APLICACIÓN DE MEDIDAS DE

ASEPSIA, ESTERILIZACIÓN Y
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE
CULTIVO

Departamento de bacteriología
Docente. Carlos Galeano
María José Herrera Ariza
Tabla de contenido
Definición
 Consistencia de los medio de cultivo
Origen de los medios de cultivo
Importancia al preparar medios de cultivo deshidratados
Control de calidad en la esterilización:
1. Control químico
2. Control biológico
3. Control por lote
¿Qué es un medio de cultivo?
• Sustrato en donde las bacterias
encuentran los nutrientes Medio líquido
necesarios para su desarrollo.
• Su crecimiento se evidencia con la
formación de colonias en los Medio sólido
medios de cultivo sólido, y en los
medios líquidos se evidencia por la
presencia de turbidez, nata o
precipitado.
Consistencia de los medios de cultivo
El agar es un galactano formado por • Semisólidos. Un medio semisólido
moléculas de galactosa y resistente a la tiene 0,5% de agar.
acción degradativa de la mayoría de las
bacterias
Medio SIM
• Sólidos. Un medio sólido tiene de 1.5-
2% de agar
• Liquido. No tiene Agar

Agar manitol sal

Caldo
Selenito
Origen de los medios de cultivo
Los medios de cultivo pueden ser de origen naturales o sintéticos.

 Medios de cultivos naturales. Se preparan

 Medios de cultivo Sintéticos. Se preparan a
a partir de sustancias naturales como: partir de productos comerciales deshidratados
• Leche desnatada y solo se les agrega agua en las cantidades
• Arroz indicadas en la etiqueta.
• Yema de huevo

Agar Leche
desnatada
Importancia de los medios de cultivo
deshidratados
• Leer las instrucciones de la etiqueta: se debe tener en cuenta las características del medio que se
va preparar (liquido, semisólido o sólido) ya que esto determina en qué recipiente se deben servir
(tubos o cajas de Petri), También se debe tener en cuenta si es necesario o no calentar el medio
para disolverlo debe guardar una relación.
Control de calidad de la esterilización de
medios de cultivos preparados
Una vez los medios de cultivo han sido preparados deben ser llevados al autoclave para el proceso
de esterilización bajo estrictas condiciones de:
• Temperatura: 121°C
• Presión: 15 libras
• Tiempo: 15-20 minutos

Autoclave
• Control químico. El control de calidad de la esterilización usualmente se realiza de forma
Química (cinta termosensible), si el proceso de esterilización en el autoclave fue el adecuado la
cinta tendrá el siguiente cambio de color:

Cinta termosensible
Cinta termosensible después de una
antes del autoclave correcta esterilización
en el autoclave
• Control biológico. Los indicadores biológicos en este caso puede ser cualquier
microrganismo preferiblemente de un riesgo bajo como la bacteria grampositiva
geobacillusstereothermophilus, para determinar que el autoclave ha esterilizado correctamente,
en el caso de esta bacteria se debe observar lo siguiente:

Destruyó a los
microorganismos,
luego de 24h

Antes del Después

autoclave del No destruyó a los
autoclav microrganismos,
e luego de 24h
• Control por lote. Este método es solo para cultivos solidos, luego de ser puesto en las cajas
de Petri se lleva el 1% de las cajas de agar preparadas y si hay crecimiento de microorganismos,
quiere decir que el proceso de esterilización no fue el correcto los resultados pueden ser así:

Proceso de
esterilización
incorrecto

Proceso de
Se lleva el 1% de los
esterilización
cultivos sólidos a la
correcto
incubadora