Métodos de Diagnostico de

Microorganismos
Alumnos:
Aban Medina Eduardo
Espinoza Abal Idaly
Flores Cayetano Luz
García Crisóstomo Josué
Paredes Torres Charles
Staphylococcus aureus.
Los estafilococos son cocos grampositivos que
forman racimos cuando crecen en un medio
de agar, pero que generalmente se observan
en las muestras clínicas en forma de células
únicas o en pequeños grupos de
microorganismos. . Las muestras obtenidas a
partir de la base del absceso con un hisopo o
un raspado presentan un gran número de
microorganismos en la tinción de Gram.
Las muestras clínicas se deben inocular en medios de
agar enriquecidas complementados con sangre de
carnero. Los estafilococos crecen rápidamente en los
CULTIVO medios no selectivos, tanto aerobia como
anaerobiamente, y se pueden apreciar colonias lisas de
gran tamaño en el plazo de 24 horas. Casi todas las
cepas de S. aureus y algunas cepas de estafilococos
coagulasa-negativos producen hemolisis en el agar
sangre de carnero.
Colonias de Staphylococcus
aureus en una placa de agar de
sangre de carnero. Obsérvese
que las colonias presentan un
tamaño grande y son b-
hemolíticas.
Se pueden utilizar pruebas
bioquímicas relativamente sencillas
(p. ej., reacciones positivas para la
coagulasa, proteína A, nucleasa
termoestable y fermentación de
manitol) para diferenciar S. aureus y
otros estafilococos. La identificación
IDENTIFICACION de los estafilococos coagulasa-
negativos resulta más complicada
y exige el uso de sistemas
comerciales diseñados para ello. No
se pueden emplear estos métodos
para identificar de forma
directa los estafilococos presentes en
muestras clínicas o detectados en un
hemocultivo.
Streptococcus pneumoniae Meningitis Bacteriemia

Sinusitis y otitis media Neumonía

Microscopía
Cultivo

Las muestras de esputo se deben sembrar en un medio

Estos microorganismos aparecen de manera característica
enriquecido con nutrientes y complementado con sangre.
como diplococos grampositivos en forma de lanceta
rodeados de una cápsula que no se tiñe.
Se aísla en los cultivos de esputo de un 50% de los
pacientes con neumonía. Su proliferación se ve afectada
La tinción de Gram compatible con S. pneumoniae se puede por el crecimiento de las bacterias bucales contaminantes.
confirmar con la reacción de quellung (del alemán «hinchazón»)

En esta prueba se mezclan anticuerpos anticapsulares

polivalentes con las bacterias para después examinar la
mezcla al microscopio. La presencia de mayor refringencia
alrededor de las bacterias se interpreta como una reacción
positiva para S. pneumoniae.
Streptococcus pyogenes
➔ Este microorganismo es la causa de la
faringoamigdalitis.
➔ Microorganismo más importante del
grupo A.
➔ Se transmite de persona a persona
mediante gotas de la respiración o
heridas.
➔ Personas de mayor riesgo son los
ancianos y los niños
DIAGNOSTICO
CULTIVO: Las muestras se siembran en agar sangre y se
incuban de 18 a 24 hrs. El diagnóstico presuntivo se realiza
mediante la prueba de susceptibilidad a la bacteriocina y
PYR y su confirmación serología con anticuerpos
específicos

Enfermedades producidas por este DETECCIÓN DE ANTÍGENOS: Dx rápido en muestras

microorganismo: faríngeas a través de la detección de antígenos de S.
pyogenes.Esta prueba no reemplaza el cultivo,
Faringitis
especialmente cuando el resultado es negativo
Escarlatina
DETECCIÓN DE ANTICUERPOS: Se utilizan en estudios
Pioderma
de secuelas pstestreptococicas y consisten en detectar la
Fiebre reumática presencia de antiestreptolisina.
Celulitis

