Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.

com

DESARROLLO Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA 2021,

VOL. 26, núm. 7, 740‒749
https://doi.org/10.1080/10837450.2021.1944204

ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN

Un estudio sobre la distribución y estabilidad de fármacos en la interfaz de una emulsión cargada

de escutelaria.

Mingxi Maa-, Shengxin Huanga-, Jiabi Zhuby Fei Xionga

aLaboratorio clave de Jiangsu para biomateriales y dispositivos, Facultad de Ciencias Biológicas e Ingeniería Médica, Universidad del Sureste, Nanjing, China;b
Instituto de Investigación Farmacéutica, Universidad Farmacéutica de China, Nanjing, China

ABSTRACTO HISTORIA DEL ARTÍCULO

Este trabajo estudia principalmente los comportamientos interfaciales de la escutelarina en una emulsión recientemente Recibido el 21 de enero de 2020

desarrollada y establece un modelo de distribución trifásico. Los resultados mostraron que la concentración de escutelarina Revisado el 14 de abril de 2021
Aceptado el 14 de junio de 2021
podría disminuir la tensión interfacial y la temperatura de transición de la fase cristalina gel-líquido de los fosfolípidos. Al
observar la micromorfología de la emulsión, se infiere que el fármaco existe en la interfaz de la emulsión. Se calculó la
PALABRAS CLAVE
distribución de fármacos en tres fases a diferente pH. Los resultados mostraron que cuando el pH estaba en el rango de 3,0 a
escutelarina; emulsión;
8,0, el contenido de escutelarina en la fase oleosa era inferior al 0,25%; cuando pH < 7,4, más del 88% de los fármacos modelo trifásico; interfaz
estaban en la interfaz; cuando el pH > 7,4, los fármacos se distribuyeron principalmente en la fase acuosa. Por tanto, el
comportamiento de las emulsiones (pH 6,0) in vitro e in vivo se compone principalmente del comportamiento de los
fármacos en la interfaz. El estudio anterior puede explicar algunas propiedades de las emulsiones después de cargar
escutelarina. Incluyendo la disminución del tamaño de partícula y la constante de estabilidad.Ke,el aumento del potencial
zeta y la disminución de la estabilidad química después de que el valor del pH aumentó.

1. Introducción
Escutelarina (Figura 1) se utiliza para tratar enfermedades
cardiovasculares y cerebrovasculares, reumatismo y para aliviar los
dolores de los pacientes. Es un componente activo extraído de toda
la planta de Erigeron breviscapus (Sun et al.2019). La inyección de
escutelarina utilizada en la clínica hoy en día tiene muchas
desventajas, como poca estabilidad, fácil hidrólisis, alta oxidabilidad
y rápida eliminación de la sangre (Lv et al.2008). Para superar estos
problemas, se desarrolló una emulsión intravenosa de escutelarina
(Xiong et al.2010).
Es bien sabido que una emulsión de aceite en agua (O/W) es una
mezcla heterogénea de dos líquidos inmiscibles; a menudo se utilizan
emulsionantes y otros aditivos para mejorar su estabilidad. Las
emulsiones se están utilizando ampliamente en la investigación clínica
debido a su buena estabilidad y su importante liberación sostenida (Gu et
al.2010). Para superar aún más las deficiencias de que la emulsión sea
fácilmente fagocitada por el sistema reticuloendotelial, prolongando el
tiempo de residencia de las emulsiones en la sangre y aumentando el
tiempo de acción del fármaco, los investigadores a menudo modifican la
interfaz de la emulsión. Por tanto, las propiedades interfaciales son muy
importantes para las emulsiones.
Tradicionalmente, la emulsión se considera un modelo de dos fases,
que se compone de una fase acuosa y una fase oleosa. La interfaz aceite-
agua es solo una barrera para evitar la combinación de gotas de
emulsión. La relación de distribución de aceite y agua en el sistema de
emulsión es el factor principal que afecta las propiedades químicas y la
toxicidad del fármaco, la estabilidad física de la emulsión y el
comportamiento de liberación del fármaco in vivo yin vitro.Él
En general, se cree que los fármacos con un alto coeficiente de partición
aceite-agua están presentes principalmente en la fase oleosa, lo que es
beneficioso para la estabilidad del fármaco y el sistema de emulsión. En
comparación con la infusión ordinaria, puede presentar un efecto de
liberación sostenida.in vitro, y después de ingresar al cuerpo, las
partículas son relativamente estables en las gotitas, por lo que pueden
llegar al sitio objetivo junto con las gotitas. Por otro lado, los fármacos
con un pequeño coeficiente de partición aceite-agua están presentes
principalmente en la fase acuosa. Cuando se liberan las drogas.in vitro,Se
liberarán rápidamente de las gotas de emulsión al cuerpo después de una
gran cantidad de dilución de la sangre en condiciones de hundimiento,
cuya farmacocinética es casi la misma que la de las inyecciones
intravenosas (Kawakami et al.2000).
La escutellarina tiene un coeficiente de partición pequeño (P octanol/agua
< 0,004 cuando el pH es 6,21, Zhong et al.2005), pero muestra una propiedad
farmacocinética diferente a la de la inyección en el sistema de emulsión (Xiong
et al.2010). Para este tipo de fármaco, el coeficiente de partición y el modelo de
dos fases no pudieron reflejar con precisión su comportamiento de
distribución en los sistemas de emulsión. Las propiedades fisicoquímicas de
los medicamentos son importantes para el diseño de su administración.
sistema ery y el estudio de las propiedades lipófilas/hidrófilas de
medicamentos, que generalmente se expresan mediante el coeficiente de
partición. Aunque el coeficiente de partición se ha utilizado ampliamente, está
limitado debido a la interacción entre los fármacos y la monocapa y la capa
bimolecular de fosfolípidos en el diseño de prescripción y el sistema biológico,
y la capacidad del coeficiente de partición para simular la capa molecular de
fosfolípidos es insuficiente. Sin embargo, el estudio de las propiedades de la
interfaz del fármaco es útil para comprender la capacidad del fármaco para
formar una monocapa estable solo o junto con otros.

