ASIGNATURA : BIOQUIMICA Y NUTRICION

CICLO : III
SEMESTRE ACADEMICO : 2020-1
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA
PROFESIONAL DE MEDICINAHUMANA
“Dr. Wilfredo Erwin Gardini Tuesta”

ACREDITADA POR SINEACE

RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV

PRÁCTICA N°07:
DETERMINACIÓN DEL BICARBONATO SÉRICO Y CUERPOS CETÓNICOS
EN ORINA. CETOACIDOSIS DIABÉTICA.

PLANA DOCENTE
SEDE LIMA : ÁVILA ZAMORA, Enrique.
FILIAL ICA : SALINAS VELIZ, Yolanda.
FILIAL CHINCHA : COILA DE LA CRUZ, Hilda Victoria.
DOCENTE ASISTENTE : ALVARO HILLCARA, Mirna Vanessa.
DOCENTE ASISTENTE : LÉVANO AVALOS, Juan Alejandro.
LOGRO A MEDIR:

Aprender a interpretar los niveles de bicarbonato sérico y presencia de

cuerpos cetónicos en la orina en la Cetoacidosis diabética
MARCO TEÓRICO:

La Diabetes Mellitus se caracteriza por hiperglicemia y otros desarreglos que

se deben a una inadecuada acción de la Insulina sobre los tejidos corporales,
ya sea porque exista un reducido nivel circulante de Insulina o una resistencia
de los tejidos blanco a sus acciones .La Diabetes se divide en dos categorías

1. La Diabetes Tipo I o Diabetes Insulino dependiente ó Diabetes juvenil

(llamada así porque se inicia en la juventud)

2. La Diabetes tipo II o no Insulino dependiente (diabetes de inicio en la edad

madura).

Puede haber tipos intermedios que se superponen.

1. LA DIABETES TIPO I afecta al 10 % de los pacientes diabéticos y la
dependencia de la Insulina significa que no solamente que la insulina es
necesaria para el óptimo control de la glucosa sanguínea, que también podría
ser cierto para la forma tipo II, sino que “sin Insulina exógena el paciente es
más proclive a desarrollar CETOACIDOSIS diabética.
• Se sabe que esto refleja una
completa o casi ausencia de insulina
en estos pacientes, en contraste con
la falta parcial de insulina o la
resistencia a la insulina característica
de los pacientes del tipo II.
• Otra característica clave de los
pacientes con Diabetes tipo I es su
presencia en niños y adultos jóvenes
y su presencia en las personas más
bien delgadas que obesas.
2. LA DIABETES TIPO II comúnmente afecta a las personas de edad madura,
y con sobrepeso.
• Como algo de insulina es producida en estos pacientes, no se produce
cetoacidosis
• Sin embargo puede ser necesario el tratamiento con insulina para
prevenir la severa hiperglicemia.
Debemos saber desde ahora que se puede
producir Diabetes secundaria ó alterarse la
tolerancia a la glucosa de modo secundario a
ciertas enfermedades que afectan la producción
ó la acción de la Insulina, tales como:
 la pancreatitis crónica,
 el Síndrome de Cushing,
 la acromegalia,
 la alteración de los receptores de insulina y
otras.
CETOACIDOSIS DIABÉTICA:
Se produce en los diabéticos insulinodependientes cuyo nivel de insulina circulante
es insuficiente para permitir una utilización de la glucosa por los tejidos periféricos
y para inhibir la producción de glucosa y el catabolismo tisular. El incremento del
Glucagón y el aumento de las hormonas que aumentan en respuesta al stress
(como la adrenalina, noradrenalina, cortisol y hormona del crecimiento) contribuyen
a los desarreglos metabólicos.
La insuficiente cantidad de insulina reduce la utilización periférica de glucosa y junto
con el exceso de glucagón incrementan la producción hepática de glucosa a través
de la estimulación de la gluconeogénesis y la glucogenólisis y la inhibición de la
glicólisis. La degradación de las proteínas en los tejidos periféricos suministra un
flujo de aminoácidos hacia el hígado como substrato para la gluconeogénesis. El
resultado es la hiperglicemia .La diuresis osmótica resulta de la elevación de la
glucosa (y cuerpos cetónicos) y genera hipovolemia, deshidratación y pérdida de
sodio, fosfato de potasio y otras substancias por la orina. La depleción del volumen
estimula la liberación de catecolaminas lo cual se opone a la acción de la insulina
en el hígado y contribuye a la LIPÓLISIS.
CETOGÉNESIS: La lipólisis acentuada
que resulta de la falta de insulina y del
exceso de catecolaminas moviliza los
ácidos grasos libres desde sus depósitos
en el tejido adiposo y en lugar de
reesterificarse con el glicerol para formar
triacilgliceroles, el hígado desvía sus rutas
metabólicas hacia la producción de
cuerpos cetónicos. El glucagón
incrementa el nivel de la carnitina, que
capacita a los ácidos grasos a entrar en la
mitocondria, donde ellos sufren beta
oxidación hacia cuerpos cetónicos.
Además el glucagón disminuye el
contenido hepático de malonil CoA, que
es un inhibidor de la oxidación de ácidos
grasos.
MATERIAL DIDÁCTICO: DOSAJE DE BICARBONATO SÉRICO
Reactivos y materiales:
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:
EXPERIMENTO A:
DOSAJE DE BICARBONATO SÉRICO
1
En un beaker de vidrio colocar:
5 ml de HCl 0.01 N
1 ml de suero
2 gotas de alcohol 5 ml HCl
0.01 N
2 gotas de
alcohol

