Introducción a

los inmunoensayos
Clinica básica IVD COLOMBIA
Manuel Ramírez
1 Introducción

2 Técnicas de ensayos
3 Funcionamiento práctico
4 Modos de análisis

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 Introducción
1
• Inmunoensayo es una prueba que usa complejos de
anticuerpo y antígeno para generar un resultado perceptible
• Inmunoensayo: inmuno Se refiere a la respuesta
inmunológica que hace que el cuerpo genera anticuerpos
ante la presencia de un antigeno ( los anticuerpos son
específicos para dicho antigneno) y ensayo se refiere a una
prueba, por tanto un inmunoensayo es una prueba que utiliza
inmunocomplejos cuando se unen los anticuerpos y los
antígenos

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 Introducción
1
• Los Inmunoensayos se diferencian de otros tipos de pruebas
de laboratorio, como las pruebas colorimétricas, ya que usan
complejos anticuerpo:antígeno para generar una señal que
pueda medirse. En oposición, la mayoría de las pruebas de
rutina de química clínica utilizan reacciones químicas entre el
reactivo (solución de sustancias químicas u otros agentes) y la
muestra del paciente para generar un resultado de la prueba.

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 Introducción
1
• Anticuerpo es una proteína producida por el cuerpo en
respuesta a una sustancia “invasora” (extraña). Los
anticuerpos se producen como parte de la respuesta
inmunológica del cuerpo para protegerse. Es también el caso,
por ejemplo, de algunos test de inmunoensayos para
determinar la presencia de anticuerpos contra las moléculas
de cáncer. Así, si los anticuerpos están presentes, significa
que las células invasoras de cáncer también lo están..

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 Introducción
1
• Antígeno : Se entiende como antígeno (Ag) cualquier
molécula que puede ser reconocida específicamente por cada
uno de los componentes del sistema inmunológico. En un
sentido más estricto, el antígeno es cualquier molécula capaz
de inducir la producción de anticuerpos específicos y la
activación de linfocitos T, también precisos.

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 Introducción
1
• Analito es todo lo que se mide ( concentración) en una
prueba de laboratorio. En el inmunoensayo, el analito puede
ser tanto un anticuerpo como un antígeno.

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 Introducción (resumen)
1
• Los inmunoensayos utilizan un anticuerpo selecto o más para
detectar analitos de interés. Los analitos que se miden
pueden ser aquellos que están presentes en el cuerpo
naturalmente (como por ejemplo una hormona tiroidea),
aquellos que el cuerpo produce pero no están típicamente
presentes (como por ejemplo un antígeno de cáncer), o
aquellos que naturalmente no existen en el cuerpo (como por
ejemplo una droga de abuso).
• Los anticuerpos poseen una alta especificidad y afinidad para
un antígeno específico. Es la unión específica de un
anticuerpo a un antígeno lo que permite la detección de
analitos por medio de una variedad de técnicas de
inmunoensayo.
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 Técnicas de ensayos
2
• Todos los inmunoensayos requieren el uso de material
marcado para medir la concentración de antígeno o
anticuerpo presente. La marca puede aplicarse durante la
fabricación del reactivo tanto al anticuerpo (Ab*), como al
antígeno (Ag*).

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 Competitivo
2
• Competitivo: el analito sin marcar (generalmente antígeno) en
la muestra se mide por su capacidad para competir con un
antígeno marcado en el inmunoensayo ( reactivo). El
antígeno sin marcar bloquea la capacidad del antígeno
marcado de unirse puesto que ese punto de unión en el
anticuerpo ya se encuentra ocupado.

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 No competitivo (Sandwich)
2
• No Competitivo. la medición del analito marcado,
generalmente un anticuerpo, es directamente proporcional a
la concentración de antígeno presente en la muestra.

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 Funcionamiento práctico
3

Funcionamiento práctico

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 Modos de análisis
4
Método de un paso
y una dispersión

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 Modos de análisis
4
Método de dos pasos
y una dispersión

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 Modos de análisis
4
Método de dos pasos
y dos dispersiones

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 Modos de análisis
4
Pruebas en el equipo
Assay Method Procedure Sample consumption(uL)
CA125 Sandwich One-step, one-separation 10
t-PSA Sandwich One-step, one-separation 15
FPSA Sandwich One-step, one-separation 10
AFP Sandwich One-step, one-separation 15
FERR Sandwich One-step, one-separation 15
FSH Sandwich One-step, one-separation 25
PRL Sandwich One-step, one-separation 10
E3 Competitive One-step, one-separation 20
PROG Competitive One-step, one-separation 25
LH Sandwich Two-step, two-separation 15
TESTO Competitive One-step, one-separation 20 test table
E2 Competitive Two-step, one-separation 35
T4 Competitive Two-step, one-separation 30
FT3 Competitive One-step, one-separation 30
FT4 Competitive Two-step, one-separation 15
T3 Competitive Two-step, one-separation 50
Total βHCG Sandwich Two-step, two-separation 10

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Gracias!

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