óptica.
PARAFINA
Desventajas: Se oxidan con el tiempo, amarillando y ablandándose

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Parafina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración:
Ventajas: Soluble en H2O (no requiere deshidratación ni aclaramiento)
GELATINA
Desventajas: Fijadores desnaturalizan las proteínas que la componen

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Gelatina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Infiltración:
Ventajas: Soluble en alcohol éter 50%, no requiere altas temperaturas
CELOIDINA
Desventajas: Demasiado lenta (semanas) y secciones >=15 micras

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

•Celoidina

CITOPLASMA
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Consiste en la confección de un bloque en cuyo interior se encuentre el
tejido procesado.
Este bloque debe ser del mismo material del Infiltrado y su morfología y
dimensiones deben ser hechas para que encaje en un dispositivo de un
equipo llamado Micrótomo.

Tejido
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Este bloque debe ser de dureza homogénea y de plasticidad-elasticidad
adecuada, que permita realizar secciones de calidad sin ocasionar
distorsión del tejido.
Para ello el enfriamiento del Medio de Infiltración debe ser lento: a 10-
15ºC, ya que cambios bruscos de temperatura originarían contracción
excesiva del tejido y fractura del bloque.

Tejido
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Para la obtención de los bloques se emplean 3 estaciones llamadas:
a) Plancha Caliente: Permite la ubicación y orientación del tejido en el bloque
b) Dispensador: Proporciona el Medio de Infiltración en estado líquido
c) Plancha Fría: Solidifica el Medio de Infiltración
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Para la forma y dimensión de los bloques se emplean Moldes, de
diferentes tamaños, hechos de una aleación de aluminio que permiten
la rápida transmisión de temperatura de manera homogénea, lo que
finalmente solidifica el bloque.
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
1.- Se llena el Molde de Aluminio con Parafina líquida proveniente del
dispensador sobre la Plancha Caliente.
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
2.- Se ubica y orienta el tejido procesado en la posición mas profunda
del Molde para luego trasladarlo a la Plancha Fría para su
solidificación.
 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
3.- La orientación de la muestra depende de la forma del fragmento y
del tipo de tejido.
En general los tejidos deberán estar centrados en el fondo del bloque.

Vista inferior del Bloque

 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Los tejidos con formas geométricas deberán presentar la base mas
angosta en dirección inferior.

Vista lateral del Bloque

 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Los tejidos con formas geométricas deberán presentar la base mas
angosta en dirección inferior.

Vista lateral del Bloque

 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Las estructuras tubulares (p.e.: vasos sanguíneos) deben ser verticales
al eje del bloque.

Vista inferior del Bloque

 INCLUSIÓN DE TEJIDOS
Encastramiento:
Los tejidos con densidades diferentes (p.e.: piel) se deben orientar de tal
manera que el área mas blanda (hipodermis) se seccione primero y la
mas dura (epidermis) al final.

Vista inferior del Bloque

angello2001@ hotmail.com
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