CONTACTOFei Xiong xiongfei@seu.edu.cn Laboratorio clave de Jiangsu para biomateriales y dispositivos, Facultad de Ciencias Biológicas e Ingeniería Médica,
Universidad del Sureste, Nanjing 210096, China
- Mingxi Ma y Shengxin Huang contribuyeron por igual y son primeros autores conjuntos.
Se puede acceder a datos complementarios para este artículo.aquí.

- 2021 Informa UK Limited, operando como Taylor & Francis Group


Figura 1.Estructura de la escutelarina.
sustancias (como los fosfolípidos polares) y las propiedades de la interfaz de
los fármacos están estrechamente relacionadas con el comportamiento de los
fármacos en emulsiones. La interacción entre el fármaco y la capa de
fosfolípidos es de gran importancia para las emulsiones que dependen de la
capa de fosfolípidos para mantener la estabilidad. También puede indicar la
interacción entre la membrana y el fármaco en el sistema biológico.
Debido a la importancia de las propiedades interfaciales del fármaco,
un modelo trifásico debería ser más apropiado que uno bifásico. El
modelo de tres fases fue establecido por Teagarden et al. (1988) y
estudiaron la distribución de la prostaglandina E1 (PGE1) en una
emulsión lipídica. Levy et al. (1994) observaron claramente mediante un
microscopio electrónico de grabado por congelación la capa de interfaz
entre la fase oleosa y la fase acuosa formada por fosfolípidos. Nord-en et
al. (2001) descubrieron que a través de la interacción con la interfaz de
fosfolípidos, el clometiazol, un fármaco con actividad superficial, puede
cambiar en gran medida las propiedades de la emulsión estable de
fosfolípidos. Klang et al. (2011) sugirieron que las propiedades de
liberación del medicamento y la microestructura de las gotas podrían
mejorarse añadiendo ciclodextrina a la película interfacial.
Basado en el estudio de las propiedades de la interfaz de la escutelarina,
este artículo establece un modelo de tres fases que consta de la fase oleosa, la
fase de la interfaz aceite-acuosa y la fase acuosa de la emulsión de escutelarina
para inyección intravenosa. El comportamiento de la interfaz de la emulsión de
escutelarina se estudió sistemáticamente a partir de teorías y experimentos. Se
han realizado intentos de aplicar la teoría de la interfaz para explicar algunos
fenómenos fisicoquímicos especiales de las emulsiones de escutelarina.
2. Material y métodos
2.1. Materiales
Scutellarin se compró a CTTQ PHARMA (Jiangsu, China); El aceite de soja
(para inyección) se compró a Tieling Beiya farmacéutica Oil Co., Ltd.
(Liaoning, China); La lecitina (para inyección) fue traída de Lipoid
(Alemania); El poloxámero 188 fue proporcionado por BASF (Alemania);
La glicerina fue traída de la Medicina Huahong (Wuxi, China); El metanol
(pureza cromatográfica) se trajo de Tedia, EE.UU.; El ácido acético glacial
(pureza analítica) se obtuvo de Nanjing Chemical Reagent Co., Ltd.
(Nanjing, China); El ácido oleico fue proporcionado por Shanghai Lingfeng
Chemical Reagent Co., Ltd. (ácido oleico); Triton X-100 fue traído de
Sigma; Agua destilada secundaria; Los demás reactivos son todos de
pureza analítica comercial.
2.2. Métodos
2.2.1. Preparación de emulsión de escutelarina.
Los procedimientos se llevaron a cabo como se informa en la referencia
(Xiong et al.2010). Utilizando este método, obtuvieron la emulsión con un
tamaño de partícula promedio de (225,3 ± 8,8) nm y un índice de
polidispersidad de 0,221 ± 0,02.
DESARROLLO Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA 741
Preparación de la fase oleosa: se dispersaron 12 g de lipoide en la
mezcla de 0,6 g de vitamina E (Vmi), 12 g de ácido oleico y 88 g de aceite de
soja, se calentaron a 80 C y luego se disolvió escutelarina mediante un
sonicador (B5200S-DT Sonicator, Branson Ultrasonics Co., Ltd., Shanghai,
China).
Preparación de la fase acuosa: disolver 20 g de poloxámero
188, 225 g de glicerina y 0,1 g de EDTA-2Na en agua para
inyección.
Preparación del calostro: mezclar la fase oleosa y la fase acuosa a
80 C y dispersarlas durante 60 s a 8000 rpm con un agitador de
velocidad constante (XHF-1, Shanghai Xinda biochemical instrument
Co., Ltd., China).
Preparación de la emulsión de escutelarina: el calostro se
homogeneizó mediante un homogeneizador de alta velocidad
(EmulsiAFlex-05, Avestin Inc., Canadá) a 2000 psi durante 20 ciclos, luego
se pasó a través de un tanque de 0,8yom, se ajustó a pH 6,0 con NaOH 0,1
M, se llenó con nitrógeno y se envasó. Finalmente, la emulsión se obtuvo
después de hervir a 100 C durante 30 min.
Se proporcionó una imagen de la muestra de emulsión de escutelarina en
Figura complementaria 1.
2.2.2. Las propiedades interfaciales de la escutelarina.
Se prepararon diferentes concentraciones de solución acuosa de
escutelarina y la tensión interfacial gas-líquido se midió mediante un
tensiómetro superficial DCAT 11 (DataPhysis Instruments GmbH,
Filderstadt) utilizando el método de Wilhelmy.
La interacción de la escutelarina con los fosfolípidos se ilustró mediante el
uso de calorímetro diferencial de barrido (Pyris, PE, EE. UU.) y difracción de
rayos X de ángulo pequeño (X'TRA, ARL, Suiza) para investigar la mezcla que
contiene el fármaco (fosfolípido: agua).¼6:4, fármaco al 1%, una pequeña
cantidad de etanol para ayudar a la disolución, p/p, requerido) y mezcla libre
de fármaco (mezcla de fosfolípidos en blanco). Los parámetros del análisis del
calorímetro diferencial de barrido (DSC) se presentaron de la siguiente manera:
se utilizó alúmina como control. La muestra se equilibró a 3 C hasta que la línea
base fue estable y luego se calentó. El rango de calentamiento fue de 5 a 60 C y
la velocidad de calentamiento fue de 5 C/min. Los parámetros de análisis de
difracción de rayos X de ángulo pequeño (SAXD) fueron los siguientes: CuKa-
rayo, filtro de Ni, la presión del tubo es de 40 kV, el flujo del tubo es de 100 mA,
la ranura de la primera etapa es de 0,08 mm, la ranura de la segunda etapa es
de 0,06 mm y la ranura de la tercera etapa se ajusta al estado óptimo. La
rendija de aceptación fue de 0,1 mm, la rendija antidispersión fue de 0,25 mm,
la velocidad de escaneo fue de 0,5 C/min y la constante de tiempo fue de 2 s.
Todas las muestras se midieron a temperatura ambiente.
2.2.3. Distribución de interfaz de escutelarina en emulsión.
La morfología de la interfaz de la emulsión se observó mediante
microscopía óptica (Leica, Heerbrugg, Suiza) y microscopía electrónica de
transmisión (H-7000, Hitachi, Japón). Una emulsión en blanco libre de
fosfolípidos (excepto que no se agregaron fosfolípidos ni escutelarina, el
método de preparación fue el mismo que el de Sección 2.2.1.), una
emulsión en blanco que contiene fosfolípidos (excepto que no se agregó
escutelarina, el método de preparación fue el mismo que enSección 2.2.1
.), y se prepararon y colocaron en un tubo capilar una emulsión que
contenía escutelarina (0,4 mg/ml), respectivamente. El extremo del
capilar se selló con una lámpara de alcohol y se congeló durante 24 h a 20
C y luego se descongeló a 40 C. Después de tres ciclos, se centrifugó a
10.000 rpm durante 10 min para romper completamente la emulsión y
forzarla a dividirse en tres capas. La morfología se observó al microscopio
óptico. Una emulsión en blanco (excepto que no se añadió escutelarina,
el método de preparación fue el mismo que el deSección 2.2.1), una
emulsión que contiene una cantidad excesiva del fármaco (se utilizaron