Shock
 Bacillus anthracis B, anthracís fabrican su cápsula en
condiciones in vivo, pero no suelen
hacerlo en los cultivos.
ENFERMEDADES

Carbunco cutáneo Diagnosticos

Carbunco
gastrointestinal Las muestras clínicas (la microscopía
suele arrojar resultados positivos) y crece
Carbunco por con facilidad en condiciones ¡n vitro
inhalación

Se confirma al demostrar la presencia de la

cápsula y la lisis por un fago gamma o
resultados positivos en la prueba de DFA frente
al polisacárido específico de pared celular
 Bacillus subtillis
Bacillus subtilis es una bacteria Gram positiva, Catalasa-positiva, aerobio comúnmente encontrada en el suelo.

Muestra recomendada
Metodos de diagnostico:
Cualquier tipo alimentos sospechoso de haber
Metidos de cultivo cualitativo y cuantitativo: provocado una intoxicación, tanto fresco, como
cocinado
Estos métodos tienen como objetivo demostrar su presencia y sus
concertaciones, ya que cuando tiene implicaciones en intoxicaciones alimentarias
debe encontrarse en concetracion igual o superior a 10 UFC/mL o po gramo

Detección de la capacidad toxigénica :

Pueden utilizarse varios tipos de métodos para detectar la producción de toxinas

• Método con cultivos celulares

• Métodos basados de reacciones inmunológicas
• Métodos moleculares

Imagen microscópica de Bacillus subtilis


Neisseria gonorrhoeae
Es un diplococo gram negativo,
oxidasa positivo, que causa la
gonococia, una enfermedad de
transmision sexual.se diferencia
de otros tipos de Neisseria por la
prueba de la fermentación de
carbohidratos, fermentando solo
la glucosa.
DIAGNOSTICO
PRUEBAS BIOQUIMICAS:
Métodos de tincion gram y resistencia
a antimicrobiales
Oxidasa positiva, catalasa positiva,
fermentadora de carbohidratos
MÉTODOS MOLECULARES:
PCR
Sonda de quimioluminiscencia
aumentada: PACE detecta el ARNr
gonococcico = sensibilidad de 90% y
especificidad de 99.4% para N.
gonorrhoeae
Neisseria meningitidis Diplococos gramnegativos con
requerimientos nutricionales
exigentes y Crecen mejor entre
35 °C-37 °C en atmósfera
húmeda
Enfermedades:
Diagnóstico:

Meningitis
Macroscopia Cultivo
Meningococemia
La tinción de Gram del líquido El cultivo es definitivo, pero el
Neumomia cefalorraquídeo es sensible y específica, microorganismo es exigente y muere
pero su utilidad es limitada en las rápidamente si se expone al frío o a la
muestras de sangre (generalmente hay desecación.
muy pocos microorganismos presentes,
salvo en las sepsis devastadoras).
 Haemophilus influenzae
ENFERMERDADES En una proporción superior al 80% de las muestras de LCR
PRIMARIAS MICROSCOPÍA procedentes de pacientes con meningitis por Haemophilus
que no han recibido tratamiento se detecta la presencia de A. Pequeños cocobacilos observados en el
bacilos gramnegativos de morfología comprendida entre esputo de un paciente aquejado de neumonía
Meningitis Si el examen microscópico se realiza de cocobacilos y largos filamentos pleomorfos
manera cuidadosa, la detección del género
Haemophilus en las muestras clínicas
Bacteriemia dispone de sensibilidad y especificidad.
B. Formas pleomorfas delgadas observadas en
un niño de 1 año no vacunado de África con
Sinusitis una meningitis abrumadora.
CULTIVO
Epiglotitis El agar chocolate o agar de Levinthal se emplea en un gran número de laboratorios.

