Pasteurella haemolytica: aislamiento, identificación e

insensibilidad antimicrobiana en un caso de absceso

subcutáneo en un bovino.
Sebastian, G; Isabella, R; Brilly, V.
Universidad Cooperativa de Colombia (Sede Villavicencio-Meta)

Resumen
Pasteurella haemolytica es una bacteria que afecta a los animales, especialmente a
los bovinos y ovinos. Es una de las causas más comunes de la neumonía en estos animales,
una enfermedad que puede ser mortal al no ser tratada adecuadamente.. También puede
provocar otras infecciones, como abscesos, septicemia, artritis y mastitis. La Pasteurella
haemolytica es un problema importante para la salud y la economía de los productores
pecuarios. El presente artículo tiene como objetivo describir el análisis microbiológico de un
acceso bovino Pasteurella haemolytica , una bacteria de importancia en medicina veterinaria
y zootecnia. Se llevaron a cabo diferentes etapas en el proceso, incluyendo la obtención de
la muestra, el aislamiento, la tinción Gram, el cultivo en agar sangre y agar MacConkey,
pruebas bioquímicas (TSI, SIM, CITRATO y UREA), y un antibiograma. Los resultados de
estas pruebas proporcionarán información relevante para el diagnóstico y tratamiento de
infecciones causadas por Pasteurella haemolytica en animales.

Palabras clave: Acceso bovino,Microorganismos, bacterias, Microorganismos

patógenos, Análisis microbiológico, Resistencia a antibióticos, Vigilancia de patógenos.