60 mg de escutelarina).
742 M. MA ET AL.
utilizado) y una suspensión de escutelarina (preparada añadiendo 20
mg de escutelarina en 100 ml de agua y sonicada), y se observó la
morfología de la interfaz mediante microscopía electrónica de
transmisión (TEM), después de teñirla con tinción negativa con ácido
fosfotúngstico.
La interacción de la escutelarina y la capa de fosfolípidos en la
emulsión se ilustró analizando la emulsión que contenía 0,4 mg/ml de
escutelarina y una emulsión en blanco con DSC de alta sensibilidad. Los
parámetros se presentaron de la siguiente manera: se usó hidracina de
aluminio con agua como control, la muestra se enfrió a 0 C a una
velocidad de 0,5 C/min, se mantuvo durante 10 min y luego se calentó a
50 C a 0,25 C/min.
2.2.4. Distribución trifásica
2.2.4.1.Determinación de la concentración de equilibrio de la fase acuosa
a diferentes pH mediante diálisis (Yamaguchiet al.1994).Se preparó una
emulsión que contenía 0,4 mg/ml de escutelarina a diferentes pH (3,0, 4,5,
6,0, 7,4 y 8,0) (otros pasos de preparación son los mismos que enSección
2.2.1.). 36 ml de tampón isotónico (que contiene 0,1‰Se colocó
EDTA-2Na) de pH 3,0, 4,5, 6,0, 7,4 y 8,0 en vasos de precipitados y se
añadieron 4 ml de la emulsión mencionada anteriormente al mismo pH
que el tampón. La emulsión se colocó en una bolsa de diálisis, se dejó en
el vaso de precipitados, se mantuvo a 37 °C y luego se agitó con una
solución tampón. 50yoSe tomó 1 l de la solución tampón en varios
momentos para determinar la concentración del fármaco mediante el
ensayo de HPLC de fase inversa (RP). Configuración del sistema
cromatográfico: está compuesto por una bomba de cromatografía líquida
de alto rendimiento Waters 510 y un detector ultravioleta de absorbancia
Waters 486 (Waters Corp., Milford, MA, EE. UU.). La longitud de onda del
detector se establece en 335 nm. El sistema HPLC está controlado por una
computadora que utiliza el software Millennium 2010 Chemstation. La
columna analítica es una columna Hypersil C18 de fase reversa (250 4,6
mm, 5yom tamaño de partícula; Dalian elite Analytical Instrument Co.,
Ltd., Dalian, China), que se mantiene en un horno de columna (timberline
instruments, empresa Boulder, EE. UU.). La fase móvil fue metanol: agua:
ácido acético glacial (40:60:1). Eluir a 40 C a un caudal de 1,0 ml/min. y 50
yoAl mismo tiempo se añadió 1 l de tampón 37 C. Cuando la
concentración permanece constante, la diálisis está equilibrada. En este
punto, la concentración del fármaco en la fase acuosa de la emulsión era
igual a la concentración de la solución fuera de la bolsa de diálisis.
2.2.4.2. Determinación del coeficiente de distribución de mezcla de aceite
y agua.Se pesaron con precisión aproximadamente 5 mg de escutelarina y
se disolvieron en un tampón isotónico (que contenía 0,1‰EDTA-2Na) a pH
3,0, 4,5, 6,0, 7,4 y 8,0 en un matraz aforado de 1000 ml. Se tomaron 10 ml
de cada solución y se mezclaron con aceite de soja que contenía ácido
oleico al 12 % (p/p, aceite mixto) a 37 C durante 24 h, luego se centrifugó
la mezcla a 3000 rpm durante 15 min para analizar el contenido del
fármaco en el capa acuosa mediante HPLC. Se calculó el coeficiente de
partición de la mezcla de aceite y agua en diferentes tampones de pH.
2.3. Aplicación de la teoría de la interfaz.
2.3.1. Impacto de la escutelarina en la interfaz sobre la estabilidad física
de la emulsión.
Preparación de emulsiones en blanco con diferentes ciclos de
homogeneización: no se agregaron fármacos a la fase oleosa y se
tomaron muestras en la 5.ª, 10.ª, 15.ª y 20.ª homogeneización
respectivamente. Las demás prescripciones y métodos de
preparación son los mismos que enSección 2.2.1.
Preparación de las emulsiones que contienen escutelarina 0,4 mg/ml
con diferentes ciclos de homogeneización: se tomaron muestras en la 5ª,
10ª, 15ª y 20ª homogeneización respectivamente. Las demás
prescripciones y métodos de preparación son los mismos que en Sección
2.2.1.
Preparación de emulsiones en blanco con diferentes pH: no se
agregaron fármacos y se ajustó el pH a 3,0, 4,5, 6,0, 7,4 y 8,0 con HCl 0,1 M
o NaOH 0,1 M, respectivamente. Las demás prescripciones y métodos de
preparación son los mismos que enSección 2.2.1.
Preparación de emulsiones que contienen fármaco de 0,1 mg/ml con
diferente pH: se agregaron 10 mg de escutelarina a la fase oleosa, se
homogeneizó y se ajustó el pH a 3,0, 4,5, 6,0, 7,4 y 8,0 con HCl 0,1 M o
NaOH 0,1 M, respectivamente. Las demás prescripciones y métodos de
preparación son los mismos que enSección 2.2.1.
Preparación de emulsiones que contienen 0,4 mg/ml de escutelarina
con diferente pH: se agregaron 40 mg de escutelarina a la fase oleosa, se
homogeneizó y se ajustó el pH a 3,0, 4,5, 6,0, 7,4 y 8,0 con HCl 0,1 M o
NaOH 0,1 M, respectivamente. Las demás prescripciones y métodos de
preparación son los mismos que enSección 2.2.1.
Medición del tamaño de partículas: Se tomaron las emulsiones en blanco y las
emulsiones que contenían 0,4 mg/ml de escutelarina con diferentes tiempos de
homogeneización para determinar los tamaños de partículas mediante
espectroscopia de correlación de fotones (MasterSizer 3000, Malvern Instruments
Co., Worcestershire, Reino Unido).
Medición del potencial zeta: Las emulsiones en blanco, las emulsiones
que contienen fármaco de 0,1 mg/ml y las emulsiones que contienen
fármaco de 0,4 mg/ml con diferentes pH se diluyeron 100 veces con una
solución acuosa de glicerol al 2,25 %, luego se filtraron a través de 0,8yom
membrana, respectivamente, y finalmente sus potenciales zeta se
midieron midiendo la movilidad electroforética (Malvern Zetasizer 3000,
Malvern Instruments Co., Worcestershire, Reino Unido).
Medición de la constante de estabilidad (Ke):Se centrifugaron 5 ml de
las emulsiones en blanco y 0,4 mg/ml de emulsiones que contenían
fármaco con diferentes valores de pH durante 15 minutos (4000 rpm),
respectivamente. Se tomaron 0,1 ml de la solución de la capa inferior de
cada muestra antes y después de la centrifugación y se diluyeron 100
veces con agua destilada respectivamente. Se utilizó agua destilada como
referencia y se midió su absorbancia a 500 nm mediante
espectrofotometría. Calcularon suKe,que son el cambio porcentual de
absorbancia antes y después de las centrifugaciones. la expresión deKe es
Ke¼ (A0 100%.A0es la absorbancia del diluyente
AUTOMÓVIL CLUB BRITÁNICO
0
antes de centrifugar la emulsión;Aes la absorbancia del diluyente
después de centrifugar la emulsión.
2.3.2. Impacto de la escutelarina iónica y no iónica en la sustancia química.
estabilidad de la emulsión
Preparación de emulsiones que contienen fármaco de 0,4 mg/ml sin
estabilizadores a diferentes pH: se añadieron 40 mg de escutelarina a la
fase oleosa, que fue Vmilibre, y la fase acuosa estaba libre de EDTA-2Na.
Luego se ajustó el pH a 3,0, 4,5, 6,0, 7,4 y 8,0 respectivamente con HCl 0,1
M o NaOH 0,1 M después de la homogeneización. Las demás
prescripciones y métodos de preparación son los mismos que en Sección
2.2.1.
Medición de la concentración de escutelarina: 0,4 mg/ml de
emulsiones que contienen fármaco sin estabilizador a diferentes valores
de pH se determinaron mediante RP-HPLC después de depositarse a 80 C
durante 1 h. Las muestras se disolvieron en etanol Triton X-100 al 10%
para desemulsificación. El sobrenadante de 20yoSe inyectaron en HPLC
muestras de emulsión de escutelarina que habían sido demulsificadas
para su determinación.

