MICROSCOPIA

DE LUZ Y ELECTRÓNICA
OBJETIVOS DE LA CLASE
 Establecer la utilidad de la microscopía de luz y
electrónica en el avance de la Biología celular y
molecular.

 Identificar las diferentes partes ópticas y mecánicas del

microscopio óptico compuesto y sus funciones.

 Describir las diferentes clases de microscopio óptico

compuesto.
OBJETIVOS DEL LABORATORIO

 Poner en práctica las recomendaciones

para el cuidado y uso correcto del
microscopio.

 Aplicar las normas de bioseguridad en el

desarrollo de la práctica de laboratorio,
LUZ VISIBLE

 Forma parte de una estrecha franja que va desde

longitudes de onda de 380 nm (violeta) hasta los 780 nm
(rojo).

 Posee doble naturaleza, por su forma de propagación

(naturaleza ondulatoria) y por la forma de interactuar
con la materia (naturaleza corpuscular).
 LAS LENTES

 Objetos que concentran o

hacen divergir los rayos de luz

 Existen dos tipos principales de Lentes convergentes

lentes:
 Convergentes
 Divergentes

Lentes divergentes
FORMACIÓN DE IMAGEN REAL

Plano focal
Objeto
Punto focal Punto focal Imagen
real

Lente
 El objeto está fuera del plano focal, y la imagen se
forma detrás de la lente, se observa aumentada e
invertida.
 EL MICROSCOPIO COMPUESTO

 Instrumento óptico
que se usa para
aumentar o amplificar
las imágenes de
objetos y organismos
no visibles a simple
vista.
EL MICROSCOPIO COMPUESTO
 Se utiliza para
examinar objetos
transparentes o
cortados en láminas
tan finas que se
transparentan

 Está conformado por

tres sistemas:
1. Iluminación
2. Óptico
3. Mecánico
PARTES DEL MICROSCOPIO
COMPUESTO

 Sistema de iluminación:
 Sistema óptico: reproduce y
dirige la luz hacia el objeto,
aumenta las imágenes,
comprende:
comprende:
 Fuente de luz
 Lentes oculares
 Espejo
 Lentes objetivos
 Condensador (formado
por lentes)
 Prismas

 Diafragma
 Condensador
 SISTEMA DE ILUMINACIÓN

 FUENTE DE LUZ:
 Lámpara halógena de
intensidad graduable.
 Situada en el pie del
microscopio
 El microscopio utiliza la
refracción de la luz para
la formación de imágenes
SISTEMA DE ILUMINACIÓN

 CONDENSADOR:
 Sistema de lentes
situadas bajo la
platina

 Concentra la luz
generada por la fuente
de iluminación hacia
la preparación
SISTEMA ÓPTICO

 OBJETIVOS:
 Insertados en el mecanismo del
revólver
 Generan una imagen real, invertida y
aumentada.
 Los mas frecuentes son los de 4, 10,
40, y 100 aumentos.
 Este último se llama de inmersión ya
que para su utilización se necesita
utilizar aceite de cedro
SISTEMA ÓPTICO

 OCULARES:
 Su función es la de
captar y ampliar la
imagen formada en
los objetivos.
 Los mas utilizados
son los de 10X
(producen un aumento
de 10 veces).
  Sistema mecánico: posee los elementos que sostienen a las partes del
sistema óptico y de iluminación; comprende:

Base Mecanismo del

Brazo revólver
Platina Tornillos
macro y
Pinzas de sujeción micrométrico
Tubo del ocular Tornillos del
carro
SISTEMA MECÁNICO

 BASE:
 Sostiene al
microscopio y en ella
se integra la fuente
luminosa
SISTEMA MECÁNICO

 BRAZO:
 Columna
perpendicular a la
base
 Puede ser arqueado o
vertical y une a la
base con el tubo
SISTEMA MECÁNICO

 PLATINA:
 Plataforma donde se
coloca la preparación,
posee pinzas de
sujeción y tornillos
del carro.
SISTEMA MECÁNICO

 TORNILLO
MACROMETRICO Y
MICROMETRICO:
 Permiten enfocar al mover la
platina hacia arriba y hacia
abajo.
 El macrométrico lo hace de
forma rápida y el micrométrico
de forma lenta.
 Llevan incorporado un mando
de bloqueo que fija la platina a
una determinada altura.      
 Los límites del aumento

 En realidad no hay un límite máximo

de aumentos en un microscopio.

 La limitación fundamental no
consiste en el aumento sino en el
poder de resolución, hasta llegar a
“amplificación vacía”
AMPLIFICACIÓN

Amplificación de Amplificación vacía

imagen imagen
 PODER DE RESOLUCIÓN

 Distancia mínima entre dos objetos para que sean

percibidos como objetos separados.
 La mayoría de células eucarióticas miden entre 3 y 10
veces menos el poder de resolución del ojo.

