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Diagnstico Microbiolgico

Toma de muestras clnicas representativas

Sitios no contaminados Sitios contaminados


con Flora Normal con Flora Normal
Orina
Biopsia (miccin espontnea o
de tejidos al acecho)

Esputo
Sangre/LCR

Orina Material fecal


(puncin suprapbica)
Diagnstico microbiolgico
Muestra clnica
Medio semislido: Medio Stuart
Medio Amies
Medio Medio Cary & Blair

TRANSPORTE Medio lquido: Agua peptonada (Vibrio cholerae)


PRAS/TAB (anaerobios)

Frasco estril: orina, materia fecal.


Hisopo en medio semislido: fauces, recto,
Material endocervix, uretra.
necesario Frasco con medio para anaerobios: anaerobios

Frasco de hemocultivo: sangre


Diagnstico microbiolgico
Conservacin de las muestras
TIPO DE MUESTRA TEMPERATURA AMBIENTE HELADERA (4c)

SANGRE X

ORINA X

EXUDADOS FARINGEOS X

ESPUTO Y MUESTRAS RESPIRATORIAS X

EXUDADOS GENITALES X
( hisopo en medio Amies o Stuart
para Neisseria gonorrhoeae)
LCR X

Punciones o biopsias de PIEL Y TEJ. X


BLANDOS
EXUDADOS OCULARES X

MUESTRAS PARA ANAEROBIOS X

MATERIA FECAL X
Diagnstico Microbiolgico
Deteccin de
Cultivo antgenos
Observacin bacterianos
microscpica Medios Selectivos
Medios Mtodos
diferenciales
moleculares
Medios de
enriquecimiento

Pruebas Bioqumicas

Identificacin

Sensibilidad antibitica
Diagnstico microbiolgico
Procesamiento de la muestra
Cultivo

Microscopia
Fresco Tincin
Presencia o no de bacterias
GRAM
Morfologa ZIEHL
NIELSEN
Movilidad
GIEMSA
Clulas epiteliales
OTROS
Leucocitos Aislar
Hemates
Identificar
Candidas (hongo)
Conocer el patrn
de susceptibilidad antibitica
Diagnstico
microbiolgico
Exmen en fresco

Hemates Clulas epiteliales

Leucocitos

Candida spp.
(hongo)
Diagnstico microbiolgico
Microscopio ptico
Tincin de Gram

Cocos Gram positivos

En racimo Ej: Staphylococcus aureus En cadena Ej: Streptococcus spp


Diagnstico microbiolgico
Microscopio ptico
Bacilos gram-positivos Corynebacterium diphteriae
(agrupamiento como letras chinas)

Bastones o cilindros
Diagnstico microbiolgico
Microscopio ptico
Tincin de Ziehl-Neelsen
Diagnstico microbiolgico
Cultivo
Medio lquido Medio slido
(enriquecer) (aislar)
Diagnstico microbiolgico
Cultivo
Medios Selectivos y Diferenciales

Levine
o EMB

Chapman
Diagnstico microbiolgico
Identificacin bacteriana

Pruebas bioqumicas Identificacin de antgenos


bacterianos

Serotipificacin

API E
Diagnstico microbiolgico
Serotipificacin
Se utilizan
anticuerpos
especficos para
detectar antgenos
en la superficie de la
envoltura bacteriana
Aglutinacin = positivo

1
1 gota de colonia
Ac aislada
Diagnstico microbiolgico
Repaso
Cultivo

Aislamiento
- identificacin-

Microorganismo patgeno

Pruebas de susceptibilidad antibitica


Pruebas de susceptibilidad antibitica

Determinar la
sensibilidad de una cepa
bacteriana a un
determinado antibitico
OBJETIVOS

Determinar la eficacia
de un antibitico
Antibiograma de
difusin o mtodo de
Kirby & Bauer
Significado clnico de la prueba
de Kirby & Bauer

Bacterias sensibles
Bacterias de susceptibilidad intermedia
Bacterias resistentes
Esta es la
CIM

Gradiente
de concentraciones
en la tira (g/ml)

E-Test
La diferencia con el disco, es que el disco contiene una nica
concentracin del antibitico
Diagnstico Microbiolgico Indirecto:
deteccin de anticuerpos sricos
Agente etiolgico Mtodo diagnstico
serolgico
Treponema pallidum IF (FTA-abs)/ HA (MHA-Tp)
VDRL
Brucella spp. Aglutinacin/ ELISA

Chlamydia trachomatis IFD/ELISA

Leptospira interrogans Aglutinacin

Coxiella burnetti IFI


FC: Fijacin de complemento IF: inmunofluorescencia HA: hemoaglutinacin
FTA-abs: Fluorescent Treponemal Antibody with absorption.
MHA-Tp: Microhemaglutinacin del Treponema pallidum
EJEMPLO

NIO DE 3 AOS LLEGA A LA GUARDIA


CON LOS SIGUIENTES SINTOMAS:

VOMITOS FIEBRE FUERTE RIGIDEZ


ALTA (38 a DOLOR DE DE NUCA
400C) CABEZA
Y FOTOFOBIA

AL DIA CON EL CALENDARIO DE VACUNACION


Diagnstico microbiolgico de meningitis
Lquido cefalorraqudeo (2 tubos de ensayo)

PROCESAMIENTO
Fisicoqumico INMEDIATO

TRANSPORTE SIN
Cultivo REFRIGERAR
(N.meningitidis)

X3
HEMOCULTIVO
S

SUBCULTIVOS

Deteccin Visual: Turbidez , Resiembra a ciegas


Formacin de gas, de pelculas, menos de 24 h de incubacin
cogulos o pequeas colonias en y a intervalos hasta 7 das de incubacin, sin
los frasco esperar la observacin del desarrollo en el
frasco
SUBCULTIVO slo
de hemocultvos positivos
DIAGNSTICO MICROBIOLGICO
LCR

Sin centrifugar sobrenadante Centrifugado


sedimento Gram
Observacin en
fresco Diagnostico Virus
directo ZN
(mvil)-Giemsa-
Tricrmico Tinta
china
LATEX
Aislamiento
CIEF
Bsqueda
ELISA cidos nucleicos Cultivo
PCR
Identificacin por pruebas
bioqumicas
Antibiograma