3. Resultados y discusión
3.1. Las propiedades interfaciales de la escutelarina.
El efecto de la escutelarina sobre la tensión interfacial gas-líquido se
muestra enFigura 2. Muestra que la escutelarina puede reducir la
tensión interfacial gas-líquido, y la tensión interfacial se puede
reducir en 8 mN/m en una concentración saturada, lo que indica que
la escutelarina es tensioactiva.
Suponiendo que la escutelarina es la única molécula presente
en la superficie del líquido, la cantidad de adsorciónCy el área
ocupada por molécula se puede calcular con la ecuación de Gibb.
La ecuación de Gibb es:
cdC
C¼
RT CC
R,T,C,yCrepresentan la constante molar del gas, la temperatura absoluta,
tensión superficial y concentración de fármacos, en particular. La
cantidad de adsorciónCLuego se puede estimar a partir de la parte lineal
deFigura 2 y el resultado es que el área ocupada por cada molécula de
fármaco en la superficie del líquido es 480 Å2(¼4.80 1014cm2/molécula).
En comparación con la mezcla de fosfolípidos sin fármaco, la
escutelarina ha reducido la temperatura de transición de la fase cristalina
gel-líquido del fosfolípido (figura 3), lo que indica que el fármaco puede
interactuar con el fosfolípido.
Figura 2.Tensión superficial en función de la concentración de escutelarina (% p/p) en agua bidestilada medida a 25 C (media ± DE,norte¼3). La línea discontinua representa los mínimos
cuadrados lineales ajustados a la Ecuación (1) de las cinco concentraciones más altas.
Figura 3.Termograma DSC de una mezcla de Lipoid E80/agua (6:4) que contiene 0% (a) y 1% (b) de escutelarina. Se muestran las temperaturas máximas.
DESARROLLO Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA 743
Los resultados de SAXD muestran que la relación del espaciado
interplanar de Bragg entre la difracción de primer orden y de alto
orden de la mezcla en blanco y el fosfolípido que contiene el fármaco
fue 1:1/2:1/3:1/4, lo que indica que los fosfolípidos , que contienen la
droga, todavía estaban dispuestos en estructuras laminares (Figura 4
). El valor d de la distancia de repetición ha disminuido, lo que indica
que la molécula de fosfolípido cambia de la L laminarbfase (gel) a la L
laminara(fase líquida (Figura 5). Esto se debe a que la cadena de
hidrocarburos en la LaLa fase se puede doblar libremente en zigzag y
llenar los "agujeros" en el centro de la bicapa de fosfolípidos, lo que
lleva a una disminución del espesor de la bicapa de fosfolípidos
(Zhang y Liu1987). Se puede inferir que el fármaco se mantuvo en el
lado de la bicapa de fosfolípidos que estaba más cerca
(1) a la interfaz, es decir, la región de la cabeza polar del fosfolípido
capa. Este tipo de comportamiento es similar a un n-alcanol con menos
de 10 átomos de carbono, o pequeñas moléculas anfifílicas como los
nalcanoles, que pueden estar presentes en la interfaz fosfolípido/agua
(Lohner1991). Dado que la longitud de estas moléculas pequeñas es
menor que la longitud de la cadena de hidrocarburos fosfolípidos, su
comportamiento en la interfaz da como resultado la generación de
agujeros en el centro de la bicapa de fosfolípidos. El llenado de estos
agujeros por la cadena de hidrocarburos podría conducir a una reducción
del paso repetido en la estructura en capas.
744 M. MA ET AL.
Figura 4.Patrones de difracción de rayos X de ángulo pequeño para fases laminares de Lipoid E80/agua (6:4) que contienen 0% (a) y 1% (b) de escutelarina. Las mediciones se registraron a
temperatura ambiente. Las cifras asociadas con cada pico representan el espaciado d en Å.
3.2. Distribución de interfaz de escutelarina en emulsión.
Se mostró la morfología de las tres fases demulsificadas de la
emulsión en blanco sin fosfolípidos, la emulsión en blanco con
fosfolípidos y la emulsión con escutelarina 0,4 mg/ml. Las imágenes
de microscopía óptica (Figura complementaria 2) mostraron que
después de la desemulsificación, la emulsión en blanco que no
contenía fosfolípidos tenía una interfaz clara entre aceite y agua y la
La capa de interfaz era delgada. La emulsión en blanco que contenía el
fosfolípido tenía una interfaz espesa de aceite-agua con color claro, y la
interfaz aceite-agua de la emulsión que contenía 0,4 mg/ml de
escutelarina no sólo era más espesa, sino también de color más oscuro.
Se añadió un exceso de escutelarina a la emulsión para poder
"amplificar" su presencia en la interfaz, ya que no se puede determinar la
distribución de la escutelarina disuelta en las tres fases.

