Laboratorio De Bioquímica

Tutora: Elsy Patricia Preciado

Estudiante: Fredy Andrés Duarte Diaz

Cod: 151030_12 (bioquímica)

Universidad Nacional Abierta Y A Distancia “UNAD”

Escuela De Ciencias De La Salud
2023
PRACTICA 1. Observar el video anexo con el fin de realizar el conocimiento previo para el
desarrollo de la actividad sobre el Reconocimiento de Materiales de Laboratorio y Normas
de Seguridad de Trabajo en el Laboratorio. Conocer las diferentes normas de seguridad,
extinción de incendios, reglamento de laboratorio y los sitios de disposición final de
residuos de laboratorio. MATERIAL DE LABORATORIO 1.1 El uso adecuado del laboratorio
de química está sujeto al conocimiento de materiales, equipos y reactivos que éste
contenga. Por tal motivo, es imprescindible que usted lea y ubique correctamente cada uno
de estos materiales en el simulador de programa “Chemix-Draw Lab”, accediendo mediante
el enlace que se encuentra en la Figura 1 (si presenta dificultades para cargar el simulador
debido al Plug-in de flash player, consultar el siguiente
enlace:https://www.java.com/es/download/help/enable_browser.xml):

Tome un pantallazo de los materiales de laboratorio solicitados para completar la Tabla 1 y

consulte el gráfico y uso de cada material de laboratorio identificado, se sugiere el siguiente
recurso:
CLASIFICACION IMAGEN NOMBRE USO
MATERIAL DE Vaso precipitado Transportar líquidos
VIDRIO a otros recipientes

Pipeta de 5ml Medir y transferir

líquidos

Matraz volumétrico Medir volúmenes de

forma aproximada, o
transvasar y recoger
líquidos.

Tubo de ensayo Para experimentos y

análisis a pequeña
escala

Probeta graduada Volumen de un

liquido
 Balón de destilación Calentar sustancias a
temperaturas altas

Cristalizador Evaporación de un
solvente

MATERIAL DE Pinza para tubo de Sujetar los tubos de

SOPORTE ensayo ensayo mientras se
usan

Trípode Estabilizar un objeto

Espátula Recoger elementos

en solido
 Soporte Vertical Fijar elementos de
instrumental

MATERIAL DE Mortero Mezclar sustancias

PORCELANA solidas

Cápsulas de Evapora el exceso de

porcelana solvente en una
muestra

EQUIPOS Centrífuga Separar mezcla de

líquido-solido
 Espectrofotómetro Generalmente se
usan para medir el
color en superficies
suaves o mate.

Baño de agua Incubar muestras de

agua a una
temperatura
constante

3.Consulte los pictogramas y complete el siguiente cuadro

PICTOGRAMA DEFINICION
Pictograma toxico

Pictograma explosivo

Pictograma toxico para el medio ambiente

Pictograma oxidante

Protección personal

Pictograma corrosivo
1.4 Realice un cuadro donde explique las categorías de identificación de extintores.

Clase A Para incendios donde están involucrados materiales combustibles, solidos

como madera, papel, caucho y algunos plásticos que requieren de efectos
térmicos del agua.
Clase B Para incendios de líquidos combustibles o inflamables, grasas de petróleo,
aceites, pintura de aceites, solventes, etc..
Clase C Para incendios donde hay equipos eléctricos.
Clase D Para incendios con metales combustibles como magnesio, titanio, sodio,
potasio, etc..
Clase K Se originan por medios de cocción como grasas, mantecas.

Figura 2. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO: MERCK: https://binged.it/3jtT64i (

a. Lea la Reglamentación Normas de Bioseguridad Laboratorios UNAD:

https://academia.unad.edu.co/laboratorios-normas-de-bioseguridad (Link
consultado el 15 de febrero de 2022) y de respuesta a las siguientes preguntas:
b. Enumere cuáles son las normas básicas de bioseguridad que se deben tener en
cuenta de acuerdo con los videos.
• No comer dentro de cabinas mientras se manipulan quimicos
• Usar elementos de protección
• Usar guantes, tapa bocas y bata
• Usar calzado adecuado

c. Describir cuáles son los equipos de protección colectiva para situaciones de

accidentes o emergencias que se observan el en video de prevención, indicando su
función.
 • Orden y limpieza
• Sistemas de ventilación
• Señalizaciones e indicativos
• Extintores de incendio

d. Menciones posibles riesgos que representan las diferentes sustancias químicas

para la salud.
• Aspiraciones
• Cáncer
• Problemas en la piel
• Problemas pulmonares por inhalación

PRACTICA 2.

a. Relacionar las pruebas bioquímicas descritas en el video y que fueron

desarrolladas, tanto para los aminoácidos como para las proteínas, realice un
cuadro donde escribe columnas de nombre de las pruebas, descripción breve del
procedimiento y explique la reacción química que ocurre con cada una de las
muestras y los reactivos.