Ojo humano Microscopio Microscopio

compuesto electrónico
Poder de 100 m ó 0. 2 m ó 0.2nm ó
resolución 0.1 mm 200 nm 2 Aº
 PODER DE RESOLUCIÓN
 El factor limitante del poder de resolución, es la longitud de onda
de la luz

Imagen en microscopio
compuesto Imagen en microscopio
MEDIDAS MICROSCÓPICAS

 Milímetro: milésima parte del metro (mm)

 Micrómetro: milésima parte del milímetro (m)
 Nanómetro: milésima parte del micrómetro (nm)
 Angstrom: décima parte del nanómetro (Aº)
TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ

 De campo claro
(brillante): el
contraste lo provee la
tinción de las
muestras
Imágenes con
microscopio de
campo claro
 TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ

 Contraste de fases:
permite observar
muestras vivas, o
carentes de color
Imagen con
microscopio de
contraste de fases
TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ

 Fluorescente: utiliza
luz de longitud de
onda corta para
Fibroblastos teñidos con el
excitar los electrones fluorocromo FITC
de la muestra

Bacillus subtilis esporulando

teñidos con FITC, DAPI y
βgalactosidasa.
 TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ

 Luz polarizada:
utiliza filtros
polarizantes para
observar estructuras
con birrefringencia
(emite brillantez)
Cristales de ácido urico
observados con
microscopio de luz
polarizada
TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ

 De campo oscuro:
para muestras no
teñidas, objeto se
observa brillante
sobre un fondo oscuro

Treponema pallidum observado con

microscopio de campo oscuro
TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ

 Tridimensional
Confocal: utiliza
muestras de cortes Secuencias de microscopia confocal

seriados teñidas con

fluorescencia, para
reconstruir una
imagen tridimensional
Microscopio confocal.
MICROSCOPIO
ELECTRÓNICO

 Utiliza electrones en lugar de

fotones para formar imágenes
de objetos muy pequeños
 Funciona con un haz de
electrones de alto voltaje
 Utiliza lentes magnéticas para
formar la imagen sobre una
pantalla
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA

 Aumenta la imagen desde 1000 hasta 250000 veces

 Posee mayor poder de resolución que el microscopio

óptico, cerca de 2 000 veces.

 Existen dos tipos de microscopio electrónico:

 MTE (microscopio de transmisión electrónica) electrones
transmitidos a través de una muestra.

 MET (microscopio electrónico tridimensional o de barrido)

los electrones rebotan de la superficie de la muestra.
MICROSCOPIA ELECTRÓNICA DE
TRANSMISIÓN.

Microscopia de un alga roja antes

de formar su pared
MICROSCOPIA ELECTRÓNICA DE BARRIDO.

Óvulo de hamster sin

zona pelucida con
espermatozoides

Criofractura de epitelio gástrico vista

por microscopia de barrido
 RECOMENDACIONES PARA EL USO DE
MICROSCOPIO ÓPTICO

 Sostenerlo firmemente del brazo y base

 No tirar del cable al desconectarlo
 Apagar la iluminación cuando no esté en uso
 Limpiar la platina y lentes antes de guardarlo, con
limpiadores apropiados
 Cubrirlo cuando se vaya a guardar.
LA CELULA COMO
UNIDAD BIOLOGICA
 ROBERT HOOKE
 ANTONIE VAN LEEUWENHOEK
 ROBERT BROWN, MATTHIAS SCHLEIDEN
 THEODRO SCHWANN

TEORIA CELULAR
 1 TODOS LOS ORGANISMOS CONSISTEN EN UNA O
MAS CELULAS
 2 LA CELULA ES LA UNIDAD BASICA DE LA
ESTRUCTURA DE TODOS LOS ORGANISMOS
 3TODAS LAS CELULAS SE ORIGINAN
UNICAMENTE A PARTIR DE CELULAS
PREEXISTENTES

TEORIA CELULAR
 CITOLOGIA
 BIOQUIMICA
 GENETICA

TEORIA CELULAR
 PROCARIOTAS
 EUCARIOTAS protistas, vegetales y animales

CELULAS
 PARED CELULAR
 MEMBRANA CELULAR
 NUCLEO
 MITOCONDRIA
 RETICULO ENDOPLASMICO
 CITOESQUELETO
 APARATO DE GOLGI
 PEROXISOMA
 RIBOSOMA

CELULA
 UNICELULARES
 MULTICELULARES

ORGANISMOS
 VIRUS
 VIROIDES
 PRIONES

PARTICULAS NO CELULARES