Figura 5.El modelo de estructura de biomembrana en estado de cristal líquido. (a) Laminar Lbfase; (b) Laminar Lafase.
Figura 6.Imagen de microscopía electrónica de transmisión de una emulsión de placebo y una emulsión de escutelarina. (a) emulsión de placebo sin NaOH; (b) emulsión de escutelarina sin
NaOH; (c) emulsión de placebo con NaOH; (d) emulsión de escutelarina con NaOH.
observado por TEM. Luego se usó la forma de emulsión en blanco
correspondiente como muestra de control para estudiar las
características de la interfaz de la emulsión que contiene el fármaco.
La morfología de la suspensión de escutelarina por TEM son algunos
puntos negros (Figura complementaria 3), que apareció en la interfaz
entre la emulsión que contenía exceso de fármacos y la fase acuosa (
Figura 6(b,d)). En comparación con la emulsión de placebo (Figura
6(a,d)), la interfaz entre las gotas y la fase acuosa era muy clara,
rodeada por una capa de exceso de fármaco con o sin ajuste de pH.
Comparado conFigura 6(b), se acumuló menos escutelarina en la
interfaz y no se observó ningún fármaco en la fase acuosa. Porque la
mayoría de los fármacos en la fase acuosa y en la fase de interfaz se
disolvieron y no pudieron observarse mediante TEM.
El espectro DSC (Figura 7) indica que la emulsión en blanco tiene un
pico de transición de fase pronunciado cerca de 21 C, que es el pico de
fusión de la cadena del fosfolípido. Y la emulsión que contiene el fármaco
tiene un pico amplio alrededor de 20 C, lo que significa que el fármaco
redujo la temperatura de transición de la fase cristalina gel-líquido del
DESARROLLO Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA 745
fosfolípido. Aunque hay muchos factores que afectan la temperatura
de transición de fase del sistema multicomponente, los resultados
mencionados anteriormente podrían demostrar que la escutelarina
existe en la capa de fosfolípidos de las gotas.
3.3. Distribución trifásica
3.3.1. Verificación teórica de la capacidad de la interfaz para
llevar dosis recetadas de medicamentos
La proporción de fase oleosa en la formulación de 100 ml de emulsión: 10 % (p/p)
(10,8 %, v/v) (por ejemplo, el volumen de 10,0 g de aceite mezclado es 10,8 cm3); el
contenido de los medicamentos: 0,1‒0,4 mg/ml; el diámetro de cada gota de aceite
(tamaño de partícula): 197,1 ± 5,3 nm.
El área de superficie de cada gota de aceite esSd¼4pr2¼1.2 109
(cm2).
El volumen de cada gota de aceite esVd¼ (4/3) pr3¼4.0 1015
(cm2).
746 M. MA ET AL.

Figura 7.Mediciones de DSC de alta sensibilidad de una emulsión de placebo (a) y una emulsión que contiene 0,4 mg/ml de escutelarina (b). Se muestran las temperaturas máximas.

