Cuantificación de Cuerpos Cetónicos

Cetogénesis
La cetogénesis se localiza entre el
metabolismo de carbohidratos y el de lípidos
Síntesis de cuerpos cetónicos
Patologías
Parte experimental
CUANTIFICACIÓN DE CUERPOS CETÓNICOS EN SANGRE
• OBJETIVOS.
Cuantificar la cantidad de acetona y ácido acético en sangre.
Relacionar los diferentes padecimientos cuando va acompañada de una cetosis.

INTRODUCCION
• El acetil-CoA es producido en la oxidación total de los ácidos grasos en la mitocondria durante la -oxidación. Cuando la
concentración de oxalacetatato es limitada y hay restricción de carbohidratos, este sirve en la gluconeogénesis, entonces el
acetil-CoA experimente otro destino. Una fracción importante del acetil – CoA pueden convertirse en la mitocondria del hígado
en acetoacetato y 3-hidroxibutirato, compuesto que junto a la acetona se denominan cuerpos cetónicos.

La formación de los cuerpos cetónicos ocurre en el hígado y en menor proporción en los riñones. Todo el proceso ocurre en la
matriz mitocondrias. El hígado libera el acetoacetato y 3-hidroxibutirato al torrente sanguíneo para su utilización en los tejidos
extra hepáticos, tales como los músculos, particularmente en situación de deficiencia suministro de glucosa (inanición) o
deficiencia de insulina (diabetes). Las proporciones generales de cuerpos cetónicos totales en el suero son:
2% de acetona, 20% acetoacetato y 75% hidrixibutirato cuando la concentración en sangre es mayor de 70 mg/dl se presenta la
cetonuria.
FUNDAMENTO
La acetona destila isotérmicamente y reacciona con la vainillina en medio ambiente fuertemente
alcalino, formando vainillalacetona y divainillalacetona, el color rojo-anaranjado producto, presenta
un máximo de absorbancia a 415 nm. Con la vainillina reacciona ya sea la acetona preexistente en la
muestra, así como aquella que se forma por descarboxilación espontanea o irreversible del ácido
acetoacetico

Vainillina + acetona → Vainillalacetona + H2O

2 Vainillina + Acetona → divainillalacetona + H2O

EQUIPO
Baloncito de Widmark de 50 ml. para micro difusión o acondicionar el material según el
requerimiento.
PARTE EXPERIMENTAL
Muestra de sangre de preferencia de una persona diabética
REACTIVOS
a) KOH 4 mol/lt.. Pesar 22,4 g. de KOH y disolver en un baloncito tarado de 100 ml. con agua destilada y
aforar al volumen.
b) Vainillina 2,0 g/dl. En KOH 4 mol/lt. Se prepara la cantidad necesaria en el momento del uso.
c) Solución estándar concentrada de acetona 1 g./lt.
Diluir 1,26 ml. de acetona P.A. (peso específico 0,791), llevar a un litro con agua destilada.
Para preparar esta solución con mayor precisión. Pesar 1,00 g. de acetona con la precaución estricta para
los líquidos volátiles. Esta solución tiene la concentración de 1,0 mg/ml. y es estable por al menos 2 meses
conservado a 4 .
d) Estándar de trabajo 5,0 mg/dl.
Se prepara al momento de su uso, diluyendo 0,5 ml. del estándar concentrado a 10,0 ml. con agua
destilada.
PROCEDIMIENTO
1. Preparar 3 baloncitos para micro difusión, uno para el blanco reactivo, el estándar y la
muestra.
2. Pipetear 2,0 ml. de la solución de vainillina sobre el fondo de cada uno de los baloncitos.
3. Colocar 0,20 ml. de estándar o de la muestra en la tasita del tapón del correspondiente
baloncito.
4. Insertar rápidamente con mucho cuidado las tapitas sobre los baloncitos y detenerla bien.
5. Colocar los baloncitos en baño maría con termostato por una hora a 55 .
6. Después del tiempo necesario para una completa destilación, proceder a enfriar los baloncitos
a temperatura ambiente, quitar el tapón y añadir a todos los baloncitos 3,0 ml. de agua destilada.
7. Mezclar bien. Medir la absorbancia del estándar y de la muestra contra el blanco de reactivo a
415 nm.
CÁLCULOS
Acetona mg/dL = Absorbancia de la muestra x 5
Absorbancia del estándar

Valores normales:
Sangre entera 0,5 – 3,0 mg/dL
Plasma o suero 0,45 - 2,7 mg/dL
• https://www.youtube.com/watch?v=uU4SuI1SmUw
Cuestionario
1. Que es cetoacidosis diabética
2. ¿Qué nombre recibe la presencia de cuerpos cetónicos en sangre y
orina cuando se encuentran en cantidades más altas que las
normales?
3. ¿En qué condiciones metabólicas se acumulan cuerpos cetónicos?
4. ¿Cuál es el fundamento de la prueba de Imbert?
5. Escriba la ruta metabólica de la formación de cuerpos cetonicos