PRUEBAS REACTIVOS PROCEDIMIENTO REACCIÓN

BIOQUÍMICAS
Biuret (sulfato de Tirosina 1% Para todas las Tras la reacción
cobre en medio Valina al 1% pruebas: se da un
básico) Rotular cada tubo complejo de
Leucina al 1% coordinación
de ensayo de la
Prolina al 1% muestra, se añade entre el Cu y las
Cascina al 2% ImL de las pares electrónicos
muestras a cada libre de nitrógeno
Gelatina al 2% del grupo amino
tubo
Biuret de la unión
peptídica. Son
Se prepara un necesarias al
tubo de ensayo menos dos
con agua destilada uniones para que
blanco. tenga lugar de
reacción.
 Se adiciona ImL de
reactivo biuret, se
agita y en 15min
se pueden
observar los
resultados y se
anotan teniendo
en cuenta que si la
reacción es
positiva tendrá
color morado.
Ninhidrina Ninhidrina al Añadir 7 gotas de Los aminoácidos
0,2% en agua solución ninhidrina interaccionan con
destilada al tubo de ensayo la Ninhidrina por
que contienen las los grupos a-
muestras a amino, pero no
Ácido nítrico ensayar, calentar con el N de los
los tubos en baño enlaces péptidos.
de agua a 100°C
durante 10min. Si
Concentrado aparece color
purpura se indica
en aminoácido, si
aparece color
amarillo indica
Agua destilada presencia de
prolina.
Millón (disolución Albumina al 1% Añadir de 5 a 6 Al reaccionar con
de nitrato Gelatina al 1% gotas de millón, a proteínas aparece
mercúrico en cada uno de los un color rojo
ácido nítrico) Gotas de millón tubos de ensayo debido a la
que contienen ImL formación de un
de cada muestra. complejo de
Mezclar y calentar coordinación por
los tubos en un la interacción de
balo de agua a los grupos
30°C hasta un fenólicos de
tono rojizo, la aminoácidos y el
reacción positiva catión mercúrico
aparece un color del reactivo.
rojizo.
Xantoproteica Ácido nítrico Se añade 1Ml de Los aminoácidos
concentrado 1mL ácido nítrico con grupos
concentrado en aromáticos se
cada uno de los nitran en
tubos de ensayo presencia de
que contienen las ácido nítrico
muestras, se concentrado.
calienta en un
baño de maría
hasta que de un
color amarillo. La
reacción positiva
es si aparece el
color amarillo para
prótidos que
contienen
aminoácidos con
anillos aomaticos.

b. Realice un cuadro donde identifique las pruebas que presentan un resultado

positivo, explique el cambio de coloración y justifique.

PRUEBA MUSTRA POSITIVA JUATIFICACION

Biuret Polina color purpura Tras la reacción se da la
formación del complejo de
coordinación entre Cu++
y los pares electrónicos
libres de los nitrógenos de
los grupos de amino de la
unión peptídica. Donde
son necesarias dos
uniones para su reacción.
Ninhidrina Prolina color purpura Los aminoácidos
interaccionan con la
Ninhidrina por los grupos
a- amino, pero no con el N
de los enlaces péptidos.
Millon Tirosina, valina, leucina,
metionina color rojizo
Xantoproteica Caseina color amarillo
Al reaccionar con
proteínas aparece un color
rojo debido a la formación
de un complejo de
coordinación por la
interacción de los grupos
fenólicos de aminoácidos y
el catión mercúrico del
reactivo.
Los aminoácidos con
grupos aromáticos se
nitran en presencia de
ácido nítrico concentrado.

c. Defina los siguientes términos con redacción clara: aminoácidos,

proteínas, análisis cualitativo y análisis cuantitativo.

