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A partir del cultivo de E.

coli,
después de 12 horas de Sembrar en superficie 10 µl Incubar por 24 horas a 37°C
incubación a 37°C realizar de agar BIH de las diluciones y realice recuentos.
diluciones seriadas con 500 10^-4 - 10^-8.
µl de hasta 10^-8.

Mezclar 2000 µl del Rotular para las 3


cultivo de E. coli con Distribuir la mezcla
temperaturas de -20°C, -
2000 µl del caldo BHI anterior en 3 eppendorf
7°C y temperatura
con glicerol al 50 % de 1500 µl.
(v/v) ambiente

Sembrar en la superficie 100


Realizar el recuento de las Descongelar rapidamente los µl de los cultivos de cada
cajas sembradas después del cultivos a las diferentes temperatura usando la
dilucion con los resultados
periodo de incubación temeparutas mas favorables de la
población inicial.
Obtener una muestra Bajo condiciones de
A parir del cultivo de utilizando la papeta estarilidad, depositar en
Streptomyces sp en agar pasteur invertida el tubo eppendorf,
ISP2. obteniendo un disco con taparlo y guardarlo en
el microorganismo refrigeración.

Bajo condiciones de esterilidad


Con ayuda de las perlas y una
en la caja que contiene el
aguja de disección desprender A partir de este tubo realizar
cultivo de Streptomyces sp y
las esporas y transferir esto diluciones decimales de 10-1 y
adicionar 10 ml de solución
nuevamente al tubo de 16x150 10-2.
salina al 0.85% con Tween 80 al
mm.
0.1% (v/v).

Realizar recuento en la camara


de Newbauer de la Realizar siembra de esporas
Sembrar en el centro de la caja
concentrada. Conservar está conservadas. Incubar por 24 h,
de e agar ISP2 el disco
suspensión en temperatura de 30°C. Observar si se recupera el
conservado en aceite mineral.
refrigeración. Posterior a la microorganismo.
refrigeración.

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