Neumonía Sin embargo, el factor V se destruye cuando el agar chocolate se calienta en exceso durante la preparación, lo que
impide el crecimiento de las especies de Haemophilus influenzae que precisan del mismo para su desarrollo.
Celulitis
Las bacterias aparecen como colonias opacas y lisas de L a 2 mm después de 24 horas de incubación. Las
cepas de H. influenzae suelen crecer mejor en los hemocultivos que se cultivan en condiciones anaerobias,
Otitis dado que en estas condiciones su desarrollo no precisa de factor X.

En esta prueba se mezclan partículas de látex recubiertas

DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
La detección inmunológica del antígeno de H.
influenzae, en especial del antígeno capsular PRP,
es una forma rápida y sensible de diagnosticar la
enfermedad por H. influenzae tipo b.
Se puede detectar PRP mediante de anticuerpos con la muestra clínica; la aglutinación se
la prueba de aglutinación de produce cuando dicha muestra contiene PRP
partículas, la cual es capaz de
detectar una cantidad inferior a 1
ng/ml de esta molécula en una
muestra clínica. El antígeno se puede detectar en el LCR y la orina
(donde el antígeno se elimina intacto).
Klebsiella pneumoniae
• Es un patógeno bacteriano importante, asociado a
infecciones en la comunidad y nosocomiales,
especialmente en pacientes inmunocomprometidos.
Las cepas de K. pneumoniae tienen el potencial para
causar morbilidad y mortalidad, particularmente en
las unidades de cuidados intensivos pediátricos y
servicios quirúrgicos.

Los medios de cultivo más comunes en donde crece son: Agar Mac Conkey, Agar Sangre, Agar
chocolate y Agar nutritivo donde da como resultado colonias grandes, convexas y de color rosa
intenso, se incuban a una temperatura de 37°C de 18-24 horas, y determinando su morfología a
través de la tinción de Gram como bacilos cortos sin agrupación.

La identificación de K/ebsiella, empieza cuando se observa una gran

colonia de consistencia mucoide en un medio de aislamiento primario,
agar Mac Conkey y Agar Sangre. Las colonias son mucoides, porque
Klebsiella presenta cápsula de polisacáridos.
Debido a la fermentación de lactosa, se producen colonias rojas en agar
de Mac Conkey y reacciones de pico ácido/ácido en TSI. Su
característica es la falta de movilidad y la incapacidad para
descarboxilar la ornitina.
Pseudomonas aeruginosa Diagnóstico de Laboratorio
Pseudomonas aeruginosa es una especie de bacterias Gram-negativas,
aeróbicas, con motilidad unipolar.
• Se aísla en tanto en medios no selectivos (agar
Patogénesis sangre) como en los moderadamente selectivos
(agarMacConkey).
 P. aeruginosa infecta los pulmones y las vías respiratorias, las vías urinarias, los tejidos,
(heridas), y también causa otras sepsis (infecciones generalizadas en el organismo)
• La tipificación serológica se usa para
investigar brotes.

Diagnóstico • Un aroma afrutado característico, tanto en

laboratorio como en la cabecera de la cama,
Cultivo de una muestra de sangre u otros líquidos corporales indican su presencia.
El médico diagnostica infección por Pseudomonas aeruginosa mediante la • Son Gram Negativos.Bacilos encapsulados
toma de una muestra de sangre o de otros líquidos corporales para su envío moviles (con flagelos polares).
a un laboratorio a fin de obtener un cultivo e identificar las bacterias. • Producen pigmentos azules y verdes que se
difundenOxidasas positivos
• Oxidan los carbohidratos, como la lactosa,
pero no lo fermentan.
También se realizan pruebas para • Se cultivan en agarMacConkey
determinar qué antibiótico va a ser
el más efectivo

P. aeruginosa al microscopio de barrido.

Bibliografía
• Libro: Microbiología médica
Autor: Patrick R. Murray, Ken S. Rosenthal y Michael A. Pfaüer
Link:
https://parabolasdocotidiano.files.wordpress.com/2011/10/microbiol
ogia_murray.pdf