El número de gotas de aceite en 100 ml de emulsión esnorted¼Vtotal/Vd¼ Tabla 1.Parámetro característico del sistema de diálisis cuando se diluyó diez veces una
emulsión de escutelarina de 0,4 mg/ml a 37 C.
10,8 (cm)3)/4.0 1015(cm3)¼2.7 1015.
La superficie total esSt¼ (norted) (Sd)¼ (2.7 1015) (1,2 109)¼ Volumen (ml)

3.24 106(cm2). escutelarina total Emulsión Buffer Fase acuosa Fase de partículas
Según los datos de tensión interfacial y la ecuación de Gibb, el METROt(metrogramo) (ml) (ml) VW.(ml) VPAG(ml)

área de cada molécula de fármaco en la superficie del agua se 1600 4 36 39,49 0,51
calcula como 480 Å.2(¼4.80 1014cm2/molécula). Teóricamente, el
número total de moles que se pueden distribuir en la interfaz es
(3,24 106)/(4,80 1014) (6,02 1023) ¼1.12 104moles
Tabla 2.Concentración de equilibrio de dos fases y coeficientes de partición cuando
¼51,8 mg. la emulsión que contenía 0,4 mg/ml de escutelarina se diluyó diez veces a 37 C.
Una emulsión de 100 ml contiene entre 0,1 y 0,4 mg/ml de fármaco, con un
Fase de partículas Fase acuosa Partición partícula/agua
máximo de 40 mg de fármaco, que es una cantidad menor que la teórica. Por lo pH del tampón (metrogramos/ml) (metrogramos/ml)

tanto, el área de interfaz puede contener la dosis prescrita de medicamentos. 3.0 2296.89 10,85 211,69
4.5 2166.42 12.54 172,76
6.0 1258.23 24.27 51,84
7.4 256.03 37.21 6,88
8.0 162,34 38,42 4.23
3.3.2. Determinación del coeficiente de partición partícula/agua en
pH diferente
Se supone que el coeficiente de partición de la escutelarina en partículas
de emulsión que contienen una fase oleosa mixta y una interfaz es el
coeficiente de partición de una mezcla de aceite/agua medido
experimentalmente, entonces la cantidad de fármaco en la interfaz se
puede estimar calculando la cantidad total de fármaco en la emulsión. y
la cantidad de fármaco libre en la fase acuosa.
Basado en el artículo citado (Yamaguchi et al.1994) y las
características de la emulsión de escutelarina, se modificaron algunos
parámetros. En el artículo original, los volúmenes de las dos fases
petróleo-agua eran del 11% y del 89% descartando el volumen de la fase
interfacial. En este estudio, los volúmenes de aceite y agua se controlaron
al 10,8% y 87,3% a través del proceso de preparación y el volumen de la
fase interfacial es del 1,9% (¼100‒10,8‒87,3%), que se acerca más a la
situación real; en el artículo original, la fase oleosa de la preparación es
un aceite mixto, pero en el proceso de cálculo solo se incluyó el aceite de Figura 8.El coeficiente de partición de la mezcla aceite/agua a diferentes pH a 37 C.

soja. En este estudio se utiliza el coeficiente de partición de la mezcla

aceite-agua, que es más aplicable al sistema de emulsión que se va a
estudiar y los resultados son más precisos. La concentración de equilibrio
de las emulsiones a diferentes pH se midió mediante diálisis. Los
parámetros del sistema de diálisis se muestran en tabla 1.
Combinando los datos entabla 1Con la concentración del fármaco
medida en equilibrio, se puede calcular el coeficiente de partición de
partículas y agua a diferentes valores de pH (Tabla 2).
3.3.3. Determinación del coeficiente de partición de la mezcla aceite/agua a
diferentes pH
Como se muestra enFigura 8, el coeficiente de partición de la mezcla
aceite/agua se ve muy afectado por los valores de pH. Cuando el pH era 6,
el coeficiente de partición disminuyó significativamente con el aumento
del pH; cuando pH > 6, el coeficiente de partición cambió poco y se
mantuvo en un nivel bajo.
 DESARROLLO Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA 747

3.3.4. Distribución de escutelarina en tres fases.
A partir de la relación de volumen entre el agua y las partículas de la
emulsión (0,873:0,127) y los datos deTabla 2, se puede calcular la
distribución de escutelarina en esas dos fases a diferentes pH (Tabla
3).
La fase de partículas consta de la fase oleosa y la fase de interfaz.
Por lo tanto, la relación de concentración del fármaco en tres fases se
puede obtener midiendo la relación de concentración de la fase
particulada con respecto a la fase acuosa y el coeficiente de partición
de la fase oleosa y la fase acuosa. La distribución trifásica de
escutelarina en la emulsión se calculó a partir de los datos deTabla 2
yFigura 8. La concentración de escutelarina en la fase oleosa es
inferior al 0,25% en el rango de pH 3,0 a 8,0, que es extremadamente
baja; cuando el pH <7,4, el fármaco se distribuye principalmente en la
interfaz; cuando el pH > 7,4, se distribuye principalmente en la fase
acuosa (Tabla 4;Figuras 9y10). Y se simula la distribución de
escutelarina en las gotas de emulsión (Figura 11).
En comparación con la solución de escutelarina, el comportamiento de la emulsión está
constituido principalmente por el comportamiento de la escutelarina en la interfaz en lugar
del comportamiento de la escutelarina en la fase oleosa.
3.3.4. Distribución de escutelarina ionizada y unionizada en
emulsiones.
La escutelarina es inestable en agua y aproximadamente el 90% de la emulsión es
agua, por lo que la estabilidad química de la escutelarina en emulsión debe
ser estudiado de manera integral. Se informa que la estabilidad del
fármaco se puede mejorar convirtiendo el fármaco hidrófobo en emulsión
(El-Sayed y Repta1983). Este estudio asumió que la constante de
velocidad de degradación del fármaco en la emulsión puede reflejar no
solo la proporción del fármaco en las fases de aceite y agua, sino también
la degradación en las dos fases, sin considerar la interfaz. Además, la
escutelarina ionizada y unionizada tiene diferentes estabilidades, por lo
que determinar la distribución de la escutelarina ionizada y unionizada en
emulsión es un requisito previo para comprender su estabilidad en el
sistema de emulsión.
Tanto la escutelarina iónica como la no iónica tienen actividad
superficial y pueden distribuirse en la interfaz. Con base en los datos
anteriores, se especula la distribución de dos formas de escutelarina
en la fase de interfaz y en la fase acuosa: supongamos (a) hay pocos
fármacos solubles en la fase oleosa y se ignoran; (b) el volumen de la
interfaz,V1, es el volumen de fosfolípidos. Los coeficientes de
distribución de la escutelarina unionizada e ionizada en la interfaz
son y y los coeficientes de distribución de la escutelarina unionizada
e ionizada en la fase acuosa son y Luego los coeficientes de partición
de la escutelarina neutra e iónica en la interfaz y el agua
fase son los siguientes:CohICI, CW.oh
CW.:
kdoh
¼CohI=CohW. (2)
kd¼CI=CW. (3)
Establezca las fracciones de distribución de fármacos en la interfaz y la fase
de agua como fIyFaq(¼1 FI) respectivamente, t gallina

