ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MEDICA

LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

CURSO: MICROBIOLOGIA 2023 I

MEDIOS DE CULTIVO
Lic. Esther Valencia Bazalar
D.A. Microbiología Médica
evalenciab_af@unmsm.edu.pe

1
PLAN DE CLASE
• Definición
• Componentes
• Clasificación
• Preparación
• Control de esterilidad
• Control de calidad
• Almacenamiento
• Finalidad e importancia
Objetivos
El alumno al finalizar la clase podrá:
- Definir que es un medio de cultivo
- Conocer cuales son los componentes necesarios para el desarrollo
bacteriano.
- Clasificar los medios de cultivo
- Seleccionar los medios de cultivo según las necesidades nutricionales
de la bacteria.
 Introducción e historia I
• Hacia 1800, los primeros
bacteriólogos cultivaban los
microorganismos en alimentos como
la patata, las claras de huevo
coaguladas y la carne.
• Angelina o Fanny Hesse y Walther
Hesse investigadores en
microbiología.
• Walther trabajaba de Koch:
contaminación del aire.
• Angelina es quien por primera vez
utiliza el Agar agar como gelificante
• Koch publica en 1882 el resultado del
medio de cultivo sólido
 Introducción e historia II

• Louis Pasteur: “vida microbiana no era

producto de la generación espontánea,
sino que los microorganismos se podían
multiplicar
• Crea el primer medio de cultivo “caldo
carne”
• Compara los medios preparados cuando
los sometía a ciertas condiciones.
• Aporte en el desarrollo de
microorganismos
• También crea el aplica el medio sólido:
papa ó gelatina
• Agar -agar
 Introducción e historia III

• Julius Richard Petri, médico y

microbiólogo 1877
• Crea el ambiente para el medio
de cultivo
• Ambiente que permiten el paso
del oxigeno
 Definición

• Un medio de cultivo es un conjunto de

componentes (sustratos) , incluido el
agua, que en concentraciones
adecuadas crean las condiciones
necesarias para el desarrollo de los
microorganismos
• Uso para microorganismos en general:
bacterias, hongos e incluso parásitos
 Componentes

• Composición diferente, pero

esencial.
• Nutrientes específicos
• Sustancias químicas específicas
que ayuden a revelar la vía
metabólica
• Buffers para mantener ph
• Carbohidratos
• Indicadores
• Inhibidores
Componentes: esenciales - Macronutrientes
Componentes: esenciales - Micronutrientes
Componentes: Factores de crecimiento
Componentes: comunes y especiales
 Clasificación

Según su consistencia
• Líquidos: no contienen agar-agar. El
crecimiento se evidencia por la
turbidez
• Sólidos: contienen entre 1,5 a 2% de
agar-agar. La superficie que resiste el
fino desplazamiento del asa de
platino, sin que este se rompa.
• Semisólidos: 0,5% aproximadamente
de agar-agar, intermedio entre el
líquido y el sólido.
• Bifásicos: se preparan de tal manera
que existe una fase sólida y sobre este
un medio líquido.
 Clasificación
Según su composición (origen)
• Medios de cultivo naturales: tomadas
directamente de la naturaleza para cultivar
bacterias Ejemplo, leche, jugos, sangre
diluida, suero, etc.
• Medios de cultivo sintéticos: más utilizados
hoy en día, son los medios deshidratados han
sido diseñados estratégicamente de acuerdo
al tipo de microorganismo que se busca aislar.
• Medios de cultivo semisintéticos:
combinación de un medio sintético al cual se
le añade un elemento natural para enriquecer
el medio.
• Medios de cultivo celulares: Son medios
especiales para el cultivo de virus. Ejemplo:
los cultivos celulares de riñón de mono o los
huevos embrionados.
 Clasificación

Según su utilidad:
- Básicos
- Nutritivos
- Selectivos
- Diferenciales
- De transporte
- De enriquecimiento
- Mantenimiento
- Pruebas de susceptibilidad
- Especiales
 Medios de cultivo simples nutritivos

• Contienen sustancias nutritivas, como

aminoácidos, nitrógeno y carbono.
(extracto de carne o extracto de
levadura, almidón de maíz, digerido
pancreático, peptonas, glucosa, entre
otros)
• Equilibrio osmótico: pH 7,0. (cloruro
de sodio, fosfato disódico)
• Diluyente: agua
• Recuperar el microorganismo, no
discrimina.
• Microorganismo no exigentes
 Medios de cultivo enriquecidos

• Medio base + sangre o calentar

con sangre calentada (agar
sangre y agar chocolate
respectivamente).
• Suero – Suero fetal bovino
• Útil para sembrar muestras que
normalmente son estériles
• Bacterias exigentes al desarrollo
• Rescatar cepas que se
encuentran débiles
 Medios de cultivo selectivos

• Contienen nutrientes + sustancias

inhibidoras (antibióticos, anti
fúngicos, colorantes, sales biliares)
• Las sustancias inhibidoras: reducen
los géneros de bacterias que puedan
desarrollar favoreciendo el
crecimiento de un grupo especial que
se quiere aislar e identificar
• Ejemplo: caldo EC (especial para
coliformes totales y fecales), agar
Sabouraud con antibióticos (específico
para hongos) Agar MacConkey
(enterobacterias) Agar SS (Salmonella
y Shigella), Agar TCBS (Vibrios) Agar
manitol Salado (Staphylococcus)
 Medios selectivos y diferenciales

• Es selectivo ya que permite

únicamente el crecimiento de
un género de bacterias
• Diferencial: se puede distinguir
las bacterias que utilizan un
sustrato o no y se evidencia por
un indicador
 Medios de cultivo diferenciales o con fines de identificación

• Contienen elementos nutricionales +

sustancias que en presencia de ciertos
microorganismos serán metabolizados o
degradados.
• Producirán reacciones químicas
• Algunas reacciones alcalinizan o acidifican
el medio y gracias a la presencia de un
indicador de pH,
• Se podrá distinguir las bacterias por el
metabolismo o degradación de sustancias
• Ej: TSI (Triple Sugar Iron Agar), LIA (Lisina
Hierro, Agar), SIM (sulfuro, indol,
motilidad), Citrato, MIO (Motilidad – Indol –
Ornitina), Urea, MRVP (Rojo de Metilo –
Voges Proskauer)
 Medios cultivo de enriquecimiento

• Estos medios de cultivo son

líquidos.
• Permite rescatar o permitir el
crecimiento de un patógenos
presente en una muestra que tiene
un número muy bajo de estos
microorganismos.
• Ej: agua peptonada, caldo
thioglicolato y caldo selenito.
• Estos medios tienen sustancias
inhibidoras que evitan el
crecimiento de la microbiota
acompañante
 Medios de cultivo para mantenimiento

• Permiten mantener en un mayor

tiempo la viabilidad de la
bacteria u hongo y además que
se preserven sus funciones
fisiológicas.
• No debe contener glucosa
• Mantener cepas para controles
internos o para fines docentes.
• Ej: CTA (Cystine Tryptic Agar)
Caldo BHI+glicerol (-20°C) Skin
Milk
 Medios de cultivo para prueba de susceptibilidad

• El medio estandarizado para tal fin

es el agar Müeller Hinton: mide la
sensibilidad del antibiótico frente
al microorganismo.
• Es especialmente útil en bacterias
poco exigente, mientras que en
bacterias exigentes solo se puede
utilizar si este es suplementado con
sangre.
 Medios de cultivo de transporte

• Medio para transportar muestras

que han sido tomada en un lugar
más o menos lejano al laboratorio.
• Conserva la muestra en las mejores
condiciones
• La población bacteriana presente
en la muestra se debe mantener
viable.
• Son medios semisólidos:
hidratación.
• Ejemplos de medios de transporte:
medio Stuart, Cary Blair y Amies.
 Medios de cultivo especiales: Cromogénicos

• MCC se utilizan para la diferenciación o

selección de muchos microorganismos de
importancia clínica e industrial, al utilizar
sustratos cromogénicos dando como
resultado producción de color
• Ej: medio selectivo cromogénico para
carbapenemasas o Staphylococcus aureus
resistente a meticilina (SARM). no
selectivo cromogénico usado para
urocultivos, permite el aislamiento de
uropatógenos, CROMOAgar Candida
• Menor tiempo de resultado y en el
proceso
P
R
E
P
A
R
A
C
I
O
N
 Control de esterilidad
• Los medios de cultivo se
esterilizan en el autoclave:
estériles
• Una vez dispensados controlar
en estufa de 37°C por 48 h un
5% de placas o tubos etc.
• Emplear cepas ATCC (American
Type Culture Collection)
 Control de calidad
• En cada laboratorio debe haber un
departamento que aplique protocolos de
control de calidad a los medios, cada vez que
se preparan lotes nuevos, y así garantizar que
están debidamente preparados, estériles y
funcionales.
• Según el medio de cultivo las cepas deben ser
ATCC.
• Ej MacConkey: E.coli y Salmonella, AS:
hemólisis, Manitol Salado: S. aureus y
S.epidermidis, TSI: E.coli
 Almacenamiento de medios de cultivo

• Refrigeración 2 a 8°C
• Tiempo: 7 a 10 días
• Conservar la humedad
• En bolsas o recipientes
herméticamente cerrados
 Finalidad e importancia

• Recuperación, aislamiento y
mantenimiento de microorganismos
bacterianos y fúngicos
• Microbiología clínica, industrial,
ambiental, de alimento indispensables
los medios de cultivo
• Microbiología clínica: antibiograma.
• No pueden faltar en un laboratorio de
microbiología.
• Han permitido investigar diversos
aspectos, tanto de las bacterias como
de los hongos
 Desecho de los medios de cultivo

• Deben ser descartados de manera

que no contamine al medio
ambiente.
• Se decontamina en autoclave antes
de que sea desechado.
• Si el material es vidrio, se retira el
material de la cristalería y será
lavada, secada, esterilizada y
guardada para su posterior uso.
• En placas desechables estas se
decontaminan y posteriormente se
desechan en bolsas especiales.
BIBLIOGRAFIA
• https://www.hispanagar.com/es/como-surgio-el-primer-medio-de-cultivo-
con-agar
• https://www.lavozdegalicia.es/noticia/informacion/2013/05/30/julius-
richard-petri-creador-universos-
artificiales/00031369919926772586186.htm
• https://www.uib.cat/depart/dba/microbiologia/seminarios/1%20Medios%
20de%20cultivo.pdf
VIDEO
Preparación medios de cultivo - Microbiología
https://www.youtube.com/watch?v=VcqvgUsbZiY&ab_channel=Secci%C3%B
3ndeLaboratoriosyEquiposUDENAR