Aminoácidos: Grupo de moléculas orgánicas que consta de un grupo amino

básico (-NH2), un grupo de ácido carboxílico (-COOH) y el grupo orgánico R o
cadena lateral características de cada aminoácido. El término aminoácido es
una abreviatura de ácido α-amino[alfa-amino]carboxílico. Cada molécula
tiene un átomo de carbono central (C), llamado carbono α, al que están
unidos un grupo amino y un grupo carboxilo. Los dos enlaces restantes del
átomo de carbono suelen estar transportados por átomos de hidrógeno (H) y
grupos R.

Proteínas: Son macromoléculas formadas por una secuencia lineal de

aminoácidos, mientras que las proteínas están formadas por aminoácidos, y
esta secuencia está determinada por la secuencia de nucleótidos del gen
correspondiente, llamado gen estructural. La información genética determina
qué proteínas están presentes en las células, tejidos y organismos.

Análisis cualitativo: El objetivo es centrarse en la calidad cualitativa

revelando las características de los objetos.

Análisis cuantitativo: Se trata de estudiar experimentalmente la cantidad

de una sustancia presente en una muestra o involucrada en una reacción, así
como determinar sus propiedades.
PRACTICA 3.

3.1 Con base en el experimento y el video explicativo proporcionado, responda:

a. Indique lo que ocurre con la mezcla de aceite – Sudán III y agua – Sudán III.
Explique a qué se debe la diferencia entre ambos resultados.

Al mezclar el aceite con el sudan III, se produce una reacción formándose

pequeñas burbujas que se tiñen de color rojizo naranja.
Al mezclar Agua con sudan III, la mezcla se observa homogénea sin ningún
cambio notorio y mantiene el color rojizo.
Se observan diferentes resultados debido a que el sudan III es insoluble en el
agua, en caso contrario es soluble en las grasas por este motivo al entrar
en contacto con el aceite tiñe toda la mezcla.

b. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos

minutos de reposo?

Al agregar aceite a cierta cantidad de agua podemos observar que

este
permanece en la superficie del agua, después de ejercer tratamiento mecánico
ambas mezclas se unen y al dejar en reposo se empieza a ver que las burbujas
de aceite se reunifican en a la superficie del agua.

c. ¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las diferencias

observadas entre ambas emulsiones?

Podemos observar que al combinar un aceite vegetal o grasa animal con un

álcali, esto produce una reacción que permite obtener jabón y glicerol en forma
libre.
En el caso de esta emulsión estamos agregando un álcali que es el que genera
la reacción que nos lleva al jabón, en la anterior solo se emulsiona agua y
aceite.

d. ¿Qué ocurre con la emulsión cuando se le añade detergente?

El jabón se precipita quedando suspendida la emulsión.

 METODO DE SAPONIFICACIÓN.
Se analizará el método de saponificación mediante registro fotográfico de un
grupo de estudiantes de la UNAD que desarrolló el siguiente protocolo.

3.2 Para el procedimiento adicionaron a un tubo de ensayo 2mL de aceite vegetal y

2mL de una solución de hidróxido de sodio (NaOH) al 20%, agitaron vigorosamente
y llevaron a incubación en baño maría durante30 minutos a 37°C, una vez
terminado el tiempo de incubación el resultado obtenido fue el que se muestra a
continuación en la Figura 7.

3.5 Observe y resuelva.

a. ¿Qué tipo de reacción química ocurre con los lípidos cuando se realiza el
proceso de saponificación?
Jabón, sal, acido y glicerol en forma libre

b. Identifique las tres fases hidróxido de sodio, aceite y lípido saponificado en la

imagen (se deben señalar en un dibujo o imagen) resultado del proceso de
saponificación.

ACEITE

JABON

GLICERINA

c. ¿Qué son los jabones? ¿Cómo se pueden obtener los jabones?

Los jabones son compuestos químicos que se obtienen cuando se hace

reaccionar un ácido graso, como el aceite vegetal o grasa animal con un álcali
como el hidróxido de sodio.
Se producen gracias a la reacción química de saponificación, combinando una
grasa o aceite y una base como hidróxido de sodio, lo cual da como resultado
el jabón y glicerol.
 d. ¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?

Debido a las grasas que se utilizan en el proceso de saponificación, estas

grasas están compuestas de ácidos grasos y glicerol. Como resultado se
obtiene una fase semisólida, es decir, las sales de sodio de los ácidos grasos
(jabón), por lo tanto, el alcohol (glicerol) quedará en la fase acuosa como
subproducto de la elaboración del jabón, ya que es parcialmente soluble en
agua.

e. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?

