EL MICROSCOPIO ÓPTICO

DESCRIPCIÓN Y MANEJO.
FUNDAMENTO
 1. MICROSCOPIOS Y MICROSCOPÍA
1.1 Microscopios ópticos
De campo claro.
De campo oscuro.
De contraste de fases.
De fluorescencia.
1.2 Microscopios electrónicos.
De transmisión.
De barrido.
2. LA RESOLUCIÓN DE LOS MICROSCOPIOS
Empleo del objetivo de inmersión en aceite.
3. DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
4. MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO
5. MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES
6. PREPARACIONES PARA EXAMEN POR MICROSCOPÍA
ÓPTICA
TÉCNICAS DE " MONTAJE HUMEDO” Y GOTA PENDIENTE
EXTENSIONES FIJADAS Y TEÑIDAS
 TAMAÑOS CELULARES

• 1 MICRA = 10-6 m
• 1 NANOMETRO = 10-9 m
• 1 AMSTRONG = 10-10 m

• El ojo humano no distingue menos de

50 micras de diámetro
 TIPOS DE MICROSCOPIOS

MICROSCOPIOS ÓPTICOS:
Fuente de iluminación: luz visible
Sistema de lentes ópticas.

MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS:
Fuente de iluminación: chorro de electrones.
Lentes: electroimanes.
 Microscopios ópticos

• Muestras de más de 0,2 micras.

• Características de la muestra:
Finas
Contraste entre las estructuras
Que reciba luz del condensador
• Necesario:
Tinciones
Equipo de contraste de fases
 TIPOS DE MICROSCOPIOS ÓPTICOS

1. De campo claro

2. De campo oscuro

3. De contraste de fases

4. De fluorescencia
 Microscopio de campo claro

• El más utilizado
• Zona de observación iluminada
• Preparaciones naturales y teñidas
• Amplificación: 1000 aumentos
• Dos sistemas de lentes (cóncavas y
convexas) y espejos correctores
• Sistema de iluminación
MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO
Observación con M.O de campo claro
 Microscopio de campo oscuro

• Zona de observación oscura

• Objetos fuertemente iluminados
• Condensador especial: haces de rayos
laterales sobre el objetivo
• Útil para microorganismos en
suspensión (preparaciones en fresco o
en gota pendiente)
REPRESENTACIÓN ESQUEMÁTICA DE LA MICROSCOPÍA EN CAMPO
OSCURO. Solo penetran en el objetivo los rayos de luz que chocan contra un
objeto situado sobre el portaobjetos.
OBSERVACIÓN EN CAMPO CLARO
Observación en campo oscuro
 MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE
FASES
• Observación de células vivas.
• No hay que teñirlas.
• Provistos de diafragmas y lentes
especiales: aumentan la diferencia en
el índice de refracción de las células y
el medio.
• Imagen en relieve.
Células epiteliales con contraste de fases
 Microscopio de fluorescencia

• Se utiliza luz ultravioleta.

• Dicha luz excita ciertas

moléculas presentes en la
muestra (naturales o añadidas)
que emiten la fluorescencia.
Células epiteliales con fluorescencia
Células epiteliales con m. de fluorescencia a mayor aumento
Microscopio
electrónico
 MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS

• Fuente de iluminación: chorro de electrones

• Lentes: electroimanes
• Amplificación: varios cientos de miles. (se
pueden apreciar objetos de 3 A.
• No se puede utilizar para células vivas: la
muestra es bombardeada por el chorro de e-
que incrementan su temperatura.
• Se pueden utilizar sustancias para aumentar
el contraste.
ELEMENTOS BÁSICOS DEL M.E.

• Cañón de e-: crean la imagen

aumentada
• Lentes magnéticas: enfocan y dirigen
el haz de e-.
• Sistema de vacío: para no alterar la
trayectoria de los e-.
• Sistema de registro de la imagen
MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS

Microscopio de transmisión:
- Cortes finos
- Amplificación: entre 10.000 y 100.000
aumentos.
Microscopio electrónico de barrido
- Células enteras
- Amplificación: entre 1.000 y 10.000
aumentos.
Mitocondria (X 60000) con microscopio
electrónico de transmisión
Bacteria creciendo sobre estomas (X 4000)
Microscopio electrónico de barrido
PODER DE RESOLUCIÓN:

1.Ojo humano: 0,1 mm

2.Microscopio óptico: 0,2 micras
3.Microscopio electrónico: 4 amstrong

OBJETIVO DE INMERSIÓN:

1.Mayor amplificación de la imagen

2.El más usado en Bacteriología
Sistema óptico: condensador, objetivos y oculares.

Sistema mecánico: soporte (base, brazo), platina,

macro y micrométrico, cabezal y revólver
Gota pendiente:
a.- Círculo de vaselina
b.- Muestra
c.- Se coloca el portaobjetos
d.- Se da la vuelta y se observa
EXTENSIONES FIJADAS Y TEÑIDAS:

1.Extensión

2. Fijación:
- calor
- química: ácido ósmico, formaldehido
3.Colorante

4.Lavar el exceso