PRUEBAS BIOQUIMICAS

AGAR HIERRO DE KLIGLER (KIA) Y AGAR HIERRO TRIPLE AZCAR (TSI)

Diferenciacin de enterobacterias, en base a la fermentacin de Glucosa (0.1%), Lactosa (1%), Sacarosa (1%), la produccin de Gas a partir de glucosa y la de H2S que precipita como sulfuro frrico al reaccionar con el hierro. Cuando la fermentacin da lugar a la formacin de Bixido de Carbono, este puede ser observado mediante la produccin de gas. Produccin de H2S

FUNDAMENTO:

RESULTADOS
Pico rojo/fondo amarillo; K/A): Fermentador de glucosa. Pico cido/fondo cido; A/A: Fermentador de glucosa, lactosa y sacarosa. Pico Rojo/Rojo; K/K: No fermentador de azcares. Presencia de burbujas o ruptura del medio: m.o. productor de gas. Ennegrecimiento del medio: produccin de cido sulfhdrico.

RESULTADOS

AGAR DE HIERRO Y LISINA (LIA)

Utilizado para diferenciar m.o. especialmente Salmonella spp, basado en la descarboxilacin/desaminacin de la lisina y en produccin de H2S y gas. Descarboxilacin se lleva acabo en anaerobiosis. Desaminacin se lleva acabo en aerobiosis

FUNDAMENTO:

RESULTADOS
Descarboxilacin de la lisina: Prueba positiva: Pico violeta/fondo violeta (K/K) Prueba negativa: Pico violeta/fondo amarillo (K/A) Desaminacin de la lisina: Pico rojizo/fondo amarillo: Cepas del genero Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella sp. (R/A) Produccin de cido sulfhdrico: Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el lmite del pico y fondo)

MIO (MOVILIDAD, INDOL, ORNITINA)

Utilizado para la identificacin de enterobacterias. La descarboxilacin se produce en anaerobiosis, por lo que se lee en el fondo del tubo. Medio altamente nutritivo, debido a la presencia del extracto de levadura, peptona y tripteina.

RESULTADOS
Movilidad: Resultado positivo: Presencia de turbidez o crecimiento ms all de la lnea de la siembra. Descarboxilacin de la ornitina: Resultado positivo: Color prpura. Resultado negativo: Color amarillo. Prueba de Indol:

SIM (SULFHIDRICO, INDOL, MOVILIDAD)

Es usado en la diferenciacin e identificacin de enterobacterias.

FUNDAMENTO:

RESULTADOS
Cepas mviles: Producen turbidez en el medio. Cepas inmviles: El crecimiento se observa solo en la lnea de la siembra. Cepas H2S positivas: Ennegrecimiento a lo largo de la lnea de siembra o en todo el medio. Cepas H2S negativas: El medio permanece sin cambio de color. Cepas indol positivas: Desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovacs o Erlich. Cepas indol negativas: Sin cambio de color.

AGAR CITRATO DE SIMMONS

Diferenciacin de enterobacterias El desdoblamiento del citrato por las bacterias comprende una enzima denominada: Citritasa (citrato-oxalacetatoliasa) o citrato desmolasa/citrato permeasa. La enzima requiere un sustrato para su actividad y este es proporcionado por el magnesio o manganeso.

RESULTADOS

UREA
Medio utilizado para la identificacin de m.o. en base a la actividad de la enzima ureasa. En particular til para diferenciar Proteus spp del resto de las enterobacterias.

MALONATO