Tabla 3.Distribución de escutelarina en emulsión que contiene 0,4 mg/ml de escutelarina a

distintos pH.

pH de la emulsión Fase de partículas (%) Fase acuosa (%)

3.0 96,85 3.15
4.5 96,17 3.83
6.0 88,29 11.71
7.4 50.02 49,98
8.0 38.07 61,93

Tabla 4.Distribución de escutelarina en emulsión a varios pH.

pH de la emulsión Fase oleosa (%) Fase de interfaz (%) Fase acuosa (%)
3.0 0.247 96,61 3.15
4.5 0.221 95,95 3.83
6.0 0.126 88.17 11.71
7.4 0,125 49,90 49,98
8.0 0.093 37,98 61,93

Figura 10.Distribución de escutelarina en las fases interfacial (-) y acuosa. (-)en

la emulsión que contiene 0,4 mg/ml de escutelarina en función del pH a 37 C.

Figura 9.Partición de escutelarina entre fases acuosas (negro puro) y fase oleosa
(patrón de cuadrícula) a diferentes pH. Cantidad calculada de escutelarina en la
interfaz (patrón de sarga).
Figura 9 (2)_F009.jpg
Figura 11.Un modelo esquemático de emulsión de escutelarina.
748 M. MA ET AL.

dCIohþCI ÞVI 3.4.1. Impacto de la escutelarina en la interfaz sobre la estabilidad física.

FI¼ (4)
dCIþC
oh IÞVIþ ðCoh W.þCW.ÞVW. idad de la emulsión
Utilizando una emulsión en blanco como contraste, el impacto de la
Multiplica el numerador y denominador de la fórmula por½hþ
escutelarina en el tamaño de partícula de la emulsión se ilustra enFigura 13.
:
Coh
W. Los tamaños de partículas de la emulsión que contiene fármaco preparada
dkoh þkdkaÞVI mediante diferentes tiempos de homogeneización son más pequeños que los
d½hþ
FI¼ (5) de la emulsión en blanco bajo la misma presión de homogeneización. Esto se
dhþþkdkaÞVIþ
dkoh½
ð½hþþkaÞV w
atribuye a la actividad superficial de la escutelarina y a la agregación de
Luego sustituye los datos enFigura 10. Ajustando con el análisis de mínimos moléculas de escutelarina en la interfaz aceite-agua. Este tipo de
cuadrados (R2¼0,9884), obtiene los siguientes resultados: comportamiento puede disminuir la tensión interfacial aceite-agua, facilitando
la emulsificación y reduciendo el tamaño de las partículas.
kdoh
¼2413:95
El impacto de diferentes concentraciones de fármaco sobre el potencial
kd¼25:14 zeta de la emulsión en el rango de pH 3,0 a 8,0 se muestra enFigura 14. Las
concentraciones de fármaco tienen una influencia mínima sobre el potencial
Establezca las fracciones de distribución de escutelarina ionizada zeta cuando el pH es 3,0, pero este impacto se vuelve mucho mayor cuando el
en la interfaz y la fase acuosa como y las fracciones de distribución pH es 8,0, lo que puede explicarse por el modelo de distribución interfacial de
de escutelarina ionizada en la interfaz y la fase acuosa como y fármacos iónicos y no iónicos (Zhong et al.2005): cuando el pH es bajo, la
entoncesFoh
IFoh
W. ,FIFW., mayoría de los fármacos en la interfaz son no iónicos y contribuyen poco al
potencial zeta, por lo que el potencial zeta es insignificante.
Foh CIoh
VI
I¼ (6) ligeramente inferior al de la emulsión en blanco; cuando el pH es alto, los
METROt
fármacos en la interfaz son principalmente iónicos y contribuyen
oh
Foh CW.VW. (7) en gran medida al potencial zeta, por lo que el potencial zeta disminuyó
W.¼
METROt significativamente.

CV ElKeEl valor de las muestras que contenían escutelarina fue

I I
FI¼ (8) significativamente menor que el de las emulsiones de placebo (Figura 15).
METROt

Esto se atribuye a que la escutelarina es tensioactiva y a que la mayoría

CW.VW. de los fármacos existen en la interfaz. Estas características tienden a
FW.¼ (9)
METROt
disminuir la tensión interfacial y estabilizar la película de interfaz aceite-
Las fracciones de distribución de fármacos iónicos y no iónicos en la fase de
agua, por lo que la estabilidad de la emulsión contra la gravedad podría
mejorarse y podría reducir aún más el fenómeno de que las gotas de
interfaz y en la fase acuosa se muestran enFigura 12. Se puede observar que la
aceite se fusionen y floten.
aparente pkade los medicamentos en la interfaz es 7.08, y los medicamentos
combinados con la interfaz tienen una p relativamente altaka. Esta conclusión
es consistente con el resultado de que es difícil que los fármacos aniónicos
permanezcan en la interfaz debido a la existencia de una fuerza de repulsión
eléctrica en la interfaz.

3.4. Aplicación de la teoría de la interfaz.

Al discutir y resumir teóricamente los resultados experimentales,

no es difícil explicar algún fenómeno peculiar de las emulsiones
de escutelarina.

Figura 13.Tamaño de partícula de la emulsión de placebo ( ) y la emulsión que contiene 0,4 mg/ml de
escutelarina (-) en función del ciclo de homogeneización (media ± DE,norte¼3).

Figura 12.Distribución de moléculas de escutelarina ionizadas y unionizadas en la

interfaz y fase acuosa en la emulsión de escutelarina de 0,4 mg/ml en función del pH
Figura 14.Potencial zeta versus pH para la emulsión de placebo ( ) y la emulsión que
a 37 C.
contiene 0,1 mg/ml (-) y 0,4 mg/ml (-) de escutelarina (media ± DE,norte¼3).