La lipasa gástrica en el estómago y en el intestino delgado la lipasa

pancreática-colipasa.
Conocimientos previos para el desarrollo de la actividad sobre Factores físicos y
químicos en la actividad enzimática, revisar video anexo.

ACTIVIDAD ENZIMATICA Y SU UTILIZACION CLINICA.

4.1 Ingresar al simulador de ensayo de actividad enzimática, mediante el enlace de la

Figura 8.
4.2 Antes de iniciar el desarrollo de la práctica da clic en el fundamento del ensayo.
Figura 9, parte inferior derecha de la pantalla (recuadro rosado en la imagen).

Figura 8. Simulador de ensayo de actividad enzimática disponible en línea

http://biomodel.uah.es/lab/abs/activ_enz.htm

Figura 9. Simulador de ensayo de actividad enzimática disponible en

 http://biomodel.uah.es/lab/abs/activ_enz.htm

4.3 Construya una tabla en Excel o en un libro de notas como la tabla que se observa
en la parte derecha del simulador, si desea puede utilizar esta tabla e ir agregando
filas durante la simulación del experimento.
4.4 Seleccionar 3 temperaturas en un rango de 30◦C a 80◦C y seleccionar 3 pH en el
rango de 3 a 11, en lo posible buscar que tanto las temperaturas como los pH tengan
representantes en toda la amplitud de los rangos. Para seleccionar el pH o la
temperatura debe desplazar los controles hacia arriba o hacia abajo.
4.5 Construir una tabla donde realice las combinaciones de cada temperatura con cada
pH como se indica en la tabla 1. Al final deberá tener 9 combinaciones entre las
dos condiciones a evaluar (reemplace las temperaturas 1 a 3 y pH 1 a 3
seleccionados por usted en el punto 1), y registre la absorbancia obtenida al realizar
la simulación.

Tabla 1. Temperatura y pH evaluados sobre la actividad enzimática

COMBINACION TEMPERATURA pH ABSORBANCIA

N A pH 1
1 30 3 0,003
2 30 7 0,035
3 30 10 0,2
4 50 3 0,016
5 50 7 0,164
6 50 10 0,007
7 80 3 0,061
8 80 7 0,639
9 80 10 0,029

4.6 Con cada una de las combinaciones realizar la simulación siguiendo los 4pasos que
le indica el simulador.
4.7 Registre en la tabla después de cada simulación el valor de la absorbancia obtenido
en la pantalla del espectrofotómetro en la casilla de la combinación
correspondiente.
4.8 Una vez realizados todos los ensayos simulados grafique la absorbancia en función
de la temperatura o del pH.
4.9 A partir de estas gráficas determine la temperatura y el pH óptimo parala actividad
de la enzima 6-O-α-L-ramnosil-D-glucosidasa, justifique la respuesta.
PRACTICA No. 5

Conocimientos previos para el desarrollo de la actividad sobre Cuantificación de

proteínas, revisar video anexo.

CUANTIFICACION DE PROTEINAS

Se realizará un reconocimiento donde se explica los fundamentos de la cuantificación

de proteínas, accediendo al enlace de la Figura 10.

Figura 10. Cuantificación de proteínas Peñaranda L. 2020. Link:

https://youtu.be/NH7BBGUXqos

Comprobación de la cuantificación de Proteínas

5.1 Visualizar el siguiente video donde se explican las instrucciones para

poderacceder al simulador. Figura 11.

Figura 11. Explicación del funcionamiento de simulador. Bioquímica UNAD. 2020.

Práctica 5. Disponible en el link: https://youtu.be/sTdNFBhE9eA.

5.2 La cuantificación de proteínas se realizará empleando el simulador de

espectrofotometría UV-VIS de Biomodel, al que se podrá acceder en Figura 12
 Figura 12. Simulador de espectrofotómetro UV-VIS disponible en línea
http://biomodel.uah.es/lab/abs/espectro.htm

5.3 Leer atentamente las instrucciones y proceder a realizar las Actividades,

siguiendopaso a paso las instrucciones dadas por el simulador: Actividad 1.
Relación entre absorbancia y concentración:
Se desarrolla hasta la gráfica del análisis cuantitativo.
Actividad 2 y 2A. Fundamento de un ensayo de cuantificación de proteínas: Se
desarrolla hasta la gráfica del análisis cuantitativo.
Actividad Hb1. Espectro de absorción de la hemoglobina: Se desarrolla
completa. Espectro de absorción de las diversas formas redox de la hemoglobina:
Se desarrolla completa.