Abstract
Pasteurella haemolytica is a bacterium that affects animals, especially cattle and
sheep. It is one of the most common causes of pneumonia in these animals, a disease that can
be fatal if not properly treated. It can also cause other infections, such as abscesses,
septicemia, arthritis and mastitis. Pasteurella haemolytica is a major health and economic
problem for livestock producers. The objective of this report is to describe the
microbiological analysis of Pausterella hemolitica, a bacteria of importance in veterinary
medicine and zootechnics. Different stages were carried out in the process, including sample
collection, isolation, Gram staining, culture on blood agar and MacConkey agar, biochemical
tests (TSI, SIM, CITRATE and UREA), and an antibiogram. The results of these tests will
provide relevant information for the diagnosis and treatment of infections caused by
Pasteurella haemolytica in animals.
 Keywords: Microorganisms, bacteria, Pathogenic microorganisms, Microbiological
analysis, Antibiotic resistance, Pathogen surveillance.
Introducción
Pasteurella haemolytica, ahora
llamada Mannheimia haemolytica, es una
bacteria que se asocia con la pasteurelosis
neumónica bovina, una enfermedad
respiratoria que afecta a los rumiantes,
especialmente al ganado vacuno. Esta
bacteria es un comensal normal de las vías
respiratorias superiores de los animales
sanos, pero puede convertirse en un
patógeno oportunista cuando hay
condiciones de estrés, inmunosupresión o
coinfección con virus o micoplasmas.
(Soria) Entre los factores de virulencia de
M. haemolytica, destaca la leucotoxina,
una exotoxina que tiene un efecto
citotóxico sobre los leucocitos de los
rumiantes, facilitando la invasión y la
inflamación pulmonar. (“Pasteurella spp. -
Agentes Biológicos - Bacteria”)
Pasteurella haemolytica puede causar
infecciones localizadas o sistémicas en los
animales y en los humanos que tienen
contacto con ellos. Una de las
manifestaciones clínicas más graves es la
bacteriemia, que consiste en la presencia
de la bacteria en el torrente sanguíneo. La
bacteriemia por Pasteurella haemolytica
puede provocar la formación de abscesos
en diferentes órganos, como el hígado, el
bazo, el riñón, el cerebro o el corazón. (M
and P) Los abscesos son acumulaciones de
pus que se forman como resultado de la
respuesta inflamatoria del organismo
frente a la infección. Los abscesos pueden
causar dolor, fiebre, malestar general y
complicaciones graves si no se tratan
adecuadamente.
Dada su relevancia clínica, es
fundamental realizar un análisis
microbiológico completo para identificar
la presencia de Pasteurella haemolytica en
muestras clínicas y determinar su
susceptibilidad a los antibióticos, lo que
guiará un tratamiento adecuado. El
objetivo de este informe es presentar un
caso clínico de pasteurelosis subcutánea
por Pasteurella haemolytica en un bovino
de engorde, que se manifestó como un
absceso retrofaríngeo con presencia de
pus. Se describen los hallazgos clínicos,
las medidas terapéuticas y la evolución del
caso. Asimismo, se discute la importancia
de esta entidad patológica y las posibles
vías de infección
Materiales y Métodos
El estudio se realizó en los
laboratorios de la universidad cooperativa
de Colombia, sede de la salud en
Villavicencio Meta. Se trata de un bovino
macho de raza cebú, de 2 años de edad, que
pertenece a un hato de 50 animales en una
finca de La Cecilia, Cubarral Meta. El
propietario reporta que el animal presenta
dificultad respiratoria, tos, fiebre, anorexia
y depresión desde hace 3 días. También
observa que el animal tiene un bulto en el
cuello, que al palparlo se siente caliente y
doloroso. El propietario sospecha que se
trata de una infección por pasteurella, ya
que ha tenido casos similares en el pasado.
Al examinar al animal, se encuentra que
tiene una temperatura rectal de 40.5 °C,
una frecuencia respiratoria de 60
respiraciones por minuto, una frecuencia
cardíaca de 120 latidos por minuto y una
mucosa oral congestiva, se percibe un
aumento de volumen en la región
retrofaríngea izquierda, que corresponde al
absceso. El animal muestra signos de dolor
y resistencia al movimiento de la cabeza y
el cuello. Se toma una muestra de pus del
absceso para realizar un cultivo y una
prueba de sensibilidad antimicrobiana.
1. Obtención de la Muestra para
Aislamiento
Para llevar a cabo el aislamiento de
Pasteurella haemolytica, se obtuvo una
muestra clínica de un paciente animal que
presentaba signos clínicos de infección
respiratoria. La muestra se recolectó de
forma aséptica mediante hisopos nasales y
se almacenó en un medio de transporte
adecuado para su posterior análisis en el
laboratorio, también se toma una muestra
de pus del absceso para realizar un cultivo
2. Siembra de Muestra para Aislamiento
a. Tinción Gram Se realizó la
tinción de Gram en una muestra de la
muestra clínica para determinar la
morfología de las bacterias presentes y
confirmar la presencia de Gram-negativos,
como Pasteurella haemolytica. Los
materiales que se usaron para realizar la
tinción y su procedimiento fue:
 Fijación: se aplicó una capa
delgada de la muestra bacteriana
sobre un portaobjetos limpio y
seco. Deja que se seque al aire.
 Cristal Violeta: se cubrió la
muestra con cristal violeta durante
unos 1-2 minutos. Luego de eso
se enjuaga con agua suavemente.
 Lugol: se aplicó la solución de
lugol sobre la muestra durante
aproximadamente 1 minuto.
 Alcohol: se enjuaga con alcohol de
manera rápida y suave durante 30s.
Este paso elimina el cristal violeta
de algunas bacterias. Es crítico y
debe hacerse cuidadosamente para
obtener resultados precisos.
 Fucsina: se aplicó fucsina durante
aproximadamente 1 minutos y
posteriormente enjuagar con agua
suavemente y dejar secar al aire. El
portaobjetos ahora muestra
bacterias teñidas de morado
(Gram-positivas) o rosa (Gram-
negativas).
 Observación al Microscopio: se
examinó la muestra bajo un
microscopio óptico para observar
la coloración de las bacterias y
determinar si son Gram-positivas o
Gram-negativas.
b. Cultivo en Agar Sangre y Agar
MacConkey Se sembró la muestra en
placas de agar sangre y agar MacConkey
para el aislamiento y crecimiento de las
bacterias. El agar sangre se utiliza para el
crecimiento de bacterias en general, Al realizar las pruebas bioquímicas
mientras que el agar MacConkey es se utilizó tubos de agar TSI, que contiene
selectivo para bacterias Gram-negativas. agar, glucosa, lactosa, sacarosa y sales de
hierro, Esto con el fin de observar el tubo
Agar Sangre
para cambios en el color y la producción
1. Se toma la muestra clínica con un
de gas y sulfuro de hidrógeno. Después se
hisopo estéril o asa bacteriológica.
utilizó un tubo de agar SIM que contiene
2. Sembrar la muestra en la
sulfito, caseína y agar para observar la
superficie del agar sangre,
presencia de sulfuro de hidrógeno (S),
estirando para obtener colonias
producción de indol (I) y movilidad (M) de
aisladas.
la bacteria. Luego se utilizó un tubo de
3. Incubar las placas sembradas entre
agar citrato que contiene citrato de sodio y
35-37°C por 18-24 horas en
sales esto con el fin de observar si la
condiciones de aerobiosis.
bacteria utiliza el citrato como fuente de
4. Observar el desarrollo de colonias,
carbono, lo que se reflejará en un cambio
morfología y presencia de
de color del agar. Y por último se utilizó
hemólisis.
un tubo de agar urea que contiene urea y
Agar MacConkey
un indicador de pH para observar si hay un
1. Tomar la muestra clínica de la
cambio de color del agar, indicando la
misma manera que para el agar
capacidad de la bacteria para descomponer
sangre.
la urea.
2. Sembrar en la superficie del agar
MacConkey estriando para
obtener colonias aisladas. d. Antibiograma Se realizó un
3. Incubar entre 35-37° C por 18-24 antibiograma utilizando discos de
horas. antibióticos para determinar la
4. Observar el desarrollo de colonias. susceptibilidad de las bacterias aisladas a
Las colonias lactosa positivas se diferentes agentes antimicrobianos. Esto
verán de color rosa-rojo, mientras es fundamental para guiar el tratamiento
que las lactosas negativas serán antibiótico en caso de infección.
incoloras o transparentes.