Figura 15.Kevalor versus pH para la emulsión de placebo ( ) y la emulsión que contiene 0,1
mg/ml (-) y 0,4 mg/ml (-) de escutelarina (media ± DE,norte¼3).
Figura 16.Contenido de escutelarina en emulsiones con diferente pH después de ser depositadas a
80 C durante 1 h. Las barras vacías representan el contenido inicial y las barras grises representan el
contenido después del almacenamiento (media ± DE,norte¼3).
3.4.2. Impacto de la escutelarina iónica y no iónica en la estabilidad
química de la emulsión.
El contenido de escutelarina en la emulsión con fármaco y sin
estabilizador depositada a 80 C durante 1 h a diferente pH se muestra
en Figura 16. Dado que la emulsión de pH 3,0 se floculó después de
colocarse a una temperatura alta, no tuvo un resultado de medición
de contenido. Aparentemente, cuanto mayor es el pH de la emulsión,
más rápido se degrada el fármaco. Se puede atribuir a que la
proporción de ionómeros fácilmente degradados en la interfaz y la
fase acuosa aumenta a medida que aumenta el pH de la emulsión.
Entonces, cuanto mayor sea el pH, peor será la estabilidad química
de la formulación.
4. Conclusión
En resumen, estudiamos las propiedades superficiales e interfaciales de
la escutelarina y establecimos un modelo trifásico de emulsión de
escutelarina. Las propiedades de la interfaz de la emulsión de
escutelarina se estudiaron sistemáticamente desde una perspectiva
teórica y experimental y la teoría de la interfaz explicó con éxito el
fenómeno fisicoquímico especial de la emulsión de escutelarina. El
modelo trifásico rompe con el concepto tradicional de que sólo se pueden
utilizar fármacos liposolubles en emulsiones y amplía la gama de
selecciones de fármacos para emulsiones. La teoría de la interfaz tiene
cierta importancia rectora para cargar fármacos con poca solubilidad en
grasas y agua en el sistema de emulsión.
DESARROLLO Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA 749
Declaración de divulgación
Los autores no informaron ningún posible conflicto de intereses.
Fondos
Este proyecto ha sido financiado en parte con el Programa Nacional Clave
de Investigación y Desarrollo de China [2017YFA0205502,
2017YFA0205501], la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China
[82073804] y los Fondos de Investigación Fundamental para las
Universidades Centrales [2242018K3DN30].
Referencias
El-Sayed A-AA, Repta AJ. 1983. Solubilización y estabilización de
un fármaco antineoplásico en investigación (NSC no. 278214) en una
formulación intravenosa que utiliza un vehículo en emulsión. Int J Pharm.
13(3):303‒312.
Gu FG, Wu CZ, Liu HZ. 2010. Avance en estudios de vía intravenosa.
emulsiones en china. Chin J Nuevas drogas. 19(16):1415‒1421.
Kawakami S, Yamashita F, Hashida M. 2000. Carácter de disposición.
ísticas de emulsiones y fármacos incorporados tras inyección
sistémica o local. Adv Drug Deliv Rev. 45(1):77‒88.
Klang V, Matsko N, Raupach K, El-Hagin N, Valenta C. 2011.
Desarrollo de nanoemulsiones a base de estearato de sacarosa y
optimización medianteC-ciclodextrina. Eur J Pharm Biofarmacia.
79(1):58‒67.
Levy MY, Schutze W, Fuhrer C, Benita S. 1994. Caracterización de
Interfaz de emulsión submicrónica de diazepam: papel del ácido oleico. J
Microencapsula. 11(1):79‒92.
Lohner K. 1991. Efectos de pequeñas moléculas orgánicas sobre el fósforo.
Transiciones de fase lipídica. Chem Phys Lípidos. 57(2‒3):341‒362. Lv
W, Guo J, Ping Q, Song Y, Li J. 2008. Farmacoterapia comparativa
Cinética de liposomas de breviscapina en perros, conejos y ratas. Int J
Pharm. 359(1‒2):118‒122.
Norde-n TP, Siekmann B, Lundquist S, Malmsten M. 2001.
Caracterización fisicoquímica de una emulsión o/w estabilizada con
fosfolípidos que contiene un fármaco para administración intravenosa. Eur
J Pharm Ciencias. 13(4):393‒401.
Sun CY, Nie J, Zheng ZL, Zhao J, Wu LM, Zhu Y, Su ZQ, Zheng GJ,
Feng B. 2019. Efecto renoprotector de la escutelarina sobre la lesión
renal inducida por cisplatino en ratones: impacto sobre la inflamación,
la apoptosis y la autofagia. Farmacéutico Biomédico. 112:108647.
Teagarden DL, Anderson BD, Petre WJ. 1988. Determinación de la
Distribución de fases dependiente del pH de prostaglandina el en una emulsión
lipídica mediante ultrafiltración. Res. farmacéutica. 05(8):482‒487.
Xiong F, Wang H, Geng KK, Gu N, Zhu JB. 2010. Preparación optimizada.
Ación, caracterización y biodistribución en el corazón de la emulsión
lipídica de breviscapina. Toro de Chem Pharm. 58(11):1455-1460.
Yamaguchi T, Tanabe N, Fukushima Y, Nasu T, Hayashi H. 1994.
Distribución de prostaglandina E.1en emulsión de lípidos en relación con la
tasa de liberación de partículas de lípidos. Toro de Chem Pharm. 42(3): 646‒
650.
Zhang ZH, Liu WL. 1987.膜⽣物物理学 [Biofísica de membranas.
Shanghai: Prensa de educación superior. pag. 29‒36.
Zhong HJ, Deng YJ, Wang LJ, Du S, Wang XM, Chen Y. 2005.
Estudio del coeficiente de partición liposoma/agua de
breviscapina y su aplicación. Universidad J Shenyang Pharm.
2005(02): 110‒114.
Los derechos de autor de Pharmaceutical Development & Technology son propiedad de Taylor & Francis Ltd y su contenido no
puede copiarse ni enviarse por correo electrónico a varios sitios ni publicarse en un servidor de listas sin el permiso expreso por
escrito del titular de los derechos de autor. Sin embargo, los usuarios pueden imprimir, descargar o enviar por correo electrónico
artículos para uso individual.