Nota: Recuerde tomar capturas de los datos y espectros en cada fase del proceso
en cada actividad.

ANALISIS DE RESULTADOS.

• Responder los interrogantes que encuentra en cada actividad en los ítems Análisis
cualitativo de resultados y Análisis cuantitativo de resultados. Consignar su
respuesta en el informe de la práctica.

PRACTICA 6.
EVALUACION FINAL COMPONENTE PRACTICO

Se evaluará la capacidad de comprensión y entendimiento de las propiedades

estructurales y químicas de los aminoácidos, proteínas, lípidos y acción enzimática a
partir de las prácticas realizadas de manera simulada donde se describe su
comportamiento.

Para la presentación de la evaluación el tutor encargado del componente práctico le

suministrará el link del cuestionario para desarrollar de acuerdo a las fechas estipuladas
por la red de curso. Dicho enlace se le hace llegar por medio del correo institucional.

Para el desarrollo de la actividad tenga en cuenta que:

En el entorno de Información inicial debe:

• Revisar el cronograma dispuesto en el OIL para los encuentros sincrónicos para

la explicación de las prácticas.
• Tener clara la fecha de entrega del informe que suministra el tutor encargado.
• Tener presente la programación vía Teams para aclarar dudas de manera
asincrónica.

En el entorno de Aprendizaje debe:

• Abordar las referencias bibliográficas dispuestas en las unidades del curso para
ser estudiadas.
• Realizar lectura consciente y detallada de la guía de actividades, junto con la
rúbrica de evaluación, para garantizar el cumplimiento de cada uno de los
aspectos.

En el entorno de Evaluación debe:

• Entregar el trabajo individual con los resultados obtenidos en un solo documento
con todas las actividades del componente simulado.

Evidencias de trabajo independiente:

Las evidencias de trabajo independiente para entregar son:
Trabajo individual en un documento consolidando todas las actividades del componente.

Evidencias de trabajo grupal:

En esta actividad no se requieren evidencias de trabajo grupal son:

f. Lineamientos generales para la elaboración de las evidencias

Para evidencias elaboradas de forma Independiente, tenga en cuenta las

siguientes orientaciones:
 1. La actividad es individual, por lo tanto, no puede tomar información de otro
integrante del grupo.
2. Revise la guía de actividades de manera concienzuda de tal forma que
comprenda de forma clara lo solicitado para el desarrollo de esta.
3. Reúna todos los insumos requeridos para el adecuado desarrollo de la
actividad.
4. Antes de entregar el producto solicitado deben revisar que cumpla con todos
los requerimientos que se señalaron en esta guía de actividades.
5. Hacer la entrega del documento final por el entorno de evaluación.
6. El archivo se debe nombrar como: Código del curso_Primer nombre-Primer
apellido_Fase 4. Por ejemplo: 151030_Juan-González_Fase 4.

Tenga en cuenta que todos los productos escritos individuales o grupales deben
cumplir con las normas de ortografía y con las condiciones de presentación que se
hayan definido.
En cuanto al uso de referencias considere que el producto de esta actividad debe
cumplir con las normas APA
En cualquier caso, cumpla con las normas de referenciación y evite el plagio
académico, para ello puede apoyarse revisando sus productos escritos mediante la
herramienta Turnitin que encuentra en el campus virtual.

Considere que En el acuerdo 029 del 13 de diciembre de 2013, artículo 99, se

considera como faltas que atentan contra el orden académico, entre otras, las
siguientes: literal e) “El plagiar, es decir, presentar como de su propia autoría la
totalidad o parte de una obra, trabajo, documento o invención realizado por otra
persona. Implica también el uso de citas o referencias faltas, o proponer citad donde
no haya coincidencia entre ella y la referencia” y liberal f) “El reproducir, o copiar con
fines de lucro, materiales educativos o resultados de productos de investigación, que
cuentan con derechos intelectuales reservados para la Universidad.”

Las sanciones académicas a las que se enfrentará el estudiante son las siguientes:
a) En los casos de fraude académico demostrado en el trabajo académico o
evaluación respectiva, la calificación que se impondrá será de cero puntos sin perjuicio
de la sanción disciplinaria correspondiente.
b) En los casos relacionados con plagio demostrado en el trabajo académico
cualquiera sea su naturaleza, la calificación que se impondrá será de cero puntos, sin
perjuicio de la sanción disciplinaria correspondiente.