c. Prueba Bioquímica Se Resultados y Discusión

realizaron pruebas bioquímicas,  Los resultados obtenidos
incluyendo TSI (triple azúcar hierro), SIM concuerdan con reportes previos
(sulfuro, indol, motilidad), CITRATO y que señalan a Pasteurella
UREA, con el fin de caracterizar las haemolytica como un agente
propiedades bioquímicas de las bacterias etiológico frecuente en abscesos
aisladas y determinar si corresponden a subcutáneos en bovinos. La
Pasteurella haemolytica . presencia de esta bacteria
 encapsulada Gram negativa en el
pus del absceso analizado confirma
su participación como agente
causal en este proceso supurativo.
 Un hallazgo relevante en este caso
fue que la cepa de P. haemolytica
aislada resultó resistente a los
diferentes grupos de antibióticos
probados en el antibiograma. Esto
difiere de lo descrito en otros
estudios que reportan sensibilidad
de este microorganismo a
antibióticos como tetraciclinas,
penicilinas y quinolonas. La
resistencia antibiótica detectada
puede deberse al uso frecuente e
indiscriminado de antimicrobianos
en los hatos ganaderos, lo que
ejerce una presión selectiva sobre
las poblaciones bacterianas.
 La resistencia de la P. haemolytica
aislada representa un desafío para
el tratamiento efectivo del absceso
subcutáneo en este bovino. Será
necesario recurrir a antibióticos de
segunda línea y considerar la
obtención de sensibilidad in vitro
previo a su uso, dada la
probabilidad de resistencia cruzada
entre diferentes familias de
antimicrobianos. Asimismo, se
deberán reforzar las medidas de
control para disminuir la
diseminación de este patógeno
resistente.
Diagnósticos Diferenciales
 Mannheimia haemolytica:
Mannheimia haemolytica es una
bacteria muy relacionada con
Pasteurella haemolytica y es una
causa común de neumonía en
bovinos. Estas dos bacterias a
menudo se confunden debido a
similitudes en sus síntomas y
propiedades microbiológicas.
 Mycoplasma bovis: Mycoplasma
bovis es una bacteria que puede
causar neumonía en bovinos ya
menudo se asocia con Pasteurella y
Mannheimia en infecciones
respiratorias en ganado.
 Histophilus somni: Esta bacteria
puede causar neumonía bovina, así
como otras condiciones como la
fiebre de los transportistas y
enfermedades reproductivas.
 Virus sincitial respiratorio bovino
(BRSV): Los virus respiratorios,
como el BRSV, pueden causar
síntomas similares a la neumonía
bovina y deben considerarse en el
diagnóstico diferencial.
 Virus de la enfermedad de las
mucosas bovina (BVD): La
infección con el virus BVD puede
suprimir el sistema inmunológico
del ganado, lo que hace que los
animales sean más susceptibles a
infecciones bacterianas,
incluyendo las causadas por
Pasteurella.
Conclusión
El aislamiento de una cepa de
Pasteurella haemolytica
multirresistente a partir de un absceso
subcutáneo en bovino, representa un
hallazgo preocupante y un reto
 terapéutico para el caso clínico
estudiado. Este resultado evidencia la
necesidad de realizar una vigilancia
activa de la resistencia antimicrobiana
en patógenos veterinarios de
importancia como P. haemolytica.
Asimismo, resalta la relevancia de
implementar estrategias prudentes de
uso de antimicrobianos en medicina
veterinaria, a fin de preservar opciones
terapéuticas efectivas para infecciones
bacterianas en el ganado.
Figura 3. Resultados de prueba
bioquímica negativa.

Figura 1. Montaje de Antibiograma.

Figura 4. Tinsiòn gram (se observan
cocos gran negativos).

Figura 2. Montaje Agar Sangre y prueba

catalasa negativa. Figura 5. Aislamiento del cultivo
bacteriano. (Pasteurella Haemolytica)
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