1 ml
suero

2 3 4
Agitar y luego reposo 2 min.
Añadir 3 gotas del indicador fenolftaleína.

5 6 7

3 gotas de
fenolftaleína
2 minutos
de reposo
Colocar a 37° C en Baño María por 10 minutos.
Titular con NaOH 0.01N, hasta obtener un color rosado pálido.
Anotar la cantidad de NaOH gastado.

Baño maría por

8 10 min a 37°C
Cálculos:

(5 - X ml gastados de NaOH en la titulación) x 10 = mMol/ Litro de HCO3-

Considerar que:
a) 1ml de NaOH 0.01 N equivale 0.01 mEq HCO3 -
b) Vol. de muestra usada en la titulación: 1 ml
c) Expresar los valores de HCO3- en mMol/Litro

Se realizó la lectura en la bureta y se gastó

2.5 ml. De solución de NaOH 0,01 N. Realice
el cálculo

Valores Referenciales (Normales): 22 a 26 mMol/Litro

EXPERIMENTO B:
INVESTIGACIÓN DE CUERPO CE TÓNICOS EN LA ORINA

Test de Rothera.- Esta prueba depende de la reacción entre la Acetona y el

Nitroprusiato para formar un complejo coloreado púrpura rojizo. Indica la presencia de
acetoacetato y/o acetona.

Reactivos:
Cristales de sulfato de amonio
Solución de Nitroprusiato al 10% en solución acuosa, la cual
deberá ser fresca.
Amoniaco solución (Hidróxido de amonio concentrado)
Muestra problema: orina
Tubos de prueba de vidrio de 13x 100 mm aproximadamente
Pipetas Pasteur capilares ó pipetas de vidrio de 1 ml
terminales Espátulas ó bajalenguas de madera.
Baguetas de vidrio.
 1

2 3

Colocar Añadirle con la Disolver

aproximadamen espátula con
te 2 ml de orina aproximadamente bagueta
en un tubo de 0.5 g de sulfato de
prueba amonio en cristales

https://www.youtube.com/watch?v=bhLpvXnXMRA
 https://www.youtube.com/watch?v=bhLpvXnXMRA

4
5 6

Por la pared lateral del tubo de

prueba, sin pipetear con la
Añadir 2 á 3 gotas de Mezclar boca, lentamente, deslizar el
sol. Nitroprusiato 10%. bien
amoniaco con una pipeta
Pasteur o pipeta de vidrio
Esperar unos minutos y ver la formación de
un anillo morado en la interfase en caso
positivo para cuerpo cetónicos .Si no
aparece este color la prueba es negativa.
INSTRUMENTO DE EVALUACIÓN:

1.- Explique la formación de cuerpos ce tónicos y porque se producen.

2.- Explique las diferencias entre cetoacidosis diabética y coma
hiperosmolar.
3.- ¿Cómo se diagnostica a un paciente que está en cetoacidosis
diabética?
4.- ¿A qué llama: exceso de bases y reserva alcalina?
5.- Explique los diferentes métodos de laboratorio que existen para el
dosaje tanto de bicarbonato en sangre como de cuerpos cetónicos en
orina

Fuente: Guía de práctica de Bioquímica y Nutrición UPSJB