Preparación de diluciones seriadas,

recuento en placa, tubos múltiples de

fermentación, técnicas de siembra.

Integrantes: Daniela s. Navarro, Jean B. Macías

Yisell m. Castillo y Estefanía R. Castillo
Docente: Juan Carlos Prada
Universidad popular del cesar
Facultad de salud
Programa de MICROBIOLOGÍA
Nuestras practica a exponer fue realizada

Susana a. Sanz Cervera

 

Email: susana.sanz@unirioja.es
 Las diluciones en serie se utilizan para crear El recuento en placa es uno de los
disoluciones muy diluidas con precisión, Una dilución métodos más utilizados para determinar
en serie es la reducción progresiva, paso a paso, de cuál es el número de microorganismos
la concentración de una sustancia en disolución viables en un medio líquido

Muestra Preparación de
diluciones seriadas o Recuento en placa
sucesivas

Técnicas de siembra Tubos fermentación

Durham o NMP

El método más usual es la siembra por

Los tubos de Durham se utilizan en
estría sobre un medio de cultivo sólido
Microbiología para detectar la
adecuado dispuesto en una placa de
producción de gas por parte de los
Petri.
microorganismos.
 -Utilizaron agua
peptonada
-lechuga
En un bolsa ziploc
sobre una balanza y
se pesan 10 g de las
hojas de lechuga

Luego se tapa, se le

Muestra vierte los 90 ml de agua

peptonada y se cierra la
bolsa

Se comenzó a
homogenizar y triturar
las hojas de lechuga
dentro de la bolsa por 2
minutos
Ellos consideraron
utilizar 7 sucesiones
como lo representa la
imagen del medio

Con una pipeta se toma 1 ml

de la muestra homogenizada y
se continua sucesivamente
desde el tubo anterior

Teniendo claro que

cada tubo de ensayo
presenta 2 ml de agua
peptonada
Diluciones Cada tubo se
seriadas encuentra expresado
logarítmicamente
como las sucesiones
10-x

Con una micropipeta se
tomaron 0,2 ml y se continuo
haciendo una suave rotación
de 10 veces hacia la derecha y
10 veces a la izquierda
Por cada tubo con
diferentes
concentraciones se
realizo una siembra por
superficie
El paso anterior se hizo
en una cabina y con
acompañamiento de un
mechero butsen

Recuento Después de cada

en placa siembra se sella la
placa y se incuba a 35°-
37℃ por un periodo de
24 o 26 horas
Para el recuento se
procura utilizar aquellas
placas que contengan 30 y
300 colonias
Se debe tener en cuenta que la
practica realizada por la Dr.
Sandra utilizo esta técnica.
 Los tubos seriados los
que dieron positivo
fueron 3/7 es decir a
esos tres se le realizo
esta prueba

Se realiza a partir de
caldo bilis verde
brillante se tomo de
cada tubo 1 ml

Se introdujo al tubo
que presentaba el
caldo bilis ya con la
Tubos campana
fermentadores con
Los tubos positivos que dieron
campana de en esta técnica se inocularon en
Durham una caja de Petri, con un medio
diferencial selectivo como lo es
Agar MacConkey
Realizaron una simple siembra
por agotamiento de una sola
fracción, es decir una estría
en toda la placa

Este tipo de medio inhibe el

crecimiento de
microorganismos Gram +

Técnicas Presenta colonias aisladas

de bacterias que fermentan

de siembra lactosa, son rosadas y

pueden estar rodeadas de
una zona de precipitado
sales biliares debido a la
caída del pH
Realizaron un replique en medio EMB
para corroborar si se encontraban
presente la bacteria E. coli, Este medio
inhibe el crecimiento de bacterias Gram
positivas , posee visualizar si la bacteria
Gram - crece son o no fermentadoras de
lactosa

E. coli pueden exhibir un brillo verde

metálico característico debido a la
rápida fermentación de la lactosa.
 Visualización de resultados

Campo #2
Campo #1
Conclusión

Se encontró presencia de E. coli en un bajo porcentaje.

El grupo de coliformes ha sido siempre el principal
indicador de la calidad de agua o alimento, el numero
presente en la muestra se usa como criterio de
contaminación. Este tipo de alimento puede provocar
enfermedades gastrointestinales.
Referencias bibliográficas

Sanz S. (2011), “Practicas Basicas Microbiologicas”, Servicios de

publicaciones UNIROJA, Madrid (España), Vol 102, pag 20,22,33,85